一种淡豆豉配方颗粒质量检测方法与流程

本发明属于中药材质量控制，具体涉及一种淡豆豉配方颗粒质量检测方法。

背景技术：

1、中药配方颗粒又可以称之为中药免煎颗粒、新型中药颗粒饮片、中药单味浓缩颗粒、免煎饮片等，主要是依托现代、先进制药科技，将中药饮片通过过滤、提取、浓缩、制粒以及干燥等过程操作进而制备成为颗粒剂，是基于中医药国际化以及现代化发展形势下对传统、常规中药的一种最主要用法补充。产品保持了中药饮片的性味与功效，质量稳定，应用于中医临诊处方的调配，适应辨证施治、处方变化的需要，且有不需煎煮，服用方便、吸收快捷、剂量准确、安全清洁、携带便利等优点。单味药材经水提、浓缩、干燥、制粒等工序制得配方颗粒，与传统的药材相比，配方颗粒的形态特征发生明显改变，其产品真伪和质量无法用肉眼观察得到。因此，有必要建立中药配方颗粒质量评价体系，以此全面反映配方颗粒的内在品质。

2、淡豆豉为豆科植物大豆glycine max(l.)merr.的干燥成熟种子(黑豆)的发酵加工品经炮制加工品，其性味苦寒，具有解表，除烦，宣郁，解毒之功效。用于伤寒热病，寒热，头痛，烦躁，胸闷，淡豆豉是一味非常重要的中药，当前国内并没有关于淡豆豉配方颗粒方面的质量标准。

技术实现思路

1、本发明的目的就是要解决现有技术的不足，提供一种全面反映配方颗粒的内在品质及更好的控制配方颗粒质量的淡豆豉配方颗粒质量检测方法。

2、为达到上述目的，本发明的技术方案是这样实现的：

3、一种淡豆豉配方颗粒质量检测方法，包括如下检测方法：

4、对淡豆豉配方颗粒进行薄层鉴别、特征图谱构建、大豆苷元(c15h10o4)和染料木素(c15h10o5)含量测定，将淡豆豉配方颗粒的大豆苷元和染料木素的总含量标准限定为0.16mg/g-1.06mg/g，其中，薄层鉴别采用薄层色谱法进行鉴别，特征图谱构建、大豆苷元和染料木素含量测定均采用液相色谱法测定；

5、其中，液相色谱法测定特征图谱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相a，以0.2％磷酸溶液为流动相b，按表a的规定进行梯度洗脱：

6、表a梯度洗脱程序

7、

8、

9、流速为每分钟1.0ml；柱温为35℃；检测波长为215nm；

10、所述液相色谱法测定特征图谱的步骤包括：

11、s11，制备参照物溶液：取淡豆豉对照药材0.5g，加入甲醇20ml，加热回流40分钟，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，作为对照药材参照物溶液a；另取大豆苷元、染料木素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含大豆苷元、染料木素各10μg的混合溶液，作为对照品参照物溶液a；

12、s12，制备供试品溶液a：精密称量研细的淡豆豉配方颗粒1.0g，置容器中，加入70％甲醇20ml，加热回流20分钟，放冷，摇匀，过滤，取续滤液，即得；

13、s13，分别吸取对照药材参照物溶液a、对照品参照物溶液a与供试品溶液a各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

14、进一步的，所述薄层色谱法包括如下步骤：

15、s21，取淡豆豉配方颗粒样品1.0g，加95％乙醇25ml，超声处理30min，过滤，滤液蒸干，残渣加1ml乙醇溶解，作为供试品溶液b；取麦芽糊精1.0g，加95％乙醇25ml，超声处理30min，过滤，滤液蒸干，残渣加1ml乙醇溶解，制成阴性样品溶液；

16、s22，取淡豆豉对照药材2.0g，青蒿对照药材0.2g，分别加95％乙醇25ml，超声处理30min，过滤，滤液蒸干，残渣加1ml乙醇溶解，制成对照药材溶液b；

17、s23，取大豆苷元对照品及染料木素对照品，加95％乙醇分别制成每1ml各含0.5mg的溶液，作为对照品溶液b；

18、s24，进行薄层色谱分析，薄层板：硅胶gf254薄层板；点样量：吸取供试品溶液b 1μl，阴性样品溶液1μl，对照品溶液b 5μl，对照药材溶液b 5μl；展开剂：甲苯-甲酸乙酯-甲酸；在波长365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与青蒿对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的蓝色荧光主斑点；然后在波长254nm紫外灯下检视，供试品色谱中，在与淡豆豉对照药材及对照品色谱相应位置上，显相同颜色的荧光斑点。

19、进一步的，所述液相色谱法测定大豆苷元和染料木素含量的步骤包括：

20、s31，取大豆苷元、染料木素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含大豆苷元、染料木素各10μg的混合溶液，作为对照品溶液c；

21、s32，称量淡豆豉配方颗粒1.0g，置瓶中，精密加入乙醇20ml，加热回流20分钟，放冷，再称重，用乙醇补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液c；

22、s33，精密吸取对照品溶液c与供试品溶液c各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；

23、其中，液相色谱法的条件，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以体积比27：73的乙腈：0.2％磷酸溶液为流动相；流速为每分钟1.0ml；柱温为35℃；检测波长为260nm。

24、进一步的，所述步骤s11中对照药材参照物溶液a的制备中加入体积比70％的甲醇；对照品参照物溶液a的制备中加入体积比70％的甲醇。

25、进一步的，所述步骤s24中甲苯：甲酸乙酯：甲酸的体积比为10：4：0.5。

26、进一步的，所述步骤s31中甲醇的体积比为70％；步骤s32中乙醇的体积比为95％。

27、进一步的，还包括如下检测方法：对淡豆豉配方颗粒进行性状鉴别、颗粒剂通则项检查、浸出物检查，其中，浸出物采用热浸法进行测定。

28、进一步的，所述热浸法以乙醇为溶剂，采用醇溶性浸出物测定法项下的热浸法测定浸出物范围。

29、进一步的，所述热浸法测定浸出物范围≥11.6％。

30、进一步的，所述颗粒剂通则项检查包括水分、粒度、溶化性检查、微生物限度和装量差异检查。

31、本发明的有益效果是，对淡豆豉配方颗粒进行性状考察、薄层鉴别、特征图谱测定、颗粒剂通则项检查、浸出物检查和含量测定，其中薄层鉴别采用薄层色谱法进行鉴别；颗粒剂通则项检查包括水分、粒度、溶化性检查、微生物限度和装量差异检查；浸出物采用热浸法测定；特征图谱和大豆苷元、染料木素含量测定均采用液相色谱法测定；本发明的淡豆豉配方颗粒质量检测方法，通过多个方面的指标来检测淡豆豉配方颗粒的质量，能够建立可行的淡豆豉配方颗粒的质量标准，实现淡豆豉配方颗粒质量的有效控制，为淡豆豉配方颗粒质量的稳定奠定了坚实的基础；

32、采用本技术的色谱条件进行液相分析，可以得到分离度更好更清晰的特征图谱，方法专属性强，稳定性较好，精密度高，重现性较好；

33、采用本技术的大豆苷元和染料木素总含量的测定方法专属性强、稳定性高，对于淡豆豉标准汤剂的质量检测有一定的参考价值；本品每1g含大豆苷元(c15h10o4)和染料木素(c15h10o5)的总量应为0.16mg～1.06mg。