一种钙定性测试条及其制作方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种钙定性测试条及其制作方法。
【背景技术】
[0002]钙是人体的重要营养元素。钙摄入不足容易引起骨质疏松、骨质增生等疾病，摄入过多则会影响其他微量元素的吸收，同时增加患肾结石的风险。
[0003]目前在临床上常用的钙检测方法有分光光度法、络合滴定法、原子吸收法等，这些方法都需要专门的仪器设备和专业人员操作。
[0004]欧洲发明专利EP2538224公开了一种用于分光光度法的钙定量测试条，它由含有化学试剂的试纸块和塑料基片组成。试剂块中的主要成分为碱性缓冲、显色剂邻-甲酚酞络合酮(OCPC)，使用时通过分光光度计测试570nm下的反射光强度计算出钙离子浓度。发明专利98109147和02145466.3公开的钙定量测试条中，使用了 OCPC和偶氮砷iii (Arsenazoiii),这两类指示剂在测试钙离子过程中的颜色变化都是渐变式的，在医学决定水平的钙离子变化不显著，使用仪器可定量分析钙含量变化，但肉眼难以区分钙含量的变化。
【发明内容】
[0005]本发明要解决的技术问题是克服现有技术的缺陷，提供一种操作简便，成本低廉，不需要专业仪器和专业人士，可用于现场检测的人体液中钙离子含量水平的测试条。
[0006]本发明的另一个目的是提供上述试剂条的制备方法。
[0007]为了解决上述技术问题，本发明提供了如下的技术方案:
[0008]本发明一种钙定性测试条，包括上卡壳和下卡壳，所述上卡壳上设置有观察孔和加样孔，所述上、下卡壳之间设置有塑料基片，所述塑料基片上粘贴有试纸块，所述试剂块包括缓冲剂试纸块(其内含缓冲剂干式试剂)、络合剂试纸块(其内含络合剂干式试剂)和显色剂试纸块(其内含显色剂干式试剂);所述塑料基片上还粘贴有观察试纸条。上、下卡壳的作用是限制溶液快速流动。用户在加样孔中滴加定量的体液(尿液或血液)，I分钟后可在观察孔处观察试纸条的颜色，试纸条显蓝色则表示钙过量，显红色则表示钙不足。所述塑料基片上还粘贴有吸水纸。所述吸水纸主要是吸收混合溶液，促进显色溶液的流动和呈色均勻性，可选用0.5mm-1.0mm厚的棉质吸水纸。
[0009]进一步地,所述观察试纸条为厚度0.1mm的滤纸,所述观察试纸条经过非离子表面活性剂溶液的浸泡。
[0010]进一步地，所述上卡壳上还设置有塑料突起。所述塑料突起可有效减慢溶液的扩散，使体液和缓冲剂、络合剂等干式试剂充分反应后接触显色剂试纸块。
[0011]所述塑料基片主要用于支撑试纸块。所述塑料基片的材料可选用聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)、聚乙烯(PE)、聚丙烯(PP)、聚氯乙烯(PVC)等材料，最优的材料是PVC，PVC的价格低廉且易于切割。塑料基片的厚度在0.lmm-0.5mm间，塑料基片厚度越厚机械刚性越强，塑料基片的优选厚度为0.3mm。塑料基片上涂布一层0.1mm厚的丙烯酸胶水，用于粘结试纸。
[0012]缓冲剂试纸块主要提供缓冲成分，缓冲剂可选用2-氨基-2-甲基-1-丙醇(AMP)、N-甲基-D-葡糖胺(MEG)。当在加样孔2中滴加一定量的人体液后，缓冲剂复溶后能使溶液的PH在10-11间。试纸条载体可选用纤维素滤纸、无纺布、尼龙、玻璃纤维等，优选为纤维素滤纸。
[0013]络合剂试纸块5主要提供络合成分，用于络合溶液中的钙离子。络合剂可使用乙二胺四乙酸(EDTA)和乙二醇双(2-氨基乙基醚)四乙酸(EGTA)。由于人体液中含有一定量的Mg2+，当使用EDTA时，EDTA也会和Mg2+络合，干扰测试；当使用EGTA时，EGTA镁配合物很不稳定，而EGTA钙配合物很稳定。因此，在测试含有的人体液中钙离子含量时，使用EGTA络合剂可有效提高选择性。络合剂首选EGTA。试纸条载体可选用纤维素滤纸、无纺布、尼龙、玻璃纤维等，材料应保证不含钙成分，优选为全纤维素滤纸。
[0014]显色剂试纸块6主要提供显色剂成分，显色剂结合Ca2+后会发生颜色突变。通常用于Ca2+滴定测试的显色剂主要有钙红指示剂、铬黑T、间氯安替比林等。钙红指示剂和铬黑T等显色剂往往也会和Mg2+显色，选择性不高。间氯安替比林对Ca2+的选择性较好。因此显色剂的首选为间氯安替比林，该显色剂灵敏度高(Ca2+〈2mg/L)，在碱性环境下显红色，遇到钙离子后显蓝色。间氯安替比林与纤维素等的结合能力较强，遇水后不易复溶释放。显色剂的载体优选直径0.5-0.8mm的玻璃纤维，玻璃纤维上附着的间氯安替比林遇水后释放迅速(小于5秒)。
[0015]观察试纸条8主要是提供显色剂溶液的流动通道。人体液溶解试纸中的缓冲剂、络合剂、显色剂后，溶液会根据钙离子的有无显示不同的颜色。用户通过观察试纸条的呈红色还是蓝色来判断钙离子水平。使用侧向流动的方法可有效解决试纸条显色不均匀的问题。为了提高显色的速度和均匀性，试纸厚度选用0.1mm0观察试纸条经过非离子表面活性剂溶液的浸泡。非离子表面活性剂可选用吐温系列(Tween-20, Tween-80等)和曲拉通系列(Triton X-45, Triton X-100, Triton Χ-114, Triton Χ-305 等)，优选 Triton X-45。
[0016]进一步地，在测试全血时，全血中的红细胞会干扰颜色判断，在试纸块的顶部增加滤血垫，可有效去除红细胞的影响。
[0017]本发明在使用时，将测试条水平放置，取100微升人体液(尿液或血液)滴加到加样孔上，I分钟后观察观察孔处试纸的颜色，蓝色表示不缺钙，红色表示缺钙。
[0018]一种钙定性测试条的制作方法，包括以下步骤:
[0019](I)在塑料基片上均匀涂布一层丙烯酸胶水，以此作为测试条的基片；
[0020](2)将一试纸条载体置于浓度为60-100g/L的2-氨基-2-甲基_1_丙醇或者N-甲基-D-葡糖胺溶液中浸泡5秒钟，取出浙水后悬挂置于40°C下烘烤25分钟备用，得到缓冲剂试纸块；
[0021](3)将一试纸条载体置于浓度为0.01-0.03M的乙二胺四乙酸或者乙二醇双(2_氨基乙基醚)四乙酸溶液中浸泡5秒钟，所述乙二胺四乙酸或者所述乙二醇双(2-氨基乙基醚)四乙酸溶液的浓度根据Ca2+浓度阈值设置，浸泡好的试纸条载体取出浙水后悬挂置于40°C下烘烤25分钟备用，得到络合剂试纸块；
[0022](4)将一玻璃纤维试纸置于含有0.1-0.5% (质量分数)间氯安替比林、1-5% (质量分数)聚乙烯吡咯烷酮的显色剂溶液中浸泡5秒钟，浸泡好的滤纸取出浙水后悬挂置于70°C下烘烤25分钟备用，得到显色剂试纸块；
[0023](5)将试纸条载体置于浓度0.5-1% (质量分数)的表面活性剂溶液中浸泡5秒钟，取出浙干后置于40°C下烘烤25分钟备用，得到观察试纸条；
[0024](6)在塑料基片上按照顺序贴装观察试纸条、吸水纸、显色剂试纸块、络合剂试纸块和缓冲剂试纸块，然后将上述粘贴好的材料分切；最后将切好的测试条置于塑料卡壳中，经压壳后即制得。
[0025]进一步地，所述试纸条载体为纤维素滤纸、无纺布、尼龙或玻璃纤维中的一种。
[0026]进一步地，所述步骤(2)和所述步骤(3)采用同一试纸条载体，制得缓冲和络合剂试纸块。
[0027]本发明所达到的有益效果是:
[0028](I)本发明产品操作简便，成本低廉，不需要专业仪器和专业人士，可用于现场定性判断人体液中钙离子水平；
[0029](2)本发明产品采用的显色剂随钙离子含量可呈现红蓝两种颜色，红色为缺钙，蓝色表示不缺钙，易于肉眼判断。
[0030](3)本发明产品采用的络合剂、显色剂均对Ca2+有良好的选择性，抗干扰能力强。
[0031](4)本发明产品为干化学方法产品，稳定性好，不受环境温湿度的影响。
[0032](5)本发明产品采用侧向流动设计，显色均匀性好，产品的一致性佳。
【附图说明】
[0033]附图用来提供对本发明的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本发明的实施例一起用于解释本发明，并不构成对本发明的限制。在附图中:
[0034]图1是本发明实施例1的结构示意图；
[0035]图2是本发明实施例2的结构示意图；
[0036]图3是本发明实施例3的结构示意图。
【具体实施方式】
[0037]以下结合附图对本发明