一种农产品中拟除虫菊酯农药残留的检测方法与流程

本发明涉及一种农产品中拟除虫菊酯农药残留的检测方法，属于农药残留量检测方法

背景技术：

1、拟除虫菊酯类杀虫剂(pyrethroid insecticides，py)是一类具有广谱性、稳定性、高效率和相对较低哺乳动物毒性的杀虫剂。自从高毒有机磷农药被禁止使用后，拟除虫菊酯类杀虫剂有了更广泛的使用空间，近年来逐渐被应用于农业、林业、园艺等领域中的害虫防治。但是，拟除虫菊酯类杀虫剂在我国的广泛使用，也导致了部分农产品含有农药残留。研究表明，拟除虫菊酯对蜜蜂、家蚕等对农业有益的环境生物毒害性较大；另外，该类农药的残留期较长，进入机体后对机体的免疫力和心血管有明显的毒害作用。目前，拟除虫菊酯类杀虫剂已经被列为农产品和中药材农药残留的重点检测对象，许多国家或地区对农产品中拟除虫菊酯类农药的最高限量作了严格的规定。因此，为满足食品药品安全检测方面的要求，迫切需要建立一种灵敏度高、定量限低、可同时检测多种拟除虫菊酯残留量的检测方法。

2、针对不同的农产品样品，对样品采用溶剂萃取或固相萃取法净化是检测拟除虫菊酯类农药的重要环节。近年来，越来越多的材料被用作样品前处理吸附剂，磁性固相萃取作为固相萃取的一种新模式已得到广泛使用，其不仅可以克服常规固相萃取技术的缺点，而且不需要填充色谱柱，同时还避免了加载大量样品的耗时过程。随着纳米技术的飞速发展，各种基于磁性物质的纳米材料，例如石墨烯、碳纳米管、二氧化硅微球、聚合物、金属有机骨架和共价有机骨架已用于开发固相萃取的吸附剂。但是，现有的磁性固相萃取剂存在对于拟除虫菊酯类农药的回收率和富集度较低的问题。

3、目前，对于农药残留的检测方法也很多，主要有：气相色谱法、液相色谱法、色谱-质谱法等。其中，气相色谱-三重四极杆质谱法(gc-ms/ms)由于具有很高的灵敏度，适用于农产品中拟除虫菊酯类农药残留的准确定量。然而在食品样品的分析检测过程中，由于食品样品基质复杂，且待测物含量较低，现有的检测方法在进行拟除虫菊酯类农药的检测时，往往存在整体检测过程复杂、检测灵敏度较低、效率较低的问题。

技术实现思路

1、本发明的目的是提供一种农产品中拟除虫菊酯农药残留的检测方法，为现有技术农产品中拟除虫菊酯农药残留的检测中，提供一种具有较高灵敏度和检测效率的检测方法。

2、为了实现上述目的，本发明中一种农产品中拟除虫菊酯农药残留的检测方法所采用的技术方案是：

3、一种农产品中拟除虫菊酯农药残留的检测方法，包括以下步骤：在待测样品的提取液中加入固相萃取材料进行萃取，分离出固相物，使用洗脱溶剂对固相物进行洗脱，得到待测溶液进行gc-ms/ms分析；所述固相萃取材料包括1,3,5-三甲酰基间苯三酚与联苯胺经schiff碱缩合反应形成的共价有机骨架；所述gc-ms/ms分析的色谱柱为db-5ms。

4、上述方案的有益效果在于：本发明的农产品中拟除虫菊酯农药残留的检测方法为开拓性发明。本发明的农产品中拟除虫菊酯农药残留的检测方法采用入固相萃取材料对待测样品的预处理液进行萃取，并配合gc-ms/ms技术，能够实现农产品中拟除虫菊酯农药残留的灵敏度高、检测限低的检测。

5、进一步地，本发明利用1,3,5-三甲酰基间苯三酚与联苯胺经schiff碱缩合反应形成的共价有机骨架，使用共价有机骨架作为固相萃取的吸附材料可以有效排除农产品基质中蛋白质等大分子的吸附，而且材料上的苯环结构和拟除虫菊酯类化合物的苯环之间具有强π-π作用，两者共同作用实现了农产品(食品)这种复杂基质中痕量拟除虫菊酯类农残的选择性高效富集，能够进一步提高检测方法的检测灵敏度和最低检测限。

6、具体地，待测样品提取的过程如下：

7、(1)烟草样品处理：先将烟草样品粉碎，准确称取100mg于50ml离心管中，加入2ml甲醇，超声处理30min，将目标分析物从烟草烟叶组织中提取到甲醇溶液中，超纯水定容至20ml；

8、(2)果蔬样品处理：将果蔬切碎并在均化器中均化。称取50.0g均质化的样品分别置于50ml离心管中。在离心机中以3000rpm离心5min，固液分离后将上清液转移到烧杯中。然后，再按50mg固相残留物与5ml超纯水混合。经离心后，将所有上清液合并在一起，并用0.45μm水膜过滤，再将所有过滤后的上清液转移至100ml容量瓶中定容备用。

9、作为进一步地改进，所述schiff碱缩合反应时，1,3,5-三甲酰基间苯三酚与联苯胺的质量比为(63-64)：(82-83)。

10、具体地，共价有机骨架(cofs)材料是由有机构筑单元通过共价键连接形成的多孔有机晶体聚合物，与传统的固相萃取吸附剂相比，cofs的结构可控性和功能修饰性较强，具有高度有序的刚性多孔结构，质量轻、密度低、结晶度好、比表面积大，具有较强的稳定性和化学稳定性。

11、作为进一步地改进，所述固相萃取材料的制备方法包括以下步骤：1,3,5-三甲酰基间苯三酚、联苯胺和磁性纳米粒子在溶剂中进行schiff碱缩合反应，即得。

12、上述方案的有益效果在于：本发明的固相萃取材料由1,3,5-三甲酰基间苯三酚和联苯胺经schiff碱缩合反应形成共价有机骨架材料，而且在schiff碱缩合反应过程中，加入磁性纳米粒子对共价有机骨架材料进行修饰，获得磁性共价有机骨架材料。本发明的制备方法简单可行，短时间内即可制备该材料，且原材料易得，适合工业化的大规模生产。

13、优选地，所述溶剂为低共熔溶剂；进一步优选地，所述低共熔溶剂由氯化胆碱和尿素组成，氯化胆碱和尿素的摩尔比为1:(2-2.5)。

14、作为进一步地改进，所述磁性纳米粒子为氨基功能化的fe3o4纳米粒子。

15、上述方案的有益效果在于：在共价有机骨架上修饰氨基功能化的fe3o4纳米粒子，能在对拟除虫菊酯类化合物进行选择性富集后，通过外界磁场即可实现相分离，操作简单、快速，大大简化了拟除虫菊酯类农残的检测流程，节省大量时间并降低成本。

16、具体地，所述磁性纳米粒子可以按照现有技术进行制备。优选地，所述磁性纳米粒子由包括以下步骤的方法制得：fecl3·6h2o、1,6-己二胺和无水乙酸钠在溶剂中进行水热反应。进一步优选地，所述水热反应为在190-210℃下反应6-7h。

17、作为进一步地改进，所述1,3,5-三甲酰基间苯三酚、联苯胺和磁性纳米粒子的质量比为(63-64)：(82-83)：(95-96)。

18、作为进一步地改进，所述schiff碱缩合反应为在常温常压下反应2-4h。

19、上述方案的有益效果在于：用上述优选参数制备的磁性cofs材料，产品质量稳定性好，对农产品中的拟除虫菊酯类农残具有极佳的选择性高效富集作用，可方便用于农产品中拟除虫菊酯类农残的分析检测过程中。

20、具体地，所述常温常压为20-30℃，一个大气压。

21、作为进一步地改进，20ml所述待测样品的提取液对应加入(5-30)mg固相萃取材料。

22、作为进一步地改进，所述萃取的时间为5-30min。

23、作为进一步地改进，所述gc-ms/ms分析的质谱条件为：电子轰击源：70ev；离子源温度：280℃；传输线温度：280℃；溶剂延迟：3min：扫描模式：正离子扫描；检测模式：多反应监测。

24、上述方案的有益效果在于：本发明的检测方法在分析中所设置的仪器参数，有利于将个目标分析物分开，提高检测的灵敏度。

25、作为进一步地改进，所述拟除虫菊酯农药为七氟菊酯、生物苄呋菊酯、联苯菊酯、甲氰菊酯、λ-氯氟氰菊酯、反式氯菊酯、顺式氯菊酯、氯氟氰菊酯、氯氰菊酯、高效氯氰菊酯、氟氰戊菊酯、醚菊酯、氟胺氰菊酯、氰戊菊酯、s-氰戊菊酯、溴氰菊酯中的至少一种。

26、上述方案的有益效果在于：本发明的检测方法能同时测定农产品中16种具有代表性的拟除虫菊酯农药，扩大了拟除虫菊酯类农药的检测范围。

27、作为进一步地改进，所述洗脱剂为二氯甲烷。

28、优选地，所述洗脱剂的量为2-5ml，洗脱的时间为5-30min。