带有培育装置的微型板读取器的制造方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及带有用于从微型板的孔减少液体蒸发的培育装置的微型板读取器。
【背景技术】
[0002] 一段时间W来已知微型板读取器，利用微型板读取器，可WW光学方式来化验或 分析微孔板的一个或多个孔的内含物。具有排列成阵列的多个孔或容器的所有多孔板被称 作关于本发明的微型板。特别优选的微型板具有至少大约根据SBS标准的微型板的质量和 占据面积，如美国国家标准协会（ANSI)所公开。例如，已知包括配备了圆形底部、平坦底部 或者V形底部的孔的标准微型板。具有显著不同孔形状的所有该些标准微型板共有W下 特点；排列成阵列的相应孔的轴向间距也是标准化的（对照2006年微型板尺寸标准ANSI_ SBSl-2-3-4-2004)。该个轴向间距为例如24孔（4X6)板18mm，96孔巧X12)板9mm，384 孔（16X24)板4. 5mm，化及1536孔（32X48)板2. 25mm。标准微型板的高度可W根据类型 而显著不同并且通常在10. 4mm(例如，1536V基部深孔板）与44mm(例如，自Greiner的96 孔Masterblock⑥之间。
[0003] 已知微型板读取器配备了适当光源和/或检测器W基于样品的吸收和/或巧光和 /或冷光来化验微型板的孔中的样品。样品通常位于液体中，液体受到周围环境影响。特别 是在通常在本身固定的微型板读取器中执行的持续时间长的实验系列的情况下，在数小时 或者甚至数天，并且可能也在相对于室温升高的温度，对于包含液体的样品可能导致蒸发 问题。样品液体的蒸发导致待分析的缓冲物质和分子（分析物）增稠和因此浓度变化。因 此，例如，改变了基于细胞的实验的生长条件和细胞对于实验引起的影响的反应。此外，观 察到布置于标准微型板的拐角中的孔的样品液体经受比布置于微型板中部的孔显著更严 重的蒸发问题。而该意味着增稠并不W均匀分布的方式在微型板的所有孔中发生，而该导 致相同测试系列内差异和因此不可比较的结果。
[0004] 从现有技术已知防止或至少减轻该种蒸发问题的设备。因此专利US5, 789, 251 公开了一种自粘性覆盖膜，其可W使用移液管顶端刺穿，W密封标准微型板的孔；然而，该 种覆盖膜可能损害微型板读取器中的实验结果的光学分析，使得该种膜必须实施为高度透 明的并且不能在其内表面上具有冷凝产品。否则，必须移除膜W进行光学分析，其最差能导 致样品溢出或其它变化（例如，通过交叉污染）。从专利US6, 408, 595B1已知一种很复杂 的涂敷器，使用该种涂敷器，能将自粘覆盖膜施加到标准微型板上。
[0005] 从专利US6, 518, 059B1已知在具有安装的液体储集器的气候控制的腔室中储存 标准微型板并且因此防止蒸发问题发生；然而，必须在培育时间之后从气候腔室移除微型 板，并且为了光学分析，转移到微型板读取器。也可能在转移中并且也在处于微型板读取器 中时发生蒸发问题。US2006/0023299A1还公开了一种气候控制腔室，气候控制腔室布置 于培育器箱内侧，培育器箱可W被覆盖并且被屏蔽隔离磁场。作为气候控制腔室的替代，微 型板可W放入于培育器箱中，培育器箱配备双周向壁。无菌水浴布置于培育器箱的两个壁 之间，使用无菌水浴，可W在培育器箱中实现培养气体被水几乎100%饱和。相比而言，专利 申请US2008/0180793A1公开了一种具有插入于活细胞腔室中的微型板的系统，微型板的 孔经由气体管线系统被供应湿润培养气，培养气在系统的特殊调节的设施中富集水蒸气。
[0006] 还知道用于防止蒸发问题的微型板的覆盖设备的用途。专利EP0 311 440B1公 开了用来执行液体反应的设备，其中，微型板夹持在两个加热板之间。在该种情况下，可W 设置在37°C与90°C之间的温度，其中微型板的孔被覆盖上加热板的弹性板W减少孔中液 体的蒸发。专利EP1 623 759B1公开了一种具有特殊构造微型板/覆盖物组合的系统， 其中，微型板的封闭壁和覆盖物被实施成使得它们联锁并且因此密封孔上方的空间。在该 种系统中使用标准微型板是不可能的。
[0007] 专利US7, 767, 154B2公开了一种略微不同的方案，其中，具有卡销的覆盖物压到 微型板上使得该些卡销利用摩擦锁保持在微型板的相对应卡合开口内。在覆盖物上的周向 密封件额外地减少了源自孔的蒸气能逸出到周围环境内的可能性。然而，微型板和覆盖物 的特殊实施例是必需的并且必需使用特殊和相当复杂的工具来执行微型板/覆盖物组合 的闭合和打开。在此处，使用标准微型板也是不可能的。
[000引从EP1 465 730B1已知另一种方案。覆盖物放到其中的多孔板的孔上，使得覆 盖物触及在整个表面上的样品液体，其中，从满溢孔出来的液体样品用作密封件。因此存在 下面该样的风险；将失去待分析的分子。在该种系统中也不能使用标准微型板。
[0009] 文献WO02/24336A1公开了一种带覆盖物和固位框架的培育装置，其中，可W插 入一个或多个滴定板。覆盖物被压到密封件和固位框架上并且贴纸（stamp)密封在滴定板 下方的固位框架的连续凹部，使得滴定板总是被密封地封闭。
[0010] 文献WO03/089137A1公开了用于执行生物测试的系统，基板（微型板）和培育 装置。微型板的每个孔基部包括带有对准的流动通道的微阵列基板，并且培育装置包括用 于将微型板固位在加热块中的培育腔室和用于密封培育腔室的覆盖物。覆盖物还包括密封 件，密封件的开口布置成阵列使得当插入覆盖物时，微型板的每个孔单独地密封。
[0011] 在现有技术中存在的缺点包括；在不从微型板移除膜或者在将微型板放入于微型 板读取器之前提起覆盖物的情况下，不能使用喷射器来添加试剂扣S5, 789, 251表示一种 可能的例外）。在基于细胞的实验中，孔相对于周围环境的密封隔离实施的越完整，可能的 气体交换就越少（例如，其对于细胞培养而言是重要的）。然而，疏松覆盖微型板由于蒸发 而经历样品液体可能减轻的，但仍然存在的增稠。积聚在光学透明覆盖膜或者微型板覆盖 物底侧上的冷凝产品导致在吸收度模式中不正确的测量。在微型板上的覆盖膜或覆盖物防 止顶部检测模式的巧光测量；不能穿过微型板覆盖物进行冷光测量。
【发明内容】
[001引因此，本发明的目的在于提出一种微型板读取器，利用该种微型板读取器，可W基 本上排除从现有技术已知的缺点。
[0013] 通过在权利要求1中限定的微型板读取器和培育装置实现了该个目的。根据本发 明的微型板读取器包括至少：
[0014] a)测量空间；
[0015] b)作用源，其被配置成与微型板的孔中的生物结构产生相互作用并且用于产生或 生成可测量的信号；
[0016] c)测量装置，其被配置成检测由微型板的孔中的生物结构发出或者由微型板的 孔中的生物结构中或者生物结构上的作用源产生或生成的信号，其中所述测量装置限定光 轴；
[0017] d)运输支承件，其可W至少部分地从测量空间延伸并且其被配置成相对于微型板 读取器的测量装置的光轴定位微型板的孔，运输支承件被配置成在测量空间内在至少一个 方向上移动；W及
[001引e)控制器，其被配置成控制作用源、测量装置和微型板读取器的运输支承件的移 动。
[0019] 根据本发明的微型板读取器的特征在于其包括用于减少来自微型板读取器的液 体蒸发的培育装置，其中：
[0020] (i)培育装置包括用于容纳带有孔的微型板的框架，孔具有孔底部；
[0021] (ii)框架包括由内壁周围的第一开口，第一开口尺寸被配置成插入微型板；W及
[0022] (iii)框架包括外壁，外壁基本上平行于内壁延伸并且外壁经由中间底部连接到 内壁使得由两个壁和中间底部形成第一开口周围的通道W容纳被调整为微型板孔的含量 的液体。
[0023] 根据本发明的微型板读取器的特征在于培育装置包括支承表面，支承表面带有第 二开口，其中所述支承表面布置于内壁上并且被配置成支承插入的微型板，并且其中由于 第二开口的结果，插入于培育装置内的微型板的孔的底部的至少一部分可W通过第二开口 自由接近。
[0024] 在相应附属权利要求中提供了微型板读取器、培育框架和培育器的另外优选和创 新性特点W及其用途。
[0025] 根据本发明的培育盒和根据本发明的微型板读取器的优点包括下列：
[0026] ?培育框架和培育盒的尺寸设定和配置使得它们能容易地（手动地或者利用机器 人）插入于微型板读取器的运输支承件内并且也能从所述运输支承件容易地移除（手动或 者利用机器人）。
[0027] ?由一种经证明的夹持机构来将微型板固定于微型板读取器的运输支承件上和/ 或培育框架中和/或培育盒的框架中的限定位置。
[002引?插入于培育框架内或者插入于培育盒内的微型板的至少部分孔的底部，但优选 地全部孔底部保持从下方自由接近，即，通过整合框架或培育盒的框架并且通过运输支承 件的读取开口，使得能施加微型板读取器的本身已知的底部读取模式。
[0029] ?培育框架或培育盒提供呈通道形式的储集器，其能被填充液体（例如，水），液体 封闭插入的微型板并且因此添加到微型板孔紧邻周围的气氛中。
[0030] ?可W利用手持移液管、实验室工作站移液管或者微型板读取器的喷射器来至少 部分地填充或再填充通道。
[0031] ?为了屏蔽富集的气氛与环境，覆盖物可W放到培育框架上，因此提供培育盒；该 个覆盖物可W由