一种蒙药材荜拨药效物质基础分析方法

文档序号:8486620阅读:661来源:国知局
一种蒙药材荜拨药效物质基础分析方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及的是中药提取物,具体涉及一种蒙药材荜拨药效物质基础分析方法。
【背景技术】
[0002] 蒙药有着悠久的历史,是蒙古族人民长期同疾患作斗争的经验总结,并吸收藏医、 汉医经验逐渐形成的,是中华民族医学的一个重要组成部分,是具有民族特色的医药。它在 几千年临床医学中被证实为一门不可缺少的学科。蒙药材荜拨是胡椒科植物荜拨的近成熟 或成熟果穗,归脾经、胃经、大肠经、肺经、膀胱经、肝经、肾经。主治脘腹冷痛、呕吐、泄泻、偏 头痛、鼻渊、外治牙痛、冠心病、心绞痛,是中、蒙、藏医常用药。
[0003] 研宄表明荜拨能明显抑制胃酸和胃蛋白酶的分泌,具有止痛、消炎、抗溃疡,促进 消化系统的功能。有方剂记载,荜拨穴位敷贴可以治疗胃脘证。同时在一定程度上还可以 治疗腹泻,对付痢疾,《唐太宗实录》、《独异志》、《定命录》中均记载了唐太宗气痢发动,中医 名药试之无效,有人献乳煎荜拨一方,服之灵验的事,说明荜拨治腹泻具有悠久历史。荜拨 还有一定的抗惊厥疗效,在小鼠实验的时候,有镇静作用,同时对于癫痫等精神疾病也用治 疗效果,能维持中枢神经的稳定性,与一些神经方面的药物有相同的功效。除此之外,还有 关于荜拨药材治疗牙痛和鼻炎的报道。因此,多项研宄表明,蒙药材荜拨用药历史悠久,具 有多重功效,是一味非常具有研宄价值的药材。
[0004] 研宄发现荜拨中的主要成分有胡椒碱,荜拨宁,棕榈酸,四氢胡椒酸,十一 碳-1-烯-3,4-甲撑二氧苯,哌啶,挥发油,芝麻素等。结合国内外有关荜拨的有效成分的 药理作用的研宄发展认为荜拨中的有效成分胡椒碱、荜拨宁有调血脂作用,尤其是胡椒碱 有显著的调血脂作用,其疗效显著,未发现毒副作用,此后,关于荜拨及其有效成分的调血 脂作用不断深入。为此开展的研宄证明,荜拨中胡椒碱能同时抑制内源性和外源性血脂升 高,同时了解到胡椒碱也可能有毒性。但不可否认胡椒碱在降血脂方面有很好的疗效。

【发明内容】

[0005] 本发明的目的之一是提供一种蒙药材荜拨药效物质基础分析方法,本发明采用超 微粉技术、超声提取技术并结合硅胶柱层析和大孔吸附树脂柱层析技术处理蒙药材荜拨, 得到一种全新的蒙药材荜拨药效物质基础分析方法,该方法操作简单,能够将荜拨中的多 种药效成分提取出来,且提高了药效活性成分的提取率,适合工业化生产。
[0006] 本发明具体涉及一种蒙药材荜拨药效物质基础分析方法,该方法包括以下步骤:
[0007] (I)蒙药材荜拨提取物的制备,包括
[0008] 1)购买市售蒙药材-干燥荜拨果实进行超微粉碎,加入乙醇质量分数为 65-100wt %的乙醇溶液,在40_45°C下进彳丁超声提取,时间为4_6小时,过滤,得提取液;
[0009] (II)蒙药材荜拨提取物的药效物质基础成分定性分析
[0010] 采用高效液相色谱对蒙药材荜拨提取物的药效物质基础成分进行定性分析,取上 述制备的蒙药材荜拨提取物溶于流动相,通过高效液相色谱进行分离,将得到的色谱图同 荜拨药效成分标准品的色谱图进行比对,以分析该蒙药材荜拨提取物的成分;通过分析得 出,第(I)步中得到的蒙药材荜拨提取物的色谱图能够清楚的区分出各药效成分的色谱 峰。
[0011] 优选地,所述的一种蒙药材荜拨药效物质基础分析方法,该方法包括以下步骤:
[0012] (I)蒙药材荜拨提取物的制备,包括
[0013] 1)购买市售蒙药材-干燥荜拨果实进行超微粉碎,加入乙醇质量分数为 65-100wt %的乙醇溶液,在40_45°C下进彳丁超声提取,时间为4_6小时,过滤,得提取液;
[0014] (II)蒙药材荜拨提取物的药效物质基础成分定性分析
[0015] 采用高效液相色谱对蒙药材荜拨提取物的药效物质基础成分进行定性分析,取上 述制备的蒙药材荜拨提取物溶于流动相,通过高效液相色谱进行分离,将得到的色谱图同 荜拨药效成分标准品的色谱图进行比对,以分析该蒙药材荜拨提取物的成分;通过分析得 出,第(I)步中得到的蒙药材荜拨提取物的色谱图能够清楚的区分出胡椒碱、荜茇明宁碱、 二氢荜茇明宁碱、胡椒酰胺、四氢胡椒酸、荜茇壬二烯哌啶、荜茇壬三烯哌啶、荜茇十一碳三 烯哌啶、N-异丁基十八碳-2,4-二烯酰胺的色谱峰。
[0016] 优选地,所述的一种蒙药材荜拨药效物质基础分析方法,该方法包括以下步骤:
[0017] (I)蒙药材荜拨提取物的制备,包括
[0018] 1)购买市售蒙药材-干燥荜拨果实进行超微粉碎,加入乙醇质量分数为 65-100wt %的乙醇溶液,在40_45°C下进彳丁超声提取,时间为4_6小时,过滤,得提取液;
[0019] 2)将提取液经过硅胶层析柱吸附,用水洗脱3个柱体积,弃去洗脱液,然后用有机 溶剂为洗脱液,进行洗脱,收集该洗脱液;
[0020] 3)将上述洗脱液减压浓缩,得干浸膏;
[0021] (II)蒙药材荜拨提取物的药效物质基础成分定性分析
[0022] 荜拨药效成分标准品溶液的配制:取等质量的胡椒碱、荜茇明宁碱、二氢荜茇明 宁碱、胡椒酰胺、四氢胡椒酸、荜茇壬二烯哌啶、荜茇壬三烯哌啶、荜茇十一碳三烯哌啶和 N-异丁基十八碳_2,4-二烯酰胺的标准物质,用流动相溶解,即将上述物质一起溶解于流 动相中;
[0023] 采用高效液相色谱对蒙药材荜拨提取物的药效物质基础成分进行定性分析,取上 述制备的蒙药材荜拨提取物溶于流动相,通过高效液相色谱进行分离,将得到的色谱图同 荜拨药效成分标准品的色谱图进行比对,以分析该蒙药材荜拨提取物的成分;通过分析得 出,第(I)步中得到的蒙药材荜拨提取物的色谱图能够清楚的区分出胡椒碱、荜茇明宁碱、 二氢荜茇明宁碱、胡椒酰胺、四氢胡椒酸、荜茇壬二烯哌啶、荜茇壬三烯哌啶、荜茇十一碳三 烯哌啶、N-异丁基十八碳-2,4-二烯酰胺的色谱峰。
[0024] 优选地,所述的一种蒙药材荜拨药效物质基础分析方法,该方法包括以下步骤:
[0025] (I)蒙药材荜拨提取物的制备,包括
[0026] 1)购买市售蒙药材-干燥荜拨果实进行超微粉碎,加入乙醇质量分数为 65-100wt %的乙醇溶液,在40_45°C下进彳丁超声提取,时间为4_6小时,过滤,得提取液;
[0027] 2)将提取液经过硅胶层析柱吸附,用水洗脱3个柱体积,弃去洗脱液,然后用甲 醇-氯仿为洗脱液,进行洗脱,收集该洗脱液;
[0028] 3)将上述洗脱液减压浓缩,得干浸膏;
[0029] 4)将上述干浸膏用丙酮质量分数为75-80wt%的丙酮溶液溶解,上大孔吸附树脂 柱,然后用3倍柱体积的丙酮质量分数为10_20wt %的丙酮溶液洗脱,弃去洗脱液;再用丙 酮质量分数为75-80wt%的丙酮溶液洗脱,收集该洗脱液;
[0030] 5)将上述洗脱液减压浓缩,干燥,得蒙药材荜拨提取物;
[0031] (II)蒙药材荜拨提取物的药效物质基础成分定性分析
[0032] 色谱条件:色谱柱为C18 ;流动相为甲醇-水溶液,甲醇与水的体积比为 50-70 : 30-50 ;检测波长为 250-350nm,柱温为 30-45°C,流速 1.0 mL/min ;进样体积 50 μ L ; 采用等梯度洗脱;
[0033] 荜拨药效成分标准品溶液的配制:取等质量的胡椒碱、荜茇明宁碱、二氢荜茇明宁 碱、胡椒酰胺、四氢胡椒酸、荜茇壬二烯哌啶、荜茇壬三烯哌啶、荜茇十一碳三烯哌啶、N-异 丁基十八碳-2,4-二烯酰胺的标准物质,用流动相
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