Cd146作为分子标记物在诊断、分期或预后神经精神性狼疮中的用图
【技术领域】
[0001]本发明涉及神经精神性狼疮分子标记物的领域。特别地，本发明涉及⑶146作为分子标记物在诊断、分期或预后神经精神性狼疮中的用途。
【背景技术】
[0002]系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus, SLE)是一种由自身抗体介导的多系统累及的自身免疫性疾病。而神经精神性狼疮(Neuropsychiatric systemic lupuserythematosus, NPSLE,)是SLE常见的严重并发症，可累及中枢及周围神经系统,表现为多种不同的神经病学及精神病学综合征，是SLE重要死因之一。目前NPSLE的发病机制尚不肯定，包括血管病、自身免疫性抗体、炎症介质等，参见Boumpas DT, Austin HA, 3rd, FesslerBJj Balow JEj Klippel JHj Lockshin MD:Systemic lupus erythematosus: emergingconcepts.Par11: Renal, neuropsychiatric,card1vascular,pulmonary，andhematologic disease.Annals of internal medicinel995，122(12):940-950。
[0003]由于NPSLE临床表现的多样性，并且缺乏统一的诊断标准等多种原因，各项研究中报道的NPSLE的患病率并不一致，近5年报道的NPSLE的患病率为14-39 %，参见 Zhou HQj Zhang FCj Tian XPj Leng XMj Lu JJj Zhao Y，Tang FLj Zhang Xj ZengXFj Zhang ZL et al:Clinical features and outcome of neuropsychiatric lupus inChinese: analysis of240hospitalized patients.Lupus2008，17(2):93-99 ;BuItinkIE，Turkstra F，Dijkmans BA, Voskuyl AE:High prevalence of unemployment inpatients with systemic lupus erythematosus:associat1n with organ damageand health-related quality of life.The Journal of rheumatology2008,35 (6):1053-1057 ；Hanly JGj Su Lj Farewell Vj McCurdy G，Fougere L，Thompson K:Prospectivestudy of neuropsychiatric events in systemic lupus erythematosus.The Journalof rheumatology2009, 36 (7):1449-1459 ；Briani C，Lucchetta M，Ghirardel1A，Toffanin E，Zampieri S，Ruggero S，Scarlato M，Quattrini A，.BassiN，Ermani M et al:Neurolupus is associated with anti—ribosomal P proteinantibodies:an.incept1n cohort study.Journal of autoimmunity2009, 32(2):79-84 ；Gonzalez LA,Pons-Estel GJj Zhang Jj Vila LMj Reveille JD，Alarcon GS，groupLs:Time to neuropsychiatric damage occurrence in LUMINA(LXVI):a mult1-ethniclupus cohort.Lupus2009，18(9):822_830。5 年和 10 年生存率分别为 63.2%和 91.4%,参见 Mak A，Cheung MW，Chiew HJj Liu Y，Ho RC.Global trend of survival anddamage of systemic lupus erythematosus:Meta-analysis and meta-regress1n ofobservat1nal studies froml950s to2000s.Semin Arthritis Rheum2012 ;41:830 - 9。
[0004]因此，NPSLE的早期预测、诊断和病情评估对SLE患者的治疗和预后有重要意义。然而，目前NPSLE的诊断依赖于临床诊断，即ACR的19类临床分类，参见The AmericanCollege of Rheumatology nomenclature and case definit1ns for neuropsychiatriclupus syndromes.Arthritis and rheumatisml999, 42 (4): 599-608。尚无具有诊断价值的检查方法可应用于NPSLE的诊断，亦无明确的指标用于NPSLE的早期预测。血清学分析、心理测试、脑脊液检查、影像学检查、脑电图检查等方式有助于诊断的建立。
[0005]需要开发一种特异性地诊断神经精神狼疮的生物标记物，以有助于除临床诊断之外的神经精神狼疮的分子标记物的诊断。
[0006]⑶146是一种细胞粘附分子，⑶146是I型膜蛋白，属于免疫球蛋白超家族。
【发明内容】
[0007]本发明人首次提出脑脊液中可溶性⑶146 (soluble⑶146，s⑶146)是神经精神狼疮诊断、分期和预后的生物标志物。实验证明，与非NPSLE患者相比，可溶性⑶146在NPSLE患者脑脊液中的分泌水平明显升高，而s⑶146在NPSLE血清中变化则不明显；NPSLE活动期脑脊液中s⑶146水平明显升高，经过治疗后，缓解期NPSLE脑脊液s⑶146水平显著降低；NPSLE脑脊液s⑶146水平与评价疾病活动的指标如，血沉、C3、C4有很好的相关性。这些结果提示s⑶146可以作为一个诊断、分期和/或预后NPSLE的生物标志物，对今后该类疾病的诊断和疾病活动度的评价有重要意义。
[0008]一方面，本发明提供了 CD146作为分子标记物在制备用于诊断、分期和/或预后神经精神性狼疮的试剂中的用途。
[0009]另一方面，本发明提供了一种或多种选择性结合至CD146蛋白质的抗体或其抗原结合片段在制备用于诊断、分期和/或预后神经精神性狼疮的试剂中的用途。
[0010]根据本发明，“抗体”包括基本上完整的抗体分子以及嵌合抗体、人源化抗体、人抗体(其中至少一个氨基酸相对于天然存在的人抗体是突变的)、单链抗体、双特异性抗体、抗体重链、抗体轻链、抗体重链和/或轻链的同二聚体和异二聚体，以及其抗原结合片段和衍生物。
[0011]“抗原结合片段”意思是能够结合至CD146蛋白质的抗体的功能性片段。
[0012]优选地,抗原结合片段选自Fv片段(例如单链Fv和二硫键合的Fv)、Fab样片段(例如Fab片段、Fab，片段和F(ab) 2片段)、单可变结构域(例如VH和VL结构域)和结构域抗体(dAb,包括单和双的格式[即dAb-连接子_dAb])。
[0013]使用抗体片段而不是整个抗体有多个优点。片段的较小尺寸可以引起改善的药理学性质，如对固体组织更好的穿透性。另外，抗原结合片段如Fab、Fv、ScFv和dAb抗体片段可以在大肠杆菌(E.coli)中表达并从大肠杆菌中分泌，因此允许促进大量所述片段的产生。
[0014]进一步地，根据本发明的上述用途，其包括步骤:
[0015]c)提供来自个体的脑脊液样品；
[0016]d)确定来自步骤a)的脑脊液样品中可溶性CD146的量；
[0017]其中，可溶性⑶146量的升高是神经精神性狼疮的指征。
[0018]特别地,在所述步骤b)中的优选方法包括Western印迹、North-Western印迹、免疫吸附测定法(ELISA)、抗体微阵列、组织微阵列(TM