一种尼洛替尼胶囊的溶出检测方法与流程

本发明涉及化药分析，尤其是涉及一种尼洛替尼胶囊的溶出检测方法。

背景技术：

1、尼洛替尼（英文名：nilotinib），化学名称为4-甲基-n-[3-(4-甲基-1h-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯基]-3-[[4-(3-吡啶基)-2-嘧啶基]氨基]-苯甲酰胺盐酸盐，结构式如下所示：

2、

3、尼洛替尼胶囊于2007年10月29日获fda批准上市，胶囊剂200mg，商品名tasigna®，用于治疗慢性期和加速期费城染色体阳性慢性粒细胞白血病(cml)的成人患者。2010年06月17日新增胶囊规格：150mg，新增适应症：用于新诊断成人费城染色体阳性慢性髓系白血病(ph+ cml)慢性期的治疗。

4、在原研专利us8293756b2中明确记载了尼洛替尼胶囊的制备方法为：先将尼洛替尼、乳糖（内加）、泊洛沙姆、交联聚维酮进行湿法制粒，然后加入乳糖（外加）、胶态二氧化硅和硬脂酸镁，混匀，然后填充胶囊。

5、尼洛替尼胶囊的溶出度检测方法，参照200780035356.7（cn101516344a的实施例2公开了胶囊的检测方法：篮法，转速为100rpm，1000ml 0.1n盐酸，其检测结果为5min、15min、30min、60min的溶出分别为29.8%、97.2%、98.5%、99.1%。

6、现有专利提供的溶出检测方法虽然符合产品质量的检测要求，但是在制剂研发过程中，在对制剂筛选和处方工艺筛选时，溶出检测方法要求20~30min左右溶出达到85%，才能够区分不同原辅料的检测要求。

7、众所周知，影响溶出的主要因素是溶出介质的选择，发明人针对尼洛替尼胶囊的常规溶出介质进行筛选，发现：在不同介质中，尼洛替尼胶囊的溶出出现两个极端，比如ph值为1.0常规介质时15min达85%的快速释放，或ph4.5和ph6.8介质中几乎无尼洛替尼溶出，此两种介质数据非样品内在品质呈现于外的最佳体现，既无法区分自研制剂与上市制剂的内在质量。

8、因此，需要提供一种新的尼洛替尼胶囊的检测方法，控制制剂在20~30min左右溶出达到85%，且溶出偏差小、重现性好。

9、有报道提出为了在溶出检测时增加区分力，可以在溶出介质中加入表面活性剂。

10、发明人尝试在尼洛替尼胶囊的溶出检测过程中，添加表面活性剂来增加尼洛替尼胶囊的区分力，结果发现：

11、添加常用阴离子表面活性剂十二烷基硫酸钠(sds)后，其溶出rsd值偏差大，推测其原因为尼洛替尼与sds发生作用，生成黏胶状物质；

12、添加常用阳离子表面活性剂十六烷基三甲基溴化铵（简称为ctab）后，其溶出偏差仍然很大，推测其原因为ctab与尼洛替尼胶囊壳中的某成分发生了反应，形成了不溶物，造成胶囊崩解差异很大，影响了内容物的溶出。

13、因此，需要寻求一种既可以允许添加至溶出检测中，又可以降低rsd（偏差）的稳定性的表面活性剂。

技术实现思路

1、有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供一种能增加尼洛替尼胶囊区分力的溶出度检测方法。

2、为了增加尼洛替尼胶囊的区分力，并提高rsd值的稳定性，本发明提供了一种尼洛替尼胶囊的溶出检测方法。

3、本发明提供了一种尼洛替尼胶囊的溶出检测方法，包括：

4、a）供试品溶液的制备：取尼洛替尼胶囊，溶出介质超声溶解，过滤，即得；所述溶出介质为含有吐温20的盐酸溶液；

5、b）将供试品溶液采用高效液相色谱法检测，按照外标法以峰面积计算尼洛替尼的溶出度。

6、本发明提供的尼洛替尼胶囊的溶出检测方法首先制备供试品溶液。

7、供试品溶液的制备方法包括：取尼洛替尼胶囊，置于溶出杯中，加入溶出介质，进行溶出操作，于5min、10min、15min、20min、30min、45min、60min取样，取样体积10ml，过滤，即得。

8、在本发明一个具体实施方式中，取尼洛替尼胶囊，置于溶出杯中，加含吐温20的盐酸溶液，转速为75rpm，于5min、10min、15min、20min、30min、45min、60min取样，取样体积10ml，过滤，取滤液作为供试品溶液。

9、按照本发明，所述溶出介质为含有吐温20的盐酸溶液；含吐温20的盐酸溶液中，吐温20的浓度为0.01~0.05%，优选为0.01%。

10、一些实施例中，所述含有吐温20的盐酸溶液的ph值为1.95~2.05。

11、一些实施例中，所述含有吐温20的盐酸溶液的ph值为2.0。

12、本发明人创造性的发现，

13、ph1.5和ph2.2介质中，同批次尼洛替尼胶囊不同次数检测，溶出数据不具有相似性。

14、ph2.0介质中，同批次尼洛替尼胶囊不同次数检测，溶出数据基本一致。

15、采用常规溶出介质，ph1.0的盐酸溶液，10min溶出即超过90%，溶出速度过快；ph4.5、ph6.8和水介质几乎无体外释放；ph2.0介质中尼洛替尼胶囊在20min~30min溶出释放达到85%。

16、因此，最终选择ph2.0作为溶出介质进行尼洛替尼胶囊的质量筛选。

17、按照本发明，所述含有吐温20的盐酸溶液中吐温20的质量浓度为0.01~0.05%。

18、吐温20、十二烷基硫酸钠、ctab均为溶出介质中可添加的常用表面活性剂，但本发明人在进行尼洛替尼的溶出检测时发现：1）尼洛替尼胶囊的内容物不能与十二烷基硫酸钠接触，二者接触后会形成胶状物，影响样品溶出；2）尼洛替尼胶囊的胶囊壳与ctab接触后，二者发生反应生成不溶物，造成胶囊壳崩解差异大，影响内容物溶出。

19、最终选择，含吐温20的ph值为2.0的盐酸溶液作为溶出介质，吐温20的浓度为0.01~0.05%，能区分不同质量的尼洛替尼胶囊，且rsd较小。

20、一些优选实施例中，所述含有吐温20的盐酸溶液中吐温20的质量浓度为0.01%。

21、在添加上述浓度范围内，稳定性好。

22、本发明还包括对照品溶液的制备：取尼洛替尼对照品，采用乙醇溶解，再用50%乙醇（v:v）定容，即得；

23、所述尼洛替尼对照品溶液中尼洛替尼的浓度为0.2mg/ml。

24、一些实施例中，取尼洛替尼对照品，精密称定，置100ml量瓶中，加乙醇40ml超声10min溶解，用50%乙醇（v:v）定容，摇匀，即得。

25、本发明所述尼洛替尼胶囊的规格为150mg和200mg。

26、本发明溶出方法为桨法；转速为75rpm。

27、本发明人发现，供试品制备过程中采用桨法（75rpm）所制得的样品偏差小，重现性好；供试品制备过程中采用桨法（50rpm）和篮法（100rpm）所制得的样品偏差较大。因此，本发明采用桨法（75rpm）进行制备。

28、本发明还包括检测方法，具体为高效液相色谱法，按照外标法以峰面积计算尼洛替尼的溶出度。

29、所述高效液相色谱法检测时的色谱条件为：

30、色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂或等效柱；优选为ymc-pack pro c18（4.6×75mm，3μm），流动相：磷酸盐缓冲液（1.36g/l磷酸二氢钾溶液，用磷酸调ph至3.2）-乙腈（60：40），波长：250nm，柱温：40℃，流速：0.8ml/min，洗脱方式：等度洗脱；

31、量取对照品溶液和供试品溶液各5μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按照外标法以峰面积计算尼洛替尼的溶出度。

32、本发明提供了一种尼洛替尼胶囊的溶出检测方法，包括：

33、a）供试品溶液的制备：取尼洛替尼胶囊，加入溶出介质，进行溶出操作，于5min、10min、15min、20min、30min、45min、60min取样，取样体积10ml，过滤，即得；所述溶出介质为含有吐温20的盐酸溶液；

34、b）对照品溶液的制备：取尼洛替尼对照品，采用乙醇溶解，再用50%乙醇（v:v）定容；

35、c）将供试品溶液或对照品溶液采用高效液相色谱法检测，按照外标法以峰面积计算尼洛替尼的溶出度。

36、本发明提供的溶出检测方法能区分不同质量的尼洛替尼胶囊，且溶出rsd较小。本发明提供的溶出检测方法，具有区分力强、重现性好。