的样品液，实现一次进样、成功分离并实现两种检测器的联合指纹图谱输出。
[0021]综上所述，本发明提供了一种系统完整的、针对烟用香精香料的指纹图谱构建方法，从科学的样品前处理方法、获得配套研宄总结出适宜的液相色谱分离装置和精确的工艺，获得较好的适用于所述两种检测器联用的分离效果，结合二极管阵列检测器(DAD)和折光指数检测器(RID)合适联用方式，方便快捷地获得烟用香精香料的指纹图谱信息，可凸显烟用香精香料样品的指纹特征，能有效应用于含不具有紫外吸收基团化合物的烟用香精香料样品的指纹图谱构建，具有重要的实际应用价值。
【附图说明】
[0022]图1实施例1指纹图谱。
[0023]图2实施例1指纹图谱局部放大图。
【具体实施方式】
[0024]下面结合附图和具体实施例进一步说明本发明。除非特别说明，本发明实施例采用的设备、试剂和方法为本领域常规使用的设备、试剂和方法。
[0025]实施例1
本实施例采用Agilent 1200液相色谱仪，配DAD和RID ;浓硫酸(分析纯)、超纯水；0.45 μπι尼龙滤膜。用于检测分析的烟用香精香料样品由广东中烟工业有限责任公司提供，样品仅用于说明本发明方法，并不因此限定本发明方法适用的样品范围。
[0026]配制6 mM H2SO4溶液(配制方法参照本领域常规)。
[0027]检测分析步骤如下:
51.样品前处理:取0.1 mL烟用香精香料样品置于10 mL容量瓶中，用6 mM H2SO4S容并混匀，经0.45 μπι尼龙滤膜过滤后以备后续步骤进行液相色谱分析；
52.装置构建；将两种检测器安装于液相色谱仪器中，其中二极管阵列检测器在前，折光指数检测器在后；流动相液体先经过二极管阵列检测器，再经过折光指数检测器，最后作为废液排出检测器；
S3.进样分析；
本实施例进样量取10 μ L。
[0028]实验过程中，本实施例同时重点研宄了改变DAD检测波长对检测结果的影响，改变波长后，在DAD色谱图中的色谱峰的峰高会有所降低，即检测灵敏度会有所降低。灵敏度的提高，有利于获得更多的图谱信息。实验发现在本发明其他检测条件一定的情况下，提供的波长在200?360 nm波长范围内，适合分析多种化合物，可充分获得烟用香精香料的指纹图谱信息。本实施例同时重点研宄了改变RID光学元件温度进行实验。实验发现，RID光学元件温度设置于在30?45°C范围内，对RID色谱图的影响不明显，与原图基本一致。
[0029]综合考虑实验对象的针对性、实验结果的准确性、灵敏度等因素，最后确定的最优的液相色谱的分析参数条件为:
色谱柱:METACARB H PLUS 300X7.8 mm ；
保护柱:METACARB H PLUS保护柱；
柱温箱温度:60°C ;
流动相:6 mM H2SO4;
流速:0.4 mL/min ；
停泵时间:120 min ；
DAD检测波长:210 nM ；
RID光学元件温度:35°C。
[0030]在上述分析条件下，获得指纹图谱请见附图1所示，其中上图是DAD色谱图，下图是RID色谱图。附图2是局部放大的指纹图谱。有附图可见，本发明总结出科学合理的前处理方实现烟用香精香料的液相色谱指纹图谱的构建。由指纹图谱可见，该样品成分比较简单，基本不含糖或糖醇类物质，分析结果与其他常规方法检测结果一致。基于本实施例所获得的烟用香精样品化学组成特征的组分群体分析图谱结合常规的计算分析技术对即可对样品进行专属、宏观、整体的化学特征综合信息分析计算研宄。
【主权项】
1.一种烟用香精香料的液相色谱指纹图谱的构建方法，其特征在于，是利用液相色谱的二极管阵列检测器和折光指数检测器进行液相色谱指纹图谱的分析构建，所述液相色谱的参数条件为: 色谱柱:METACARB H PLUS 300X7.8 mm ； 保护柱:METACARB H PLUS保护柱； 柱温箱温度:60°C ; 流动相:6 mM H2SO4;流速:0.4 mL/min ； 停泵时间:120 min ； 二极管阵列检测器检测波长:200?360 nm ； 折光指数检测器光学元件温度:30?45°C。
2.根据权利要求1所述烟用香精香料的液相色谱指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述二极管阵列检测器检测波长为210 nM。
3.根据权利要求1所述烟用香精香料的液相色谱指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述折光指数检测器光学元件温度:35°C。
4.根据权利要求1、2或3所述烟用香精香料的液相色谱指纹图谱的构建方法，其特征在于，包括以下步骤: 51.样品前处理； 52.装置构建；将两种检测器安装于液相色谱仪器中，其中二极管阵列检测器在前，折光指数检测器在后；流动相液体先经过二极管阵列检测器，再经过折光指数检测器，最后作为废液排出检测器； 53.进样分析； 其中，SI所述的样品前处理具体是取0.1 mL样品置于10 mL容量瓶中，用6 mM H2SO4定容并混匀后过滤。
5.根据权利要求4所述烟用香精香料的液相色谱指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述过滤是经0.45 mm尼龙滤膜过滤。
6.根据权利要求4所述烟用香精香料的液相色谱指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述进样的量为10 mL。
7.权利要求1、2或3所述构建方法的应用，其特征在于，应用于建立烟用香精香料样品的指纹图谱。
8.权利要求7所述构建方法的应用，其特征在于，应用于含糖和/或糖醇的烟用香精香料样品的指纹图谱构建。
9.权利要求4所述构建方法的应用，其特征在于，应用于建立烟用香精香料样品的指纹图谱。
10.权利要求9所述构建方法的应用，其特征在于，应用于含糖和/或糖醇的烟用香精香料样品的指纹图谱构建。
【专利摘要】本发明公开了一种烟用香精香料的液相色谱指纹图谱的构建方法。是利用液相色谱的二极管阵列检测器和折光指数检测器进行液相色谱指纹图谱的分析构建，所述液相色谱的参数条件为：色谱柱：METACARB？H？PLUS？300×7.8？mm；保护柱：METACARB？H？PLUS保护柱；柱温箱温度：60℃；流动相：6？mM？H2SO4；流速：0.4？mL/min；停泵时间：120？min。本发明基于对烟用香精香料物质特性的长期研究，科学利用液相色谱的二极管阵列检测器和折光指数检测器进行联用，针对性总结精确的分析条件，实现烟用香精香料的液相色谱指纹图谱的构建，全面反映烟用香精香料样品的指纹特征，能有效应用于含糖、糖醇等烟用香精香料样品的指纹图谱构建，有较大的实际应用价值。
【IPC分类】G01N30-88
【公开号】CN104569244
【申请号】CN201410268930
【发明人】黄翼飞
【申请人】广东中烟工业有限责任公司
【公开日】2015年4月29日
【申请日】2014年6月17日