快速鉴别鲜茧缫制生丝和干茧缫制生丝的方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及丝铜生产和生丝商品流通领域中桑蚕鲜虽缴制生丝（鲜虽丝）和干虽 缴制生丝（干虽丝）的鉴别方法。具体地，设及利用生丝类产品中微量组分的高效提取、浓 缩和高效液相色谱法快速鉴别鲜虽丝和干虽丝中微量组分的方法。
【背景技术】
[0002] 干虽丝是指通过常规的制丝生产工序包括鲜虽一烘虽一储存一选虽一煮虽一缴 丝一复摇一整理工序所缴制成的生丝产品。干虽丝生产流程长，能耗高。在缴丝成本日益 高涨，及冷冻技术不断发展和冷库储存成本降低的背景下，越来越多的制丝企业选择鲜虽 缴丝。鲜虽缴丝是指先将从蚕农手上收购的蚕虽送入冷库储藏，缴丝时将蚕虽运出直接通 过一定溫度的水真空渗透后缴丝（少部分为收购上来后直接运往工厂缴丝），不再经过高 溫烘虽杀蛹和煮虽过程。运种缴丝方法得到的生丝即为鲜虽丝。由于鲜虽缴丝工序较少，节 省能耗且可W充分利用制丝副产品一蚕蛹，具有一定的经济优势，因而鲜虽缴丝日益普遍。
[0003] 但是，越来越多的丝铜企业使用鲜虽丝后反映：鲜虽丝在络丝、并丝、抢丝等工序 的断头率、倒筒过程中的清糖次数及生丝表面的疵点明显高于干虽丝。鲜虽丝在织造过程 中断头，铜面起毛，丝条纸裂，面料染色出现色花的概率高于干虽丝。鲜虽丝制织的面料外 观质量也不如干虽丝制织的面料。相关研究也指出鲜虽丝的洁净性和抱合指标比干虽丝 差，运是导致上述问题出现的主要原因。
[0004] 鲜虽丝和干虽丝的准确鉴别关系到缴丝企业和丝铜生产企业的利益及二者之间 的商业纠纷。开发两者的鉴别方法可为生丝的商检、生丝质量指标的完善W及丝铜产品的 质量保证提供方法依据。但是，目前业界并没有提出方便且行之有效的方法。依靠测试生 丝的洁净性和抱合力来区分鲜虽丝和干虽丝是不可行的，因为两者属于统计学指标，需要 大量的测试数据，而且没有可W参考的标准值。各产地的蚕虽及不同缴丝企业生产的生丝 质量差异较大，生丝洁净性和抱合力都有差别，不同庄口生丝差异大，该方法的误检率高， 且操作繁杂，耗时较长，费用较高，不便于推广应用。鉴于鲜虽缴丝法的快速发展和商业纠 纷日益增多，建立一种能快速识别和能鉴别鲜虽丝和干虽丝的方法迫在眉睫。
【发明内容】
[0005] 本发明要解决的技术问题是提供一种利用高效液相法对鲜虽丝和干虽丝进行快 速鉴别的方法，从而实现能快速识别和能鉴别鲜虽丝和干虽丝。
[0006] 为了解决上述技术问题，本发明提供一种快速鉴别鲜虽缴制生丝和干虽缴制生丝 的方法，包括W下步骤：
[0007] 取事先已确定是干虽缴制生丝（干虽丝）作为标准品，取待测的缴制生丝作为待 测样品，将标准品和待测样品在相同的分析条件下分别进行如下步骤1)~步骤3):
[000引 1)、将样品剪碎或粉碎后加入溶剂进行提取，所述样品为标准品、待测样品；
[0009] 2)、步骤1)得到的提取液浓缩至干，得提取物；
[0010] 3)、将步骤2)所得的提取物用溶剂进行溶解后，过滤，所得的滤液进行高效液相 色谱分析；
[0011] 从而分别获得标准品的高效液相色谱分析结果、待测样品的高效液相色谱分析结 果；
[0012]4)、根据高效液相色谱分析结果，判断待测样品为鲜虽丝还是为干虽丝：
[0013]当待测样品的高效液相色谱分析结果与标准品的高效液相色谱分析结果相比，多 出现至少一个特征组分峰时，判定待测样品为鲜虽缴制生丝；
[0014] 反之，则判定待测样品为干虽缴制生丝。
[0015] 作为本发明的快速鉴别鲜虽丝和干虽丝的方法的改进：
[0016] 所述溶剂为水（去离子水）、甲醇、乙醇、已腊中的至少一种（即，为任意一种，或为 两种或两种W上的混合液）。
[0017] 备注说明：步骤1)和步骤3)中的溶剂可用同一物，也可不为同一物。
[0018] 作为本发明的快速鉴别鲜虽丝和干虽丝的方法的进一步改进：
[0019] 所述步骤3)的高效液相色谱分析：色谱柱为反相色谱柱，可W为含有C4、C8、C18 及苯基等填料的色谱柱；使用的流动相的有机相为甲醇或已腊，水相为纯水或有机酸水 溶液，所述有机酸水溶液中，有机酸的体积浓度为《1%;检测波长为220-320nm(最优为 280nm)；
[0020] 所述有机酸为甲酸或乙酸。
[0021] 作为本发明的快速鉴别鲜虽丝和干虽丝的方法的进一步改进：
[0022] 所述步骤3)中高效液相色谱分析的检测波长及色谱条件为： 阳02引流动相：甲醇-水溶液为流动相；洗脱梯度为：0min:6 %甲醇，94 %水； 17min:100% 甲醇，0%水；20min:100% 甲醇，0%水。流速：1. 0血/min;检测波长：280nm;柱 溫：30°C，进样量20化。
[0024] 作为本发明的快速鉴别鲜虽丝和干虽丝的方法的进一步改进：
[00巧]所述步骤1)提取所用溶剂为去离子水；
[00%] 所述步骤4)为：当待测样品的高效液相色谱分析结果与标准品的高效液相色谱 分析结果相比，于12-15min出现特征组分峰时，判定待测样品为鲜虽缴制生丝。
[0027] 作为本发明的快速鉴别鲜虽丝和干虽丝的方法的进一步改进：
[0028] 所述步骤1)提取所用溶剂为甲醇；
[0029] 所述步骤4)为：当待测样品的高效液相色谱分析结果与标准品的高效液相色谱 分析结果相比，于6-lOmin出现特征组分峰时，判定待测样品为鲜虽缴制生丝。
[0030] 作为本发明的快速鉴别鲜虽丝和干虽丝的方法的进一步改进：
[0031] 所述步骤3)中，每4~6g(较佳为5g)的样品制备而得的提取物用1ml溶剂溶解； 用0. 45ym滤膜过滤。
[0032] 作为本发明的快速鉴别鲜虽丝和干虽丝的方法的进一步改进： 阳〇3引所述步骤1)中：
[0034] 样品与溶剂的重量/体积比为：lg/10~100ml;
[0035] 所述提取为于超声波频率为28-100曲Z，功率为50-400W的超声波辅助提取比。
[0036] 备注说明：所述步骤1)中，一般利用剪刀剪碎或者粉碎机粉碎虽丝至1cmW下；
[0037] 本发明的步骤1)~步骤3)较佳为：称取样品5g至于100ml烧杯中，加入50ml去 离子水，超声提取比，抽滤后将滤液浓缩至干，再加入1ml去离子水溶解提取物，将提取液 用0.45ym滤膜过滤，备用。
[0038] 在本发明图谱分析中：根据高效液相色谱图中色谱峰的保留时间和峰型定性，图 谱中含有鲜虽丝特征组分的色谱峰的样品，即为鲜虽丝，否则为干虽丝。
[0039] 本发明的高效液相色谱分析的仪器为：
[0040] 安捷伦1260Infinitysystem高效液相色谱仪（1260四元梯度累，1260ALS 自动进样器，1260变波长二极管阵列检测器，安捷伦EclipseXDB-Ci泡谱柱 (150X4. 6mm，3. 5ym)，安捷伦ChemStation色谱工作站软件）；JK-2200DB超声波清洗器 (合肥金尼克超声仪器有限公司）。
[0041] 本发明的关键点在于：利用真正的鲜虽丝或干虽丝作为标准来区分待检虽丝样品 是否为鲜虽丝。基于鲜虽丝含有某些特征成分，运些特征组分在特定的色谱条件下可W被 检测到。不同庄口（蚕虽的产区）的鲜虽丝中的特征组分大致相同，在相同的检测条件下， 其在色谱图中的保留时间大致一致。因此本发明可检测来自不同庄口的虽丝样品，具有较 广的适用性。
[0042] 本发明对收集自全国各地的3批共14个虽丝样品（包括了当年产、存储多年的鲜 虽丝和干虽丝）进行了分析，各地当年产的鲜虽丝和干虽丝样品的色谱图大致相同。存储 多年后的鲜虽丝与当年产的鲜虽丝特征成分峰有一定的差异（差异主要体现在特征组分 峰变少，某些峰强度减弱），但依然能十分容易地区分于干虽丝。运些特征组分的差异或可 W用于区分当年产和存储多年的鲜虽丝。
[0043] 本发明通过对生丝微量组分的高效提取及浓缩，利用高效液相色谱法对鲜虽丝和 干虽丝进行快速鉴别。本发明操作简便，鉴别快速准确，可应用到鉴别鲜虽丝和干虽丝的实 际应用中。当待测样品的色谱图中含有鲜虽丝的特征峰时，待测样品为鲜虽丝，否则为干虽 丝。
【附图说明】
[0044] 下面结合附图对本发明的【具体实施方式】作进一步详细说明。 W45] 图1为原产于浙江湖州地区的鲜虽丝（当年产）的高效液相色谱图；
[0046] 图2为原产于浙江湖州地区的干虽丝（当年产）的高效液相色谱图；
[0047] 图3为原产于广西地区的鲜虽丝（当年产）的高效液相色谱图； W48] 图4为原产于广西地区的干虽丝（当年产）的高效液相色谱图；
[0049] 图5为原产于浙江湖州地区的鲜虽丝（自然条件下存储2-3年）的高效液相色谱 图；
[0050] 图6为原产于浙江湖州地区的干虽丝（自然条件下存储2-3年）的高效液相色谱 图。
【具体实施方式】
[0051] W下实施例用于说明本发明，但不是对本发明的限制。
[0052] 实施例1、浙江湖州地区当年产的鲜虽丝和干虽丝的区分：
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