杂型N-糖链水平Gall和末端连有2个半乳糖的双天 线复杂型N-糖链水平Galz;
[0184] 征'）计算Gal。与Gal1和Gal2的丰度比值，即Gal比； 阳化日]胆）根据Gal比判断对象是否罹患恶性肿瘤、对对象进行预后评估和/或罹患肿 瘤的风险评估、对病情进行监测和/或对疗效进行评估。 阳186] 步骤（C'）在不同应用时可包括： 阳187] 1)用于肿瘤筛查检测：当Gal比达到或高于预先设定的阔值，则判定该受试者患 有恶性肿瘤或具有罹患恶性肿瘤的风险。
[0188] 2)用于良恶判定：当Gal比达到或高于预先设定的阔值，则判定该受试者患有恶 性肿瘤或具有罹患恶性肿瘤的风险。
[0189] 3)用于预后监测：当Gal比达到或高于预先设定的阔值，则提示对象恶性肿瘤复 发或具有复发的高风险；
[0190] 4)用于对象群（例如高危群体）恶性肿瘤发生预期：当Gal比达到或高于预先设 定的阔值，则提示对象发生恶性肿瘤的可能性高于其它对象； 阳1W] 5)用于癌症患者病情监测：当Gal比高于前次测试所得的Gal比达到或高于预先 设定的范围（例如5 %~50 %或该范围内的任意点或子范围），则表明该癌症患者的病情有 所发展或进一步恶化； 阳19引 6)用于疗效评估：在治疗前后或治疗过程中的不同时间点测定并计算Gal比值， 当Gal比值高于前次测试所得的Gal比值达到或高于预先设定的范围（例如5%~50%或 该范围内的任意点或子范围），则表明该疗法和/或药物的疗效不佳。 阳193] 本发明方法中的阔值范围可为0. 35~0. 6,优选0. 5。可根据受试群体和瘤种的 不同对阔值范围进行调整，例如基于R0C曲线中斜率最大点或最大化灵敏度和特异度的值 来确定相应的阔值范围。 阳194] 此外，本发明的方法还可选的包括选自下组的一种或多种步骤： 阳1巧](曰'）采集和/或处理对象血液样品； 阳196] 化'）分离和/或纯化血清和/或血浆；
[0197] (C'）分离和/或纯化血清/血浆IgG; 阳19引 （d'）分离、纯化和/或富集血清IgG表面N-糖链； 阳199] (e'）存储和/或处理对象血清的双天线复杂型N糖链末端去半乳糖与半乳糖糖链 丰度比值作为IgG表面半乳糖化量变指标；
[0200] (f'）提供判断阔值； 阳201] (g'）将对象的Gal比与对照比较W判断对象是否罹患恶性肿瘤、对对象进行预后 评估和/或罹患肿瘤、病情监测和/或疗效评估；
[0202] 化'）提供诊断和/或检测结果和/或报告。 阳203] 其中，根据不同应用，步骤化'）的判断可如下进行： 阳204] α'）用于肿瘤筛查检测：当Gal比达到或高于预先设定的阔值，则判定该受试者 患有恶性肿瘤或具有罹患恶性肿瘤的风险；
[0205] (ii'）用于良恶判定：当Gal比达到或高于预先设定的阔值，则判定该受试者患有 恶性肿瘤或具有罹患恶性肿瘤的风险；
[0206] (iii'）用于预后监测：当Gal比达到或高于预先设定的阔值，则提示对象恶性肿 瘤复发或具有复发的高风险；
[0207] (iv'）用于对象群（例如高危群体）恶性肿瘤发生预期：当Gal比达到或高于预 先设定的阔值，则提示对象发生恶性肿瘤的可能性高于其它对象； 阳20引 （V'）用于癌症患者病情监测：当Gal比高于前次测试所得的Gal比达到或高于预 先设定的范围（例如5 %~50 %或该范围内的任意点或子范围），则表明该癌症患者的病情 有所发展或进一步恶化； 阳209] (Vi'）用于疗效评估：在治疗前后或治疗过程中的不同时间点测定并计算Gal比 值，当Gal比值高于前次测试所得的Gal比值达到或高于预先设定的范围（例如5%~50% 或该范围内的任意点或子范围），则表明该疗法和/或药物的疗效不佳。
[0210] 其中，α'）~（iv'）中的阔值可为0.35~0.6,优选0.5。本领域普通技术人员 也可根据具体需要对阔值进行设定。 阳211] 本发明的方法优选是高通量检测方法，例如可同时处理96、192、288、384、480、576 个样品。
[0212] 相应的，本发明中还提供了一种恶性肿瘤筛查、早期诊断、预后评估、风险评估、病 情监测和/或疗效评估的产品。所述产品可为，例如试剂盒、设备、系统和/或它们的组合。 所述产品包括：
[0213] (A)用于测定血液IgG表面双天线复杂型N糖链的末端半乳糖基化水平的试剂和 /或仪器，其用于测定IgG表面末端无半乳糖连接的双天线复杂型N-糖链水平Gal。、末端 连有1个半乳糖的双天线复杂型N-糖链水平Gall和末端连有2个半乳糖的双天线复杂型 N-糖链水平Galz; 阳214] 度）可选的，用于计算Gal。与Gal1和Gal2的丰度比值的模块或处理器；
[0215] (C)可选的，用于根据Gal比判断对象是否罹患恶性肿瘤、对对象进行预后评估和 /或罹患肿瘤的风险评估、病情监测和/或疗效评估的模块或处理器。 阳216] 此外，本发明的产品可选的包括选自下组的一种或多种：
[0217] (a)用于采集和/或处理对象血液样品的试剂和/或仪器；
[0218] 化）用于分离和/或纯化血清和/或血浆的试剂和/或仪器；
[0219] (C)用于分离和/或纯化血清/血浆IgG的试剂和/或仪器；
[0220] (d)用于分离、纯化和/或富集血清IgG表面N-糖链的试剂和/或仪器； 阳221] (e)用于存储和/或处理对象血清的双天线复杂型N糖链末端去半乳糖与半乳糖 糖链丰度比值作为IgG表面半乳糖化量变指标的数据库、模块或处理器；
[0222] 讯用于提供判断阔值的模块或处理器；
[0223] (g)用于将对象的Gal比与对照比较W判断对象是否罹患恶性肿瘤、对对象进行 预后评估和/或罹患肿瘤的风险评估、病情监测和/或疗效评估的模块或处理器；
[0224] 化）用于提供诊断和/或检测结果和/或报告的模块或处理器；
[0225] (j)说明书或使用指南，其中记载了如下一种或多种应用和判断方式：
[0226] ω用于肿瘤筛查检测：当Gal比达到或高于预先设定的阔值，则判定该受试者患 有恶性肿瘤或具有罹患恶性肿瘤的风险；
[0227] 扣）用于良恶判定：当Gal比达到或高于预先设定的阔值，则判定该受试者患有 恶性肿瘤或具有罹患恶性肿瘤的风险；
[0228] (iii)用于预后监测：当Gal比达到或高于预先设定的阔值，则提示对象恶性肿瘤 复发或具有复发的高风险；
[0229] (iv)用于对象群（例如高危群体）恶性肿瘤发生预期：当Gal比达到或高于预先 设定的阔值，则提示对象发生恶性肿瘤的可能性高于其它对象； 阳230] (V)用于癌症患者病情监测：当Gal比高于前次测试所得的Gal比达到或高于预 先设定的范围（例如5 %~50 %或该范围内的任意点或子范围），则表明该癌症患者的病情 有所发展或进一步恶化； 阳23U (Vi)用于疗效评估：在治疗前后或治疗过程中的不同时间点测定并计算Gal比 值，当Gal比值高于前次测试所得的Gal比值达到或高于预先设定的范围（例如5%~50%或该范围内的任意点或子范围），则表明该疗法和/或药物的疗效不佳。 阳232] 其中，（i)~（iv)中的阔值可为0.35~0.6,优选0.5。本领域普通技术人员也 可根据具体需要对阔值进行设定。 。2；3；3]本发巧的优点阳234] 本发明的主要优点是：
[0235] 1)适用于各种恶性肿瘤的筛查； 阳236] 2)针对某种特定肿瘤，与现有的临床诊断经典标准相比，具有特异度高、灵敏度 高、准确度高的特征； 阳237] 3)与现有的临床诊断经典标准联用，具有更高的检出率； 阳23引 4)检测便捷，耗时短；针对单个样本，检测值重复性好，稳定性佳；可进行高通量 检测。 阳239] 本发明符合优秀临床诊断指标在实际检测过程中应满足的操作要求，表明检测血 液IgG的Gal比在恶性肿瘤筛查、早期诊断、预后评估、风险评估等方面具有临床应用的实 际可行性。 悦40] 实施例 阳241] 下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，运些实施例仅用于说明本发明 而不用于限制本发明的范围。本领域技术人员可对本发明做出适当的修改、变动，运些修改 和变动都在本发明的范围之内。 阳242] 下列实施例中未注明具体条件的实验方法，可采用本领域中的常规方法，例如 参考《分子克隆实验指南》（第Ξ版，纽约，冷泉港实验室出版社，New化rk:Cold Spring Harbor L油oratory Press, 1989)或按照供应商所建议的条件。DM的测序方法为本领域 常规的方法，也可由商业公司提供测试。 阳243]除非另外说明，否则百分比和份数按重量计算。除非另行定义，文中所使用的所有 专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均 等的方法及材料皆可应用于本发明方法中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之 用。
[0244] 歷
[0245] 在本发明如下试验中，运用本发明的方法和指标对如表1所示的W下样本进行检 测： 阳246] 1) 924例对照样本（包括健康人样本+良性对照样本，即表3A中的非恶样本，其中 的良性对照如表3A中所示为404例）； 阳247] 2) 1737例恶性肿瘤术前血液样本（包括肝癌、胃癌、肺癌、卵巢癌、肠癌、食管癌、 膜腺癌、胆管癌、肾癌、乳腺癌、前列腺癌、鼻咽癌、宫颈癌、膀脫癌、子宫内膜癌）； 阳24引 3)78例恶性肿瘤（胃癌）术后血液样本； 阳249] 4)4217例高危人群的血液样本。 阳巧0] 判断本发明在恶性肿瘤筛查中具有高度特异性和灵敏性，从而判断本发明的方法 和指标具有临床意义。 阳251] 表1.样本分类及样本年龄分布 阳巧2]
[0巧引材料与方法 阳巧4] I.血清样品的来源、分类、病理资料采集、保存和操作
[0巧引样本夹源: 阳巧6] 健康人血液样本、良性对照血液样本、恶性肿瘤术前血液样本、癌前病变患者血液 样本和恶性肿瘤术后血液样本均取自Ξ级甲等医院的住院和口诊患者。 。巧7]样本分类: 阳巧引恶性肿瘤和癌前病变样本：经过明确病理诊断罹患肿瘤或有明确癌前病变病患的 血清样本；其中，肿瘤样本分期及分级统计见表2,分类统计见表3,所参照的标准如下所述 (引自《恶性肿瘤I醒分类法》手册）。 阳巧9] 目前国际上常用TNM分期标准。TNM分类方法是依据临床所见对癌症进行病理分 期： 阳260] 1.T一一原发肿瘤（最初发生的癌症）的大小、浸润范围、有无转移、浸润深达程 度，分为（TO至T4)五个等级，数字越大表示癌症进展得越明显，根据癌症发生的不同脏器 制定的分类方法也不尽相同。 阳％1] 2.N一一周围淋己结的转移程度，分为（NO至N3)四个等级，数字越大表示癌症进 展得越明显。 阳％2] 3.Μ一一远处转移情况，Μ0表示没有发生其他脏器转移，Ml则表示已经发生了其他 脏器转移。 阳263] I期：肿瘤局限一处，没有扩散迹象。II期：肿瘤已扩散到邻近的淋己结，但没有 波及其它器官或组织。III期：肿瘤除了扩散到邻近淋己结外，还波及附近器官或组织。IV期：肿瘤已扩散到远处的部位。其时期越早，治疗效果越好，患者生存时间越长。如果实施 手术方法切除癌症，在术后还要详细检查切除的癌组织标本，对其进行手术后的?m分期。 [0264] 据癌症细胞分化程度可对癌症进行病理分级： 阳2化]1.I级为分化好，恶性程度低；
[0266] 2.II级为分化中等，恶性程度中度；
[0267] 3.III级为分化差，恶性程度高。 阳26引恶性肿瘤的病理分级提示肿瘤的恶性程度。
[0269] 健康人样本：无任何已知的良性和恶性疾病、外表正常，无任何可见疾病症状的 人。
[0270] 良性对照样本：经临床生化、影像或组织病理报告确诊良性疾病而非恶性肿瘤患 者的样本。 阳271] 恶性肿瘤患者样本：经组织病理报告确诊为恶性肿瘤患者的样本。 阳272] 高危人群样本：指有发生肿瘤的高度危险度的人群的样本。在肿瘤的高危人群中 发生肿瘤的可能性远远高于一般人群。W肺癌为例，多年吸烟的男性老年人是高危人群；再 如肝癌，乙型肝炎病毒感染者为高危人群。 阳273] 样本保存:抽取5血静脉血，凝固后（常溫下