一种双水相体系及其分离番茄酱中三聚氰胺的应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于食品科学和分析化学技术领域，具体设及一种双水相体系及其分离番 茄酱中Ξ聚氯胺的应用。
【背景技术】
[0002] Ξ聚氯胺，俗称密胺、蛋白精，是一种用途广泛的有机化工中间产品，是生产Ξ聚 氯胺甲醒树脂的原料，广泛用于塑料及涂料工业，也可作织物防權、防缩处理剂等。虽然Ξ 聚氯胺是一种重要的工业原料，但其对人和动物体有害，不允许用于食品加工或食品添加 剂。长期食用含有Ξ聚氯胺的食品会导致肾结石，甚至会致癌致死;Ξ聚氯胺还有协同效 应，与Ξ聚氯酸一起摄入会引起泌尿系统结实和肾脏毒性作用，毒性更高。因此Ξ聚氯胺严 重威胁着人类及动物的健康和后代繁殖。
[0003] 由于Ξ聚氯胺对人和动物的危害，高效准确的检测方法显得尤为重要，为此我国 加强了对相关检测工作的重视，规定除婴幼儿奶粉外，Ξ聚氯胺含量在2.5mg/kgW下的食 物对人体是安全的。现阶段对Ξ聚氯胺的检测方法主要有液相色谱法、拉曼光谱法、胶体金 试剂卡法和酶联免疫层析法等方法。然而上述方法存在诸多问题，分析方法灵敏度低，检测 困难，操作繁琐，还有一些检测方法所需仪器价格昂贵、难W普及等困难。因此高效灵敏将 是Ξ聚氯胺检测方法的趋势。
[0004] 离子液体双水相体系作为近几年来出现的一种新型绿色分离体系，具有分相时间 短、萃取过程不易乳化，因而受到越来越多的关注。离子液体具有不挥发、性质稳定的特点， 由于其独特的理化性能，被认为是传统萃取工艺中挥发性有机溶剂的理想绿色代替品。但 是目前关于离子液体双水相体系用于萃取检测食品中Ξ聚氯胺的资料还很缺乏，因此对该 类体系的研究探讨具有理论和现实意义。
【发明内容】
[000引针对现有的Ξ聚氯胺的测定，其检测方法存在的灵敏度低，成本高，操作繁琐及普 及困难等缺点，本发明的目的在于一种双水相体系及其分离番茄酱中Ξ聚氯胺的应用，该 方法可W提高番茄酱中Ξ聚氯胺测定的准确性，操作简便，不使用大型仪器，减少使用传统 有机挥发性溶剂W避免带来二次污染的特点。
[0006 ]为了实现上述任务，本发明采取如下的技术解决方案：
[0007] -种双水相体系，包括1-下基-4-甲基化晚四氣棚酸盐离子液体、憐酸二氨钢和 水。
[0008] 具体的，按质量百分比计，双水相体系中1-下基-4-甲基化晚四氣棚酸盐离子液体 的质量分数为35%~40%，憐酸二氨钢的质量分数为26%，余量为水，Ξ者质量百分比之和 为 100%。
[0009] 优选的，按质量百分比计，双水相体系中1-下基-4-甲基化晚四氣棚酸盐离子液体 的质量分数为35 %，憐酸二氨钢的质量分数为26 %，余量为水，Ξ者质量百分比之和为 100%。
[0010] 所述的双水相体系分离番茄酱中Ξ聚氯胺的应用。
[0011] 分离番茄酱中Ξ聚氯胺包括：
[0012] 步骤一:取待富集番茄酱进行醇提，取醇提后的上清液即得到待富集溶液；
[0013] 步骤二:按质量比为5:1，将所述的双水相体系与待步骤一得到的待富集溶液混合 进行萃取得到Ξ聚氯胺。
[0014] 具体的，萃取的溫度为30~40°C。
[001引具体的，萃取的抑值为4.2~4.4。
[0016] 本发明的优点如下：
[0017] (1)本发明方法集合了离子液体和双水相的优点，萃取时间短、操作简便、检测灵 敏，克服了聚合物双水相易乳化，分相时间长等缺点；
[0018] (2)番茄中所特有的番茄红素是一种异戊二締类化合物，稳定性较差，可与Ξ聚氯 胺形成复合物，该复合物与1-下基-4-甲基化晚四氣棚酸盐易发生Diels-Alder反应，从而 提高了Ξ聚氯胺的萃取率。该方法对番茄酱中Ξ聚氯胺的萃取率可达98.6%。
[0019] (3)番茄提供的酸性环境缩短了萃取检测的时间，操作更便捷，为高效检测食品中 的Ξ聚氯胺提供了 一种新途径。
【附图说明】
[0020] 图1是离子液体浓度与Ξ聚氯胺萃取率关系曲线图；
[0021] 图2是不同pH值对Ξ聚氯胺的萃取率的影响关系曲线图；
[0022] 图3是不同溫度对Ξ聚氯胺的萃取率的影响关系曲线图；
[0023] W下结合说明书附图和【具体实施方式】对本发明做具体说明。
【具体实施方式】
[0024] 本发明所述的1-下基-4-甲基化晚四氣棚酸盐离子液体的纯度为0.99,购于上海 成捷化学有限公司。
[0025] 灭蛹胺是一种杀虫剂，被用于防止番茄上的潜蛹，其代谢产物为Ξ聚氯胺。番茄中 所特有的番茄红素是一种异戊二締类化合物，稳定性较差，可与Ξ聚氯胺形成复合物，该复 合物与1-下基-4-甲基化晚四氣棚酸盐易发生Diels-Alder反应，同时番茄酱的酸性环境更 提高了反应速率，从而在提高了Ξ聚氯胺的萃取率的基础上更缩短了反应时间。基于此，本 专利所设及双水相体系可达到对于番茄酱中Ξ聚氯胺的高效分离。
[0026] 在对现有Ξ聚氯胺的研究基础之上，本发明通过一系列的实验，采用1-下基-4-甲 基化晚四氣棚酸盐与憐酸二氨钢形成的双水相体系作为萃取溶剂，萃取番茄酱中残留灭蛹 胺代谢产物Ξ聚氯胺。为了提高萃取率，本发明设计了一系列实验得到优化的工艺参数。
[0027] 样品前处理:取5g番茄酱置于20mL的容量瓶中，用甲醇-水(体积比1:1)溶液定容 混匀，将上述混匀后的混合物转移至离屯、管中W2500r/minW上的速率满旋混匀Imin，超声 波提取30min(每5min摇动一次离屯、管），再WSOOOr/min的速率离屯、lOmin，上清液过滤后得 到待测Ξ聚氯胺的溶液。同样，其他待测样品也用上述方法进行处理，得到待测液。
[0028]1、取3.5gl-下基-4-甲基化晚四氣棚酸盐，1-乙基-3-甲基咪挫四氣棚酸盐，聚乙 締比咯烧酬k30,丙締酷胺，乙醇分别置于离屯、管中，加入2.6g憐酸二氨钢，3.9g蒸馈水，充 分混匀，再加入2g待测Ξ聚氯胺溶液。分别于35°C、pH4.2下恒溫震荡30min，分相后静置萃 取2地，待分相清晰后，测定水相中剩余Ξ聚氯胺的浓度，由萃取前后水相中Ξ聚氯胺的含 量计算Ξ聚氯胺的萃取率。结果如表1所示。
[0029] 表 1
[0030]
[0031] ~表1是不同种类有机物与憐酸二氨钢形成双水相体系对Ξ聚氯胺的萃取率，从表1 可W看出，其他离子液体与有机物对Ξ聚氯胺的萃取率较低，运是由于番茄中所特有的番 茄红素是一种异戊二締类化合物，稳定性较差，可与Ξ聚氯胺形成复合物，1-下基-4-甲基 化晚四氣棚酸盐与该复合物易发生Diels-Alder反应，提高了Ξ聚氯胺的萃取率，其余双水 相体系并没有上述特征，故而萃取率低。
[0032] 2.取2.6g憐酸二氨钢，硫酸锭，乙酸钟，硝酸领，邻苯二甲酸氨钟分别置于离屯、管 中，加入3.5gl-下基-4-甲基化晚四氣棚酸盐，3.9g蒸馈水，充分混匀，再加入2g待测Ξ聚氯 胺溶液，于35°C和pH4.2下恒溫震荡30min，分相后静置萃取24h，待分相清晰后，测定水相中 剩余Ξ聚氯胺的浓度，由萃取前后水相中Ξ聚氯胺的含量计算Ξ聚氯胺的萃取率。结果如 表2所示。
[0033] 表 2
[0034]
[0036] ~表2是不同种类盐与1-下基-4-甲基化晚四氣棚酸盐所形成双水相体系对Ξ聚氯 胺的萃取率。从表2可W看出，憐酸二氨钢所形成的双水相体系对Ξ聚氯胺的萃取率最高， 硫酸锭形成的双水相体系分相较憐酸二氨钢差，所W萃取率比较低，加入乙酸钟，邻苯二甲 酸氨钟双水相体系分相差，萃取率低，而硝酸领不分相，萃取率为0。
[0037] 3.取四份3.5gl-下基-4-甲基化晚四氣棚酸盐置于离屯、管中，加入2.6g的憐酸二 氨钢和3.9g蒸馈水，充分混匀，再分别加入2g待测Ξ聚氯胺溶液(番茄酱制备），经处理的黄 豆酱待测液，牛奶和咖啡(液体)于35°C和抑4.2下恒溫震荡30min，分相后静置萃取24h，待 分相清晰后，测定水相中剩余Ξ聚氯胺的浓度，由萃取前后水相中Ξ聚氯胺的含量计算Ξ 聚氯胺的萃取率。结果如表3所示。
[003引 表3
[0039]
[0040] ~表3为双水相体系对不同来源Ξ聚氯胺的萃取率。从表3可W看出，经处理的黄豆I 酱待测液，牛奶和咖啡中Ξ聚氯胺萃取率分别为78.4%，72.1 %，69.5 %，对番茄酱中Ξ聚 氯胺的萃取率为98.6%。原因是番茄中所特有的番茄红素是一种异戊二締类化合物，稳定 性较差，可与Ξ聚氯胺形成复合物，1-下基-4-甲基化晚四氣棚酸盐与该复合物易发生 Diels-Alder反应，提高了Ξ聚氯胺的萃取率，而其余来源的Ξ聚氯胺中并无番茄红素，所 W萃取率比较低。
[0041] 4.取2.0邑，2.5邑，3.0邑，3.5邑，4.0邑，4.5邑，5.0邑和5.5邑1-下基-4-甲基化晚四