一种丝瓜络配方颗粒质量检测方法与流程

本发明涉及中药材质量控制，具体涉及一种丝瓜络配方颗粒质量检测方法。

背景技术：

1、现代药物需要具有稳定均一、安全和有效的三大特性，对于中成药而言，需要采用多种手段进行检测，保证检测结果的可靠性和稳定性。中药配方颗粒是采用现代科学技术，仿照传统中药汤剂煎煮的方式，将中药饮片经浸提、浓缩、干燥等工艺精制而成的单味中药产品。产品保持了中药饮片的性味与功效，质量稳定，应用于中医临诊处方的调配，适应辨证施治、处方变化的需要，且有不需煎煮，服用方便、吸收快捷、剂量准确、安全清洁、携带便利等优点。单味药材经水提、浓缩、干燥、制粒等工序制得配方颗粒，与传统的药材相比，配方颗粒的形态特征发生明显改变，其产品真伪和质量无法用肉眼观察得到。因此，有必要建立中药配方颗粒质量评价体系，以此全面反映配方颗粒的内在品质。丝瓜络为为葫芦科植物丝瓜luffa cylindrica(l.)roem.的干燥成熟果实的维管束，具有祛风、通络、活血、下乳的功效。目前，关于丝瓜络的配方颗粒还未形成一个系统的质量检测方法，现有的检测手段来检测丝瓜络配方颗粒尚不能准确反映出丝瓜络配方颗粒的整体内在质量，无法达到中药配方颗粒质量控制要求。因此，建立一种用于药材质量控制的丝瓜络配方颗粒质量检测方法十分必要。

技术实现思路

1、本发明的目的就是要解决现有技术的不足，提供一种准确反映配方颗粒内在品质以及更好的控制配方颗粒质量的丝瓜络配方颗粒质量检测方法。

2、为达到上述目的，本发明的技术方案是这样实现的：

3、本发明提供一种丝瓜络配方颗粒质量检测方法，包括：

4、对丝瓜络配方颗粒进行特征图谱构建和芹菜素-7-o-β-d-葡萄糖醛酸苷含量测定，将配方颗粒含量标准限定为每1g含芹菜素-7-o-β-d-葡萄糖醛酸苷含量为0.05mg～0.37mg，特征图谱构建及芹菜素-7-o-β-d-葡萄糖醛酸苷含量测定均采用液相色谱法；

5、采用液相色谱法测定特征图谱包括：以丝瓜络对照药材制成的溶液作为对照药材参照物溶液a，以芹菜素-7-o-β-d-葡萄糖醛酸苷对照品制成的溶液作为对照品参照物溶液a，以丝瓜络配方颗粒样品制成的溶液作为供试品溶液a，分别精密吸取对照药材参照物溶液a、对照品参照物溶液a和供试品溶液a，分别注入液相色谱仪，测定，即得；其中，采用的色谱条件为，色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，柱长为250mm，内径为4.6mm，粒径为5μm；流动相：以乙腈为流动相a，以0.2％磷酸溶液为流动相b，按表a的规定进行梯度洗脱；

6、表a梯度洗脱程序

7、 时间(min) 流动相a(％) 流动相b(％) 0～5 10 90 5～35 10→20 90→80 35～45 20 80 45～70 20→40 80→60 70～75 40→80 60→20 75～80 80→10 20→90

8、流速：1.0ml/min；柱温：35℃；进样量：10μl；检测波长：270nm。

9、在其中一实施例中，还包括对丝瓜络配方颗粒采用照薄层色谱法进行鉴别，所述照薄层色谱法包括如下步骤：

10、(1)制备供试品溶液b：取丝瓜络配方颗粒样品适量，研细，取1g，加水20ml，加热至沸，超声处理30min，滤过，滤液用乙酸乙酯振摇提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，制得供试品溶液b；

11、(2)制备对照药材溶液b：取丝瓜络对照药材5g，加水100ml，煎煮30min，滤过，滤液浓缩至20ml，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，制得对照药材溶液b；

12、(3)进行薄层色谱分析：薄层色谱条件为，薄层板：硅胶g薄层板；点样量：供试品溶液b、对照药材溶液b各5μl；展开剂：以体积比为2:1的乙酸乙酯-环己烷溶液为展开剂，置氨蒸汽饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，热风吹干，置365nm紫外光灯下检视。

13、在其中一实施例中，采用液相色谱法测定特征图谱还包括如下步骤：

14、(1)制备对照药材参照物溶液a：取丝瓜络对照药材1g，加水50ml，煎煮1h，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇10ml，超声处理30min，摇匀，滤过，取续滤液，作为对照药材参照物溶液a；

15、(2)制备对照品参照物溶液a：取芹菜素-7-o-β-d-葡萄糖醛酸苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含芹菜素-7-o-β-d-葡萄糖醛酸苷20μg的溶液，作为对照品参照物溶液a；

16、(3)制备供试品溶液a：取丝瓜络配方颗粒适量，研细，取0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70％甲醇20ml，密塞，称定重量，超声处理30min，放冷，再称定重量，用70％甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液a。

17、在其中一实施例中，制备对照药材参照物溶液a的步骤中，超声处理的功率为300w，频率为40khz，制备供试品溶液a的步骤中，超声处理的功率为300w，频率为40khz。

18、在其中一实施例中，液相色谱法测定的供试品色谱图中呈现3个特征峰，并与对照药材参照物色谱中3个特征峰的保留时间相对应；以与芹菜素-7-o-β-d-葡萄糖醛酸苷对照品参照物峰的保留时间相对应的峰3为参照峰s，计算供试品色谱图中峰1、峰2与参照峰s的相对保留时间，规定值为：峰1相对保留时间0.28、峰2相对保留时间0.39，检测的特征峰的相对保留时间应在规定值的±10％范围之内。

19、在其中一实施例中，采用液相色谱法测定芹菜素-7-o-β-d-葡萄糖醛酸苷含量包括：进行液相色谱仪分析，以芹菜素-7-o-β-d-葡萄糖醛酸苷对照品制成的溶液作为对照品溶液c，以丝瓜络配方颗粒样品制成的溶液作为供试品溶液c，分别精密吸取对照品溶液c和供试品溶液c，分别注入液相色谱仪，测定，即得；其中，采用的色谱条件为，色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，柱长为250mm，内径为4.6mm，粒径为5μm；流动相：以体积比为22:78的乙腈-0.02％磷酸溶液为流动相；流速：1.0ml/min；柱温：35℃；进样量：10μl；检测波长：350nm。

20、在其中一实施例中，采用液相色谱法测定芹菜素-7-o-β-d-葡萄糖醛酸苷含量还包括如下步骤：

21、(1)制备对照品溶液c：取芹菜素-7-o-β-d-葡萄糖醛酸苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含芹菜素-7-o-β-d-葡萄糖醛酸苷20μg的溶液，作为对照品溶液c；

22、(2)制备供试品溶液c：取丝瓜络配方颗粒适量，研细，取0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70％甲醇20ml，密塞，称定重量，超声处理30min，放冷，再称定重量，用70％甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液c。

23、在其中一实施例中，还包括如下检测方法：对丝瓜络配方颗粒进行性状鉴别、干浸膏出膏率检查、浸出物检查，浸出物检查采用热浸法测定。

24、在其中一实施例中，所述热浸法以乙醇为溶剂，采用醇溶性浸出物测定法项下的热浸法测定浸出物范围。

25、与现有技术相比，本发明提供的丝瓜络配方颗粒质量检测方法的有益效果是：通过对丝瓜络配方颗粒进行特征图谱构建及进行芹菜素-7-o-β-d-葡萄糖醛酸苷含量测定，来评定丝瓜络配方颗粒的质量，为产品的质量稳定奠定坚实的基础，能够建立丝瓜络配方颗粒可行的质量标准，实现丝瓜络配方颗粒质量的有效控制，并且，采用本技术的色谱条件进行液相分析，可以得到分离度更好峰尖更清晰的特征图谱，能够更准确反映出丝瓜络配方颗粒的质量，方法稳定性较好。丝瓜络饮片煎煮制得丝瓜络饮片配方颗粒，依据《中药配方颗粒质量控制与标准制定技术要求》，拟定了芹菜素-7-o-β-d-葡萄糖醛酸苷含量为0.05mg～0.37mg。