一套中压制备型电色谱分离装置的制造方法
【技术领域】
[0001]本发明属于生物及化学领域，涉及一套中压制备型电色谱分离装置。
【背景技术】
[0002]在新药研发领域，越来越多的活性小分子极性物质被发现，例如，活性小肽、寡糖、小分子核苷酸、有机酸，然而，这些物质的制备分离存在技术难点。这些物质都具有极性基团，不能在反相色谱柱上有效保留，因而不能被常规反相液相色谱分离纯化(StregeMA.Hydrophilic interact1n chromatography-electrospray mass spectrometryanalysis of polar compounds for natural product drug discovery [J]) 0 通常米用的离子交换色谱可以满足离子型化合物的分离，但不能同时分离非极性化合物，高盐洗脱液还增加除盐负担(Jones ILj Carta G.1on exchange of amino acids and dipeptides oncat1n resins with varying degree of crosslinking.1.Equilibrium[J].1nd Eng ChemRes 1993，32:107-117)。高效毛细管电色谱技术兼备高效、稳定、自动化等优点，分离效率高，选择性强，可同时分离离子型、极性和非极性物质。但毛细管电色谱只能分析纳升级微量样品，甚至不能满足微克级样品的制备需求(Yan C.Dadoo R, Zhao H, et al.Capillaryelectrochromatography analysis of polycyclic aromatic-hydrocarbons[J].AnalChem 1995,67:2026-2029)。
[0003]目前的毛细管电色谱仪主要由微流液相泵、高压电源、电极、进样器、填充毛细管、柱上检测器组成。一般采用微流液相泵驱动液体，泵驱动和电渗作用共同驱动流动相流过毛细管色谱柱；入口电极接地，以保护进样器等装置；出口电极可以接高压电源正极或负极，并且可以将出口电极和毛细管出口同时插入电色谱流出液收集瓶，实现通电。(颜流水，姚珈，王义明，罗国安等.智能化多功能毛细管电色谱仪的研制[J].现代科学仪器2001，6:39-43)。
[0004]要满足制备或半制备样品，色谱柱尺寸必须远大于毛细管柱；色谱柱的放大导致流量发生巨大变化，液流泵、高压电源、电极的添加方式、增加在线检测与收集装置等都具有新的特点和技术指标。
[0005]经检索，现有技术中，多用加压电色谱装置(CN99206093.1)、多通道加压毛细管电色谱生物样品分析仪(CN01219840.4)、一种多用加压毛细管电色谱装置(CN200610024107.5)、一种新型加压毛细管电色谱装置(CN200720071407.9)等都是关于高效加压毛细管电色谱装置的设计，经过设计微流控制器等不断改进的方法，仪器更适合准确、高效、稳定、微量的分析，甚至不能进行样品的微量制备。另外，制备型电层析分离化学物质和生物物质的仪器(CN200410084557.4)，可以实现收集电色谱分离的样品，属于低压制备型电色谱系统。由于系统压力小，电解产生的气泡只能依靠敞口电极室的设计来排除；而敞口设计造成分离系统不密闭，实际不能耐受较高压力。
【发明内容】
[0006]针对现有技术中的缺陷，本发明的目的是提供一套可以实现在线检测与收集样品的中压制备型电色谱装置，具体为一套中压制备型电色谱分离装置。本发明包括一套具有高压电源、缓冲液系统、梯度混合器、中压液相泵、进样器、安全电路、入口电极、电色谱柱、出口电极、在线检测器、增压器、在线收集器等部件的中压制备型电色谱装置。其中利用中压液相泵作为主要驱动力驱动流动相流过色谱柱，确保可以稳定地控制流动相的流速，增加稳定性；入口电极接高压电源的正极或负极，并在入口电极前方，设计加入可以防止装置漏电的安全电路，安全电路接地；出口电极接高压电源的零极，因此，可以直接连接在线检测与收集器；在在线检测器后方增加增压器，减小电解气泡体积，增加系统稳定性。
[0007]本发明是通过以下技术方案实现的:
[0008]本发明提供一套中压制备型电色谱分离装置；所述中压制备型电色谱分离装置包括沿电色谱液流流路依次连接的缓冲液系统、中压液相泵、进样器、电色谱柱、在线检测器、增压器、在线收集器；缓冲液系统通过梯度混合器与中压液相泵相连；进样器与电色谱柱之间连接有安全电路；入口电极和出口电极分别连接在电色谱柱的入口端和出口端，高压电源通过入口电极和出口电极与电色谱柱并联。
[0009]优选地，所述缓冲液系统为具有一定缓冲能力的溶液，包括酸、碱、盐、水溶性有机溶剂等成分。
[0010]优选地，所述中压液相泵包括一元泵、二元泵或四元泵；所述中压液相泵的液体驱动力为0.5?1MPa,流速为0.1?10mL/min。
[0011]优选地，所述进样器包括液相色谱用六通阀进样器；通过0.1?5毫升的进样环定量进样或采用5?100毫升非进样环的泵吸入方式进样。
[0012]优选地，所述电色谱柱为填充色谱固定相的色谱柱；所述固定相包括反相C18、硅胶、聚苯乙烯树脂、离子交换树脂、体积排阻树脂等；所述电色谱柱柱管材质为绝缘材质，如聚醚醚酮材质、耐压玻璃材质等类似绝缘耐压材质；所述电色谱柱内径为0.1?4厘米、高度为I?100厘米；所述电色谱柱具有冷却夹套。
[0013]优选地，所述在线检测器包括紫外检测器、示差检测器、pH值检测器、溶液电导检测器；所述在线检测器可以实现自动在线收集，也可以进行人工手动收集。
[0014]优选地，所述增压器为内径10?500微米的管线；所述增压器的增压范围为
0.5?1MPa ;所增加的压力的大小由管线的长度决定；所述增压器通过管线接头连接在在线检测器之后。
[0015]优选地，所述高压电源的直流电压为0.1?20千伏，电流为O?50mA，功率为O?500瓦；所述高压电源包括两种输出模式，即正极与零极输出模式、负极与零极输出模式。
[0016]优选地，所述入口电极和出口电极为惰性电极；进一步地，所述入口电极和出口电极的材质为铂金属；所述入口电极连接高压电源正极或负极，所述出口电极连接高压电源零极。
[0017]优选地，所述安全电路通过三通与电色谱液流流路连接。
[0018]与现有技术相比，本发明具有如下的有益效果:
[0019](I)本发明可以实现极性样品，包括小分子和大分子样品的电色谱分离与制备；
[0020](2)电色谱技术是电泳技术与色谱技术的耦合，带电分子在电色谱柱中可以受到电泳迀移和色谱分配两种机制的作用，分离效率更高，可以同时分离离子型、极性和非极性的组分；
[0021](3)中压液相泵的加入，增强了