一种盐酸贝尼地平中间体I有关物质的检测方法与流程

本发明属于药物质量控制，具体涉及一种盐酸贝尼地平中间体i有关物质的检测方法。

背景技术：

1、盐酸贝尼地平(benidipine hydrochloride)化学名称为：(r,r)-(+/-)-2,6-二甲基-4-(3-硝基苯)-1,4-二氢-3,5-吡啶二羧酸-甲基-(r)-1-苄基-3-哌啶基酯盐酸盐，盐酸贝尼地平在临床上主要用于原发性高血压、心绞痛的治疗，其可平稳血压，改善动脉血管顺从性同时不产生不良反应。在药物的制备过程中，难免会产生多种杂质，药品杂质的种类及含量会影响用药的安全性，成品药中杂质越多，可能出现的用药风险越大。因此，需要对盐酸贝尼地平的杂质进行有效分离、检测研究，这对盐酸贝尼地平的生产、质量控制有重要意义。

2、盐酸贝尼地平中间体i是合成盐酸贝尼地平的重要中间体，化学名称为1,4-二氢-2,6-二甲基-4-(间硝基苯基)-3,5-吡啶二羧酸二甲酯。盐酸贝尼地平中间体i中有关杂质众多，在研究过程中，我司发现部分杂质具体如下：

3、

4、

5、盐酸贝尼地平中间体i有关物质，特别是杂质sm-1和本发明新发现的杂质r(6-甲基-2,4-双(3-硝基苯基)-1,2,3,4-四氢嘧啶-5-羧酸甲酯)以及其他的硝基化合物，都存在基因毒性杂质警示结构，它们很可能在进一步的化学合成中生成潜在基因毒性化合物，进而有可能影响最终产品盐酸贝尼地平的质量，因此，建立完善的盐酸贝尼地平中间体i有关物质的质量控制方法是非常重要的；对于质量控制，如何将盐酸贝尼地平中间体i有关物质进行检测和与盐酸贝尼地平中间体i进行有效分离是至关重要的一环。

技术实现思路

1、针对现有技术的问题，本发明提供一种盐酸贝尼地平中间体i有关物质的检测方法，目的在于针对一种盐酸贝尼地平中间体i有关物质及新发现的杂质r提供准确的检测方法。

2、一种盐酸贝尼地平中间体i组合物，包括如下重量百分含量的组分：盐酸贝尼地平中间体i 90.0-93.3％、杂质r不高于10.0％，

3、其中，

4、所述盐酸贝尼地平中间体i为1,4-二氢-2,6-二甲基-4-(间硝基苯基)-3,5-吡啶二羧酸二甲酯；

5、所述杂质r的重量百分含量不为0，所述杂质r为6-甲基-2,4-双(3-硝基苯基)-1,2,3,4-四氢嘧啶-5-羧酸甲酯。

6、本发明提供杂质r用于作为盐酸贝尼地平中间体i质量检测方法的对照品的用途，所述盐酸贝尼地平中间体i为1,4-二氢-2,6-二甲基-4-(间硝基苯基)-3,5-吡啶二羧酸二甲酯，所述杂质r为6-甲基-2,4-双(3-硝基苯基)-1,2,3,4-四氢嘧啶-5-羧酸甲酯。

7、本发明还提供一种盐酸贝尼地平中间体i有关物质的检测方法，所述盐酸贝尼地平中间体i为1,4-二氢-2,6-二甲基-4-(间硝基苯基)-3,5-吡啶二羧酸二甲酯，采用高效液相色谱法检测所述盐酸贝尼地平中间体i，

8、色谱条件为：

9、以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以ph为5.5-7.5的磷酸盐溶液和乙腈进行配比作为流动相a或流动相b，所述流动相a为磷酸盐溶液与乙腈的体积比为(60-65):(35-40)的溶液；所述流动相b为磷酸盐溶液与乙腈的体积比为(20-25):(75-80)的溶液。

10、优选的，以ph为6.5-7.2的磷酸盐溶液和乙腈进行配比作为流动相a或流动相b。

11、优选的，所述磷酸盐溶液中磷酸盐的浓度为0.01-0.02mol/l，和/或，所述磷酸盐溶液采用无水磷酸氢二钾或无水磷酸氢二钠配制而成。

12、优选的，色谱条件还包括：洗脱方式为梯度洗脱，洗脱条件为：

13、 时间(分钟) 流动相a(％) 流动相b(％) 0 100 0 8-13 75-85 15-25 16-25 55-76 24-45 28-32 28-32 68-72 34-36 30-33 67-70 37-42 90-100 0-10 44-48 100 0

14、进样量：10μl；流速：0.8-1.2ml/min；柱温为25℃-35℃，检测波长为230-238nm。

15、优选的，色谱条件还包括：洗脱方式为梯度洗脱，洗脱条件为：

16、 时间(分钟) 流动相a(％) 流动相b(％) 0 100 0 9-12 80-85 15-20 20-22 55-65 35-45 28-30 28-30 70-72 35-36 30-33 67-70 37-42 95-100 0-5 45-48 100 0

17、进样量：10μl；流速：0.9-1.1ml/min；柱温为28℃-35℃，检测波长为233-238nm。

18、优选的，液相色谱法采用的色谱柱为：phenomenex gemini，250mm×4.6mm×5μm。

19、优选的，液相色谱法中采用乙腈作为溶剂，将盐酸贝尼地平中间体i样品配制成供试品溶液，所述供试品溶液中盐酸贝尼地平中间体i的浓度为0.3-0.4mg/ml。

20、优选的，所述高效液相色谱法检测得到的色谱图中，包括杂质r的色谱峰，所述杂质r为6-甲基-2,4-双(3-硝基苯基)-1,2,3,4-四氢嘧啶-5-羧酸甲酯，所述杂质r的相对保留时间0.95。

21、本发明首次发现了盐酸贝尼地平中间体i中含有杂质r，杂质r化学名称为6-甲基-2,4-双(3-硝基苯基)-1,2,3,4-四氢嘧啶-5-羧酸甲酯，结构式为：

22、

23、进一步的，本发明通过优化色谱条件，实现了利用高效液相色谱法对盐酸贝尼地平中间体i的质量检测。本发明的质量检测方法对样品中的杂质r和其他已知杂质分离度均大于1.5，杂质分离情况较好，可高效的检测盐酸贝尼地平中间体i有关物质。因此，本发明提供的质量检测方法对各杂质检出准确度高、专属性好、分离度高、检出限低，可实现药品质量高效控制，提升药品的效用和安全性；且该检测方法，操作便捷，实用性强。因此，本发明具有很好的应用前景。

24、显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。

25、以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。