成人生长激素缺乏症患者血清特异性脂质组学标记物

本公开涉及医学、生物、临床诊断、脂质组学领域。具体而言，本公开提供了一组血清脂质组学标记物，其用于诊断成人生长激素缺乏症(aghd)所致的血脂失调。

背景技术：

1、生长激素(gh)是垂体前叶产生和分泌的一种关键肽类激素。它刺激肝脏产生胰岛素样生长因子1(igf-1)，影响脂肪、肌肉和骨骼等靶组织。蛋白质合成、葡萄糖代谢和脂质代谢都受到gh-igf-1轴的显著影响[1]。

2、垂体生长激素的分泌不足会导致生长激素缺乏症(ghd)。成人生长激素缺乏症(adult growth hormone deficiency，aghd)是由多种先天性和获得性疾病引起的，包括鞍区恶性肿瘤和垂体腺瘤等。颅内生殖细胞肿瘤(igct)是一组罕见的肿瘤，主要影响儿童和青少年，90％的病例发生在20岁之前[2]。由于它往往发生在松果体和鞍上区域，因此常常影响垂体和/或下丘脑[3]。尽管大多数igct患者在放疗、化疗和手术切除后预后良好，但由于肿瘤本身对下丘脑能量中心的潜在结构损伤，代谢性疾病的发病率很高，这些患者患代谢综合征的风险增加，而ghd的存在进一步增加了代谢紊乱的可能性。

3、aghd的主要代谢特征包括中心性肥胖、瘦体重减少、血脂异常、胰岛素抵抗和心脏代谢疾病风险增加[4,5]。其中，脂质代谢紊乱是一个非常突出的临床问题。甘油三酯(tg)和低密度脂蛋白胆固醇(ldl-c)升高与动脉粥样硬化和心脑血管事件的风险增加有关[5-7]。aghd患者患非酒精性脂肪性肝病(nafld)的风险也会增加，有些患者甚至会发展为终末期肝硬化[8]，因为gh直接减少肝细胞中的脂肪生成[9,10]。gh治疗可改善血脂紊乱和nafld[8]。尽管大量临床研究表明gh在脂质代谢中发挥着重要作用，包括对某些关键酶基因表达的影响，但在这一领域仍有许多问题尚未解决。脂质是体内重要的信号分子，在各种病理生理过程中发挥着重要作用。由于检测方法的分辨率有限，目前还缺乏对aghd的全面脂质组学评估。

技术实现思路

1、鉴于本领域的上述需求，根据本公开的一方面，提供了一组试剂在制备试剂盒中的用途，其中所述试剂盒用于诊断颅内生殖细胞肿瘤(igct)所致的成人生长激素缺乏症(aghd)，所述的一组试剂包含定量试剂的组合，所述定量试剂能够分别确定以下各标记物在血清样本中水平：

2、脂酰甘油(pg)、双(单酰基甘油)磷酸酯(bmp)、磷脂酰乙醇胺(pe)、磷脂酰肌醇(pi)、赖氨酸磷酸酰肌醇pe(lpe)、神经酰胺(cer)、磷脂酰基胆碱(pc)、神经酰胺三己糖苷(gb3)、甘油二酯(dag)、甘油三酯(tag)、烷基化磷脂酰乙醇胺(pe-o)、和烷基化磷脂酰胆碱(pc-o)。

3、本公开所用的术语“诊断”旨在涵盖确定受试者对某种疾病或病症的易感性、确定受试者是否患有某种疾病或病症。具体地，本公开所用的诊断意指确定igct所致aghd的发病或发病可能性(风险性、概率高低)，或者意指将患有igct所致aghd的受试者和健康对照区分开。

4、“患有”应当做最广泛地理解，包括：已经患有；或者在设定的显著水平处，患有所述疾病的概率统计学上显著高于对照。上下文将能够暗示“患有”的具体含义。

5、诊断型生物标记物：用于识别受试者是否具有特定疾病的状况、用于明确受试者所患疾病的具体性质。

6、在一些实施方案中，相较于健康对照中的水平，当受试者的血清样本中脂质pg、bmp、pe、pi、lpe、cer、pc、gb3、dag和tag的水平在统计学上均显著高于健康对照中的对应水平时；且相较于健康对照中的水平，当受试者的血清样本中脂质pe-o、和pc-o的水平在统计学上均显著低于健康对照中的对应水平时，则确定所述受试者患有igct所致aghd、或患有igct所致aghd的风险高。

7、在一些实施方案中，“显著高于”是指，相对于健康对照而言，脂质标记物的水平的提高程度存在统计学上的显著差异，p设置为例如0.5、0.1、0.05、0.01、甚至更低。作为一个示例，基于两个个体或群体测值，所得p值小于设定的0.05水平时，则认为两个个体或群体存在统计学上的显著差异。

8、在一些实施方案中，“显著低于”是指，相对于健康对照而言，脂质标记物的水平的降低程度存在统计学上的显著差异，p设置为例如0.5、0.1、0.05、0.01、0.005、0.001、0.0005、0.0001、甚至更低。例如，基于两个个体或群体测值，所得p值小于特定p值水平时，则认为两个个体或群体存在统计学上的显著差异。

9、在一些实施方案中，用于前述用途的定量试剂是质谱鉴定试剂。作为一个示例，当采用质谱鉴定试剂时，质谱鉴定试剂作广泛理解，不能仅解释为实体的化学试剂，也包含质谱鉴定参数(例如，对于某脂质而言代表性的m/z比)。当试剂盒制备成适用于质谱鉴定时，还任选包含选自以下的任一项或其组合：色谱柱、流动相、洗脱相、载剂等试剂或组件。

10、在一些实施方案中，所述试剂盒还任选包含确定以下附加标记物的定量试剂，所述附加标记物选自：生化总胆固醇(tc)、生化甘油三酯(tg)、低密度脂蛋白胆固醇(ldl-c)、非高密度脂蛋白胆固醇(非hdl-c)、载脂蛋白b(apob)、糖化血红蛋白(hba1c)、胰岛素抵抗指数(homa-ir)、tyg指数、丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、谷氨酰转肽酶、总胆汁酸、碱性磷酸酶、超敏c反应蛋白、及其组合。

11、在一些实施方案中，相较于健康对照，aghd患者的血清样本中生化tc的水平、生化tg的水平、ldl-c的水平、非hdl-c的水平、apob的水平、hba1c的水平、homa-ir中位数、tyg中位数在统计学上均显著高于健康对照中的对应水平。

12、根据本公开的第二方面，提供了一组用于诊断igct所致aghd的血清脂质组学标记物的组合，其包含以下或由以下组成：pg、bmp、pe、pi、lpe、cer、pc、gb3、dag、tag、pe-o和pc-o。

13、根据本公开的第三方面，提供了一种用于诊断igct所致aghd的试剂盒，其包含一组定量试剂的组合，所述定量试剂能够分别确定以下各标记物在血清样本中水平：pg、bmp、pe、pi、lpe、cer、pc、gb3、dag、tag、pe-o和pc-o。

14、在试剂盒的一些实施方案中，定量试剂是质谱鉴定试剂。作为一个示例，当采用质谱鉴定试剂时，质谱鉴定试剂作广泛理解，不能仅解释为实体的化学试剂，也包含质谱鉴定参数(例如，对于某脂质而言代表性的m/z比)。当试剂盒制备成适用于质谱鉴定时，还任选包含选自以下的任一项或其组合：色谱柱、流动相、洗脱相、载剂等试剂或组件。

15、根据本公开的第四方面，提供了一种用于诊断igct所致aghd的系统，其包含：

16、1)测定装置，所述测定装置用于确定受试者中以下各标记物在血清样本中水平：pg、bmp、pe、pi、lpe、cer、pc、gb3、dag、tag、pe-o和pc-o；

17、2)确定装置，所述确定装置基于所述标记物在血清样本中水平确定所述受试者的诊断结果。

18、在一些实施方案中，用于诊断igct所致aghd的系统进一步包括提取装置，所述提取装置用于提取所述受试者的血清脂质。

19、在一些具体的实施方案中，以50μl血清中的脂质提取为例，将750μl的氯仿：甲醇(1：2按v/v)加入血清样品，在4℃下以1500rpm孵育30min；加入350μl去离子水和250μl氯仿诱导相分离；然后将样品离心，分离出含有脂质的有机相。

20、在一些实施方案中，用于诊断igct所致aghd的系统还包括液相色谱分析单元和质谱分析单元。

21、在一些实施方案中，液相色谱是在以下条件下进行的：正相(np)-hplc；流动相a为氯仿：甲醇：氢氧化铵＝89.5：10：0.5；流动相b为氯仿：甲醇：氢氧化氨：水＝55：39：0.5：5.5。