一种热炎宁制剂的质量控制方法与流程

本发明涉及中药检测，尤其是涉及一种热炎宁制剂的质量控制方法。

背景技术：

1、热炎宁是临床上治疗上呼吸道感染的一线药物，由蒲公英、虎杖、北败酱、半枝莲组成，具有清热解毒、活血祛瘀、消痈散结、消肿止痛等功效。

2、单咖啡酰酒石酸是酚酸类化合物，又称为咖啡酰酒石酸、咖啡酰基酒石酸，结构式如下：

3、

4、高晓霞的研究“热炎宁质量控制方法与指标成分大黄素药代动力学研究”中，采用高效液相色谱法分别建立了中药材蒲公英中绿原酸和咖啡酸、虎杖中大黄素、败酱中齐墩果酸和半枝莲中野黄芩苷的含量测定方法。采用正交试验法对热炎宁提取工艺进行了优化。以浸膏得率、绿原酸、咖啡酸、大黄素、齐墩果酸和野黄芩苷含量为指标，对提取溶剂乙醇的浓度、提取溶剂量、提取次数三个因素进行优化，通过直观分析、方差分析和综合评价方法，确定最佳提取工艺为：加10倍70％乙醇，水浴回流2次，每次1h，为热炎宁的质量稳定奠定基础。

5、刘恺等人的研究“高效液相色谱法测定热炎宁颗粒中野黄芩苷的含量”中，其建立了高效液相色谱法(hplc)测定热炎宁颗粒中野黄芩苷含量的测定方法。方法色谱柱：ultimate xb-c18柱(4.6×250mm，5μm)；以乙腈-0.02mol/l磷酸二氢钾溶液(用三乙胺调节ph值至5.0)(14∶86)为流动相；检测波长：335nm；柱温：30℃；流速:1.0ml/min；进样量：20μl。结果野黄芩苷在7.57-30.28mg/l的浓度范围内线性良好,平均加样回收率为100.11％，相对标准偏差为0.3％。

6、现有技术中热炎宁制剂的质量控制方法，操作复杂，干扰大，重复性和稳定性不佳，因此，需要研究一种操作简单、干扰小、重复性、稳定性和精密度高的热炎宁制剂的质量控制方法。

技术实现思路

1、本发明的目的是提供热炎宁制剂的质量控制方法，针对热炎宁这一药物，选择单咖啡酰酒石酸进行含量测定，以实现质量控制，具有线性相关度高、重复性和稳定性好、精密度高等优点。

2、为实现上述发明目的，本发明技术方案如下：

3、一种热炎宁制剂的质量控制方法，包括以下步骤：通过液相色谱法测定热炎宁制剂中单咖啡酰酒石酸的含量，来对热炎宁制剂进行质量控制。

4、优选地，所述单咖啡酰酒石酸的含量最低限度为0.40mg/ml。

5、优选地，所述测定热炎宁制剂中单咖啡酰酒石酸的含量包括以下步骤：

6、(1)制备对照品溶液：将单咖啡酰酒石酸稀释，得对照品溶液；

7、(2)制备供试品溶液：热炎宁制剂先用溶剂1稀释5-15倍，再用溶剂2稀释5-15倍，得供试品溶液；所述溶剂1为水，所述溶剂2为体积分数50-90％的甲醇水溶液；

8、(3)将所述对照品溶液和所述供试品溶液注入高效液相色谱仪中进行单咖啡酰酒石酸的含量测定。

9、优选地，步骤(1)中，所述单咖啡酰酒石酸用甲醇溶液稀释，对照品溶液的浓度为5-15μg/ml，例如5μg/ml、6μg/ml、7μg/ml、8μg/ml、9μg/ml、10μg/ml、11μg/ml、12μg/ml、13μg/ml、14μg/ml或15μg/ml。

10、进一步优选地，步骤(1)中，所述单咖啡酰酒石酸用40-60％甲醇溶液稀释，对照品溶液的浓度为8-12μg/ml，例如8μg/ml、9μg/ml、10μg/ml、11μg/ml或12μg/ml。

11、更进一步优选地，步骤(1)中，所述单咖啡酰酒石酸用50％甲醇溶液稀释，对照品溶液的浓度为10μg/ml。

12、优选地，步骤(2)中，所述溶剂2为体积分数75-90％甲醇水溶液。

13、优选地，步骤(2)中，所述溶剂2为体积分数75-85％甲醇水溶液。

14、优选地，步骤(2)中，所述溶剂2为体积分数70-80％甲醇水溶液。

15、进一步优选地，步骤(2)中，所述溶剂为体积分数80％甲醇水溶液。

16、优选地，步骤(2)中，溶剂1稀释10倍，再用溶剂2稀释10倍。

17、优选地，所述制备供试品溶液的步骤如下：

18、精密量取热炎宁制剂5ml，加水稀释至50ml，摇匀，精密量取5ml，加80％甲醇稀释至50ml，摇匀，0.45μm滤过，取滤液，得供试品溶液。

19、优选地，步骤(3)中，色谱条件如下：

20、色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；

21、柱温：30-40℃；

22、流速：0.6-1.0ml/min；

23、洗脱程序：以乙腈为流动相a，以0.15-0.25％磷酸为流动相b，梯度洗脱程序如表1所示：

24、表1.

25、 时间 流动相a 流动相b 0min 6-10％ 90-94％ 30min 9-13％ 87-91％ 35min 88-92％ 8-12％ 40min 6-10％ 90-94％ 45min 6-10％ 90-94％

26、检测波长：310-350nm；

27、进样量：4-6μl。

28、进一步优选地，步骤(3)中，所述色谱柱为agilent 5tc-c18、agilent zorbax sb-c18、hypersil gold、welch ultimate xb-c18中的任意一种。

29、进一步优选地，步骤(3)中，所述柱温为34-36℃。

30、进一步优选地，步骤(3)中，所述流速为0.7-0.9ml/min。

31、进一步优选地，步骤(3)中，所述流动相b为0.2％磷酸。

32、进一步优选地，步骤(3)中，所述梯度洗脱的程序如表2所示：

33、表2.

34、

35、

36、作为本发明的一个具体实施例，色谱条件如下：

37、色谱柱：agilent 5tc-c18；

38、柱温：35℃；

39、流速：0.8ml/min；

40、洗脱程序：以乙腈为流动相a，以0.2％磷酸为流动相b，梯度洗脱程序如表3所示：

41、表3.

42、 时间 流动相a 流动相b 0min 8％ 92％ 30min 11％ 89％ 35min 90％ 10％ 40min 8％ 92％ 45min 8％ 92％

43、检测波长：330nm；

44、进样量：5μl。

45、本发明的有益效果为：

46、本发明提供了热炎宁制剂的质量控制方法，选择以单咖啡酰酒石酸作为唯一活性成分进行检测，不但简化工艺、降低成本，同时，具有干扰小、耐用性好、线性相关度高、重复性和稳定性好、精密度高的优点。