一种流式细胞仪的数据处理方法及流式细胞仪与流程

本发明涉及细胞仪，特别涉及一种流式细胞仪的数据处理方法。

背景技术：

1、目前，流式细胞仪是一种可以对细胞，或者一些特殊微粒(如聚苯乙烯微球)的特性(如大小，折射率，内部结构的复杂程度等)进行快速分析的仪器。在含有细胞的样本被鞘液压缩聚焦，进入流体池中后形成层流，细胞被压缩在样本流线上，一个一个地通过激光光斑，使用探测器在光轴方向的前方和光轴的90°方向测试细胞经过激光光斑产生的散射光，以及所携带的荧光染料产生的特异性荧光，从而测试细胞的一些特性。

2、流式细胞仪记录的数据通常包括前向散射光强度，侧向散射光强度，荧光强度等数据。获取这些数据主要通过光电二极管，雪崩二极管或者光电倍增管等手段，通常为了达到一定的动态范围，这个探测器的增益都是可变的，因此测量得到的数据大小由光信号的大小和探测器的增益共同决定。因此探测器的增益值设置为不同值时，所测量的数据不具有可比性，也因此造成不同增益条件下的补偿矩阵也不同。

3、在公开的商用流式细胞仪中，仍然存在这些问题。

4、这些流式细胞仪测试过程中，要求数据测量采用同一配置，同一激光频率进行测试，测试结果没有对比性。

5、这些仪器也具备增益控制功能，但是，探测器之间的差异性也导致传统的仪器无法实现归一化的功能。

6、传统的流式细胞仪在进行细胞计数的时候，对细胞悬液进行快速分析，通过对流动液体中排列成单列的细胞进行逐个检测，得到该细胞的光散射和荧光指标。

7、因此，现有技术的流式细胞仪只能检测排列的细胞，无法直接进行计数，而且在计数上，因此需要细胞的排列，对于散布在流动液体中的细胞，无法进行计数，存在了计数偏差，现有的流式细胞仪其硬件虽然有细胞液体的流出计数通道，但是总会存在一些细胞无法实现完全的单列排列，所以无法规避计数偏差。

技术实现思路

1、本发明提供一种流式细胞仪的数据处理方法，用以解决上述背景技术中的情况。

2、本发明提出一种流式细胞仪的数据处理方法，包括：

3、预先设置流式细胞仪不同激光器的成像测试参数，并构建不同测试参数下设置标记模板；其中，

4、标记模板用于对流式细胞仪检测的细胞数据进行标记；

5、获取流式细胞仪输出的图像信号数据，并将图像信号数据按照激光器类型，导入标记模板，生成多个标记数据集，并计算标记偏差；其中，

6、每个标记数据集中设置有细胞的粒子时间编码；

7、通过标记数据集，确定不同激光器下切取的细胞粒子图像；

8、根据细胞粒子编码图像和粒子时间编码，对不同细胞粒子进行计数，并确定不同激光器下粒子计数数据与均值数据的计数偏差；

9、判断最接近的画像偏差和计数偏差对应的细胞检测数据，并作为最终检测数据。

10、优选的，所述设置测试参数包括：

11、获取流式细胞仪成像系统的成像检测距离；

12、通过成像检测距离，确定不同激光器的成像焦距；

13、通过成像焦距，确定不同激光器的成像测试参数；其中，

14、成像测试参数包括光电参数和曝光参数。

15、优选的，所述标记模板包括参数标记和渲染标记；其中，

16、参数标记用于提取不同激光器的激光参数数据和鞘液属性数据，并进行损失计算；其中，

17、激光参数数据用于确定最佳聚焦距离，进行聚焦点标记；

18、鞘液属性数据用于确定激光透析度，进行精度标记；其中，

19、鞘液属性数据包括洁净度、吸光度、ph值、渗透压；

20、渲染标记用于提取图像信号数据中染色后，细胞的染色数据和微流泵鞘液喷出数据，并进行染色补偿；其中，

21、细胞染色数据用于确定不同细胞的特异识别色彩，进行细胞染色标记；

22、微流泵鞘液喷出数据用于确定不同体积细胞的轴线数据，进行细胞定位，进行细胞定位标记。

23、优选的，所述损失计算包括：

24、预先通过流式细胞仪的成像数据，确定不同细胞在不同激光器下的成像光斑图像，作为训练样本；

25、构建基于激光器精度评估的全卷积网络模型；

26、将训练样本导入全卷积网络模型进行训练，并进行优化，生成达到预设收敛系数的，目标网络模型；

27、在目标网络模型中，输入不同激光器的聚焦损失评估系数和鞘液属性损失系数，并在多次迭代拟合后，确定不同激光器在不同聚焦距离下的损失参数。

28、优选的，所述染色补偿包括：

29、将流式细胞仪输出的成像数据划分为单染色图像和多染色图像；

30、建立单染色图像的初始矩阵；

31、建立多染色图像的切换矩阵；

32、预先通过使用多个单染色补偿对照来生成初始矩阵的初始参数，生成样本矢量；

33、再通过样本矢量做为切换矩阵来生成多染色图像，进而通过多染色图像进行染色补偿。

34、优选的，所述粒子时间编码包括:

35、设置时间编码器，在时间编码器处接收每个时间点的粒子时间参数和形态参数；

36、在所述编码器处对所述数据位执行第一转换编码，以基于粒子时间参数和形态参数生成被编码的数据位的序列；

37、在时间编码器处对细胞例子执行计数编码，以生成计数数据；

38、在时间编码器处对计数数据执行第二转换编码，以生成被编码的粒子时间编码。

39、优选的，所述确定不同激光器下粒子计数数据与均值数据的计数偏差，包括：

40、建立不同激光器的计数模板，并生成模板集合；

41、建立模板对比组，确定每组中待比对的第一模板和第二模板；

42、对所述第一模板和第二模板进行数据对比，得到所述第一模板和第二模板的差异信息；

43、对差异信息进行错乱计数修正、错乱均值修正和计数差异修正中至少一种方式进行差异计算，确定计数偏差。

44、优选的，所述方法还包括：

45、设置多个数据传输通道，每个数据传输通道对应一个激光器；

46、在流式细胞仪向生成的数据发送时，根据对应的激光器，生成数据包；

47、通过低速数据单向传输的方式发送数据传输命令，以使数据指令区别不同激光器的数据处理信号通过高速数据单向传输，生成对应的细胞成像图像。

48、优选的，所述方法还包括：

49、在启动不同激光器的光源和微型高清相机时，观测鞘流形成情况及成像效果，并调节位移平台使系统工作在去焦模式下；

50、采集记录二维光散射的视频数据；

51、并在采集结束后，更换样本液和鞘液，使用酒精溶液和超纯水依次冲洗系统；

52、使用预设分析算法统计成像图像中小球数量，确定细胞数据。

53、一种流式细胞仪，适用于上述方法，所述流式细胞仪包括：

54、激光系统，成像系统由多种不同光源频率的激光器构成；

55、成像系统，成像系统由微型高清相机构成，用于对不同激光器下的细胞计数图像进行成像处理；

56、计数处理系统，用于对成像后的细胞图像进行计数，确定最终检测数据。

57、本发明的其它特征和优点将在随后的说明书中阐述，并且，部分地从说明书中变得显而易见，或者通过实施本发明而了解。本发明的目的和其他优点可通过在所写的说明书以及附图中所特别指出的结构来实现和获得。

58、下面通过附图和实施例，对本发明的技术方案做进一步的详细描述。