一种人血清中Lp-PLA2快速定量检测试纸条的制作方法

文档序号:10421439阅读:454来源:国知局
一种人血清中Lp-PLA2快速定量检测试纸条的制作方法
【技术领域】
[0001] 本实用新型属于免疫层析检测技术领域,具体设及一种人血清中LP-PLA2快速定 量检测试纸条。
【背景技术】
[0002] 流行病学研究和临床前瞻性研究发现,发生屯、血管事件者脂蛋白相关憐脂酶A2 (LP-PLA2)浓度或活性显著高于对照组。血浆LP-PLA2浓度或活性升高是屯、血管事件的独立 危险因子,LP-PLA2浓度、活性与屯、血管疾病风险正相关。
[0003] W0C0PS是一项评估普伐他汀在预防冠脉事件中的价值的试验,在中年男性苏格兰 人中观察Lp-PLA2、hs-CRP、纤维蛋白原、白细胞计数等炎性反应标志物是否与冠脉事件有 关。纳入了 580例曾发生过冠状动脉事件(非致死性屯、肌梗死、屯、源性死亡或冠状动脉血运 重建事件)的患者,并从相同人群中纳入了未发生过冠状动脉事件者共1160例,再根据年龄 与吸烟史分2组作为对照组。研究结果显示,Lp-化A2、C反应蛋白(C-reactiveprotein, CRP)、纤维蛋白原和白细胞计数的水平可W作为冠状动脉事件强有力的预测因子,每个变 量组中最高五分位数者与最低五分位数者相比,冠脉事件危险约增加一倍。但在包括年龄、 收缩压、脂蛋白水平和炎性反应标志物在内的多变量模型分析中,CRP、纤维蛋白原和白细 胞计数增高与冠脉事件无明显相关性,而LP-PLA2的最高五分位数者与最低五分位数者相 比,屯、血管事件危险增加约2倍(RR= 1.49,95 % CI: 0.95-2.33)。研究认为LP-PLA2是一个强 有力的、肯定的冠脉事件预测因子,且独立于其他炎性反应因子。
[0004] ARI拥开究的结果显示,在为期6年的前瞻性队列研究中纳入12819名美国不同社区 的健康中年人(包括男性和女性,白人和黑人),结果发生冠屯、病事件的608例患者中Lp- PLA2、hs-CRP水平高于未发生冠屯、病事件的患者。在调整了年龄、性别与种族后,LP-PLA2、 hs-CRP最高Ξ分位数者与最低Ξ分位数者相比冠屯、病事件风险显著增加化R= 1.78,95% CI: 1.33-2.38)。尤其是当LDkC<130mg/dl时,位于LP-PLA2最高Ξ分位数者与最低Ξ分位 数者相比冠屯、病事件风险显著增力日化R=1.99,95%CI :1.17-3.38),在调整了包括hs-CRP 的模型后相比,冠屯、病事件风险仍有显著增加化R = 2.08,95%CI :1.20-3.62)。研究表明 LP-PLA2与CRP在鉴别低密度脂蛋白胆固醇不高的高危冠屯、病患者中可能具有互补性。
[0005] Garza等的调查结果表明,LP-PLA2与屯、血管疾病显著相关,其危险分层在调整传 统屯、血管危险因素后未受明显影响。并认为测量LP-PLA2可用于指导屯、血管危险分层。此 夕h为使屯、血管事件发生的危险程度降低,LP-PLA2可能可作为潜在的治疗祀点。
[0006] 试验分析LP-PLA2显示出了在中高危人群作为附加于传统的CV风险评估是有用 的。Lp-化A2增高的人们,运些将从强化降脂治疗上受益的人应适当重新划分为更高的风 险,运是基于大量的证据-不论高危患者的低密度脂蛋白胆固醇的基线水平如何,他们都能 从低密度脂蛋白胆固醇的降低中受益。
[0007] 目前认为,将LP-PLA2作为治疗目标是一种新的、非降脂策略的AS治疗方法。他汀 类、烟酸、非诺贝特、ω-3脂肪酸和依替米贝的降脂治疗可W降低LP-PLA2的水平。Macphee 等在家兔的实验中发现,LP-PLA2抑制剂SB-244323能减少动脉粥样硬化斑的形成。而最近 被研究较多的LP-PLA2抑制剂是daraplad化。相关研究认为LP-PLA2抑制剂daraplad化阻止 了坏死中屯、的扩大,是斑块易损性的一个主要决定性因素。Wilensky化的研究亦显示Lp- PLA2抑制剂daraplad化能改善冠状动脉粥样硬化病变程度。因此,LP-PLA2可作为治疗ACS 的新祀点,为临床上治疗ACS提供早期依据。
[000引基于上述原因,对LP-PLA2的检测显得尤为关键,因此,亟需一种能够快速定量检 测人血清中LP-PLA2含量的检测工具。 【实用新型内容】
[0009] 本实用新型的目的在于克服现有技术的不足之处,提供了一种人血清中LP-PLA2 快速定量检测试纸条。
[0010] 本实用新型解决其技术问题所采用的技术方案是:
[0011] 一种人血清中LP-PLA2定量检测试纸条,包括背衬底板,该背衬底板上设置有硝酸 纤维素膜、样品结合垫和吸水膜,该样品结合垫和吸水膜分别叠压在硝酸纤维素膜的两端 上;该样品结合垫上包被有标记物标记的LP-PLA2抗体,所述标记物为胶体金、有色微球、巧 光乳胶微球、时间分辨巧光乳胶纳米微球、量子点中的一种;该硝酸纤维素膜上设有检测线 和质控线,该检测线包被有另一个表位的LP-PLA2抗体,该质控线包被有羊抗鼠 IgG。
[0012] -实施例中:所述巧光乳胶微球的巧光物质为直接巧光物质异硫氯酸巧光素、四 乙基罗丹明、四甲基异硫氯酸罗丹明、巧光素 C巧中的一种。
[0013] -实施例中:所述时间分辨巧光乳胶纳米微球为铜系元素巧光乳胶纳米微球。
[0014] -实施例中:所述铜系元素为館,铺,衫或铺中的一种。
[0015] -实施例中:所述样品结合垫为玻璃纤维素膜或聚醋膜。
[0016] -实施例中:所述样品结合垫为玻璃纤维素膜或聚醋膜经表面活性剂缓冲液浸泡 处理后干燥而得。
[0017] 一实施例中:所述LP-PLA2抗体为单克隆抗体或多克隆抗体;所述另一个表位的 LP-PLA2抗体为单克隆抗体或多克隆抗体。
[0018] -实施例中:所述试纸条外还包衷有一壳体。
[0019] 本技术方案与【背景技术】相比,它具有如下优点:
[0020] 1.传统的检测试纸条分别设有样品垫和结合垫,血清/血浆等样品首先与样品垫 接触,样品垫对样品进行预处理,去除样品中杂质颗粒,调节样品液抑值或粘度等,减缓样 品渗透速度,有利于样品的均匀分布;经样品垫预处理过后的均匀的样品再流动至结合垫 上与标记抗体发生结合,才能够保证反应的准确性,如果不经预处理,样品在结合垫上的结 合量无法把握,且结合稳定性也差;而本实用新型采用一个样品结合垫代替传统的样品垫 和结合垫,该样品结合垫上准确而均匀地分布有标记抗体,既能保证样品得到预处理,又能 保证样品结合一定量的标记抗体,保证了反应的准确性,经检测,灵敏度和特异性良好;同 时,也使得试纸条结构和制备过程得到简化。
[0021] 2.本实用新型的人血清中Lp-PLA2定量检测试纸条,包被有标记物标记的Lp-PLA2 抗体,所述标记物为胶体金、有色微球、巧光乳胶微球、时间分辨巧光乳胶纳米微球、量子点 中的一种;上述标记物为巧光物质标记或有色物质标记,具有反应迅速、灵敏度高、特异性 强、易于辨别、稳定性好等特点,可广泛应用于LP-PLA2的临床免疫检验和科学研究中。
[0022] 3.本实用新型的试纸条制作方便,可批量生产;体积小,便于携带。
【附图说明】
[0023] 下面结合附图和实施例对本实用新型作进一步说明。
[0024] 图1为本实用新型的人血清中LP-PLA2定量检测试纸条结构示意图。
[0025] 附图标记:样品结合垫1;标记物标记的LP-PLA2抗体2;硝酸纤维素膜3;检测线4; 质控线5;吸水膜6;背衬底板7。
【具体实施方式】
[0026] 下面通过实施例具体说明本实用新型的内容:
[0027] 请查阅图1,一种人血清中LP-PLA2定量检测试纸条,包括背衬底板7,该背衬底板7 上设置有硝酸纤维素膜3、样品结合垫1和吸水膜6,该样品结合垫1和吸水膜6分别叠压在硝 酸纤维素膜3的两端上;该样品结合垫1上包被有标记物标记的LP-PLA2抗体2,所述标记物 为胶体金、有色微球、巧光乳胶微球、时间分辨巧光乳胶纳米微球或量子点中的一种;该硝 酸纤维素膜3上设有检测线4(Τ线)和质控线5(C线),检测线4(Τ线)包被有另一个表位的Lp- PLA2抗体,质控线5(C线)包被有羊抗鼠 IgG。
[00%]上述试纸条可W通过W下制备方法制备:<
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