一种升麻总皂苷的制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种天然药物升麻中有效成分的制备方法，具体涉及一种升麻总皂巧 的分离纯化方法。
【背景技术】
[0002] 升麻为毛嘗科植物大H叶升麻Cimici化ga heraclei化Iia. Kom.、兴安升麻 Cimicifug曰d曰huric曰(Turcz.). M曰xim.或升麻Cimicifug曰foetid曰L的干燥根茎，味辛、 微甘，微寒。归肺、脾、胃、大肠经。具有发表透疹，清热解毒，升举阳气功效。用于风热头 痛，齿痛，口疮，咽喉肿痛，麻疹不透，阳毒发斑，脱肛，子宫脱垂。研究表明兴安升麻地上部 分中总皂巧的药理作用明显，可用于治疗妇女更年期综合症和骨质疏松，并且具有抗病毒、 抗炎、抗氧化、降血脂和记忆改善等作用。
[0003] 微乳相萃取技术，是利用溶液体系微相结构和特性的过程调控而发展起来的化工 分离新技术，通常包括胶团萃取、反胶团萃取、双水相萃取及H相萃取等与微乳相结构有关 的萃取、分离新技术的统称。实际上，国内外从事与微乳相有关的研究工作很多，但由于微 乳相体系繁多，组成复杂，难于进行系统的研究。与传统的萃取技术相比，微乳相萃取技术 发展尚不完善，至今仍没有大规模工业化应用的实例。
[0004] 传统的升麻总皂巧制备方法通常需要经过有机溶媒提取、脱脂、萃取、大孔树脂分 离纯化等步骤，其中分离纯化步骤用时较长，需耗费大量有机溶剂，而且生产完毕后的废渣 处理过程存在很高的爆炸风险。
【发明内容】
[0005] 本发明提供一种利用微乳相界面萃取技术分离纯化制备升麻总皂巧的方法，达到 了利用微乳萃取技术实现工业化大生产的目的，并且节约时间，减少有机溶剂的使用，且利 用该方法得到的升麻总皂巧在临床使用上药效要优于传统分离纯化方法得到的升麻总皂 巧。
[0006] 本发明提供的一种升麻总皂巧的分离纯化方法，其特征为；（1)制备微乳：水 40-55%、己酸己醋23-39%、十二烷基硫酸钢或泊洛沙姆0. 04-0. 5 %混合揽拌制成粗乳 液，再加入无水己醇19-25%制成微乳；（2)将脱脂后的升麻粗提物溶于微乳中，其中升麻 粗提物与微乳的比例为1 :30-45 ; (3)向步骤（2)所得的微乳体系中加入氯化钢和碳酸钢 或碳酸氨钢，静置分层，其中，升麻粗提物与氯化钢比例为1:0. 01-0. 03,升麻粗提物与碳 酸钢或碳酸氨钢的比例为1:0. 01-0. 03 ; (4)弃去水相，油相回收溶剂，干燥，即得升麻总皂 巧。
[0007] 升麻粗提物可W采用本领域技术人员常用的提取方法，优选采用如下提取方法： 将升麻粉碎成粗颗粒，用60-90%己醇加热回流提取H次，过滤，合并滤液，回收溶剂，干燥， 得到粗提物；将粗提物分散到正己焼中脱脂3次，过滤，回收正己焼。
[0008] 其中，每次提取用己醇重量为升麻重量的5-10倍，每次用正己焼与粗提物的重量 比为4-7:1。
[0009] 本发明提供的方法，其重点和难点在于不仅要成功制备微乳，用微乳萃取粗提物， 更要通过有效手段破乳，实现水相与油相的完全分离，而后将油相蒸干，才能得到溶解在油 相中的有效成分，实现升麻总皂巧的分离纯化。由于需要蒸干溶剂，故油相、助乳化剂等含 量较高的成分必须为沸点较低具有挥发性的物质。常用的乳化剂及破乳剂一般不具有挥发 性，因此会导致送些溶剂大量残留在升麻总皂巧中，W致产品质量不合格，无法满足工业化 大生产的需要。由于受W上各种因素制约，常用的微乳体系无法满足本发明要求，因此发明 人经过了大量的实验研究，最终确定出本发明提供的技术方案。
[0010] 1、油相筛选
[0011] 微乳制备方法如下；将0. 3g十二烷基硫酸钢投入到50ml水中，加入50ml油相，揽 拌形成粗乳液，向粗乳液中滴加无水己醇至体系变澄清形成微乳，用微乳萃取升麻浸膏，用 碳酸钢破乳，分层，收集油相并挥干溶剂，得到成品。其中，油相分别选取己酸己醋、正了醇、 环己焼、氯仿、二氯甲焼和石油離中的一种，利用不同油相形成的微乳体系分离纯化升麻总 皂巧得到的结果，见表1;
[0012] 表1不同油相形成微乳分离纯化的升麻总皂巧
[0014] 根据表1结果可知，通过选择己酸己醋作为油相分离纯化升麻总皂巧，升麻总皂 巧的各项指标满足质量标准要求；选择正了醇、氯仿或二氯甲焼作为油相进行分离纯化时， 不但需要较多助乳化剂进行破乳，并且含量、外观不合格，不能满足质量标准要求，环己焼 或石油離作为油相无法形成微乳体系。
[0015] 2、乳化剂筛选
[0016] 因最终目标产物为固体，所W使用固体类的表面活性剂作为乳化剂。筛选十二焼 基硫酸钢和泊洛沙姆两种固体表面活性剂，经实验发现二者效果相当，因此确定乳化剂为 十二烷基硫酸钢或泊洛沙姆中的一种。
[0017] 3、助乳化剂筛选
[0018] 筛选了甲醇、无水己醇、异丙醇H种易挥发的助乳化剂，微乳制备方法如下：将 0. 3g十二烷基硫酸钢投入到50ml水中，加入50ml己酸己醋，揽拌形成粗乳液，向粗乳液中 滴加助乳化剂至体系变澄清形成微乳，用微乳萃取升麻浸膏，用碳酸钢破乳，分层，收集油 相并挥干溶剂，得到成品。利用不同的助乳化剂形成的微乳体系分离纯化升麻总皂巧得到 的结果，见表2 :
[0019] 表2不同助乳化剂形成微乳分离纯化的升麻总皂巧
[0021] 由表2结果表明；无水己醇作为助乳化剂制备的微乳，可有效分离升麻总皂巧，其 余两种效果不佳，所得升麻总皂巧的含量均不符合要求。
[00过 4、破乳剂筛选
[0023] 筛选倭盐、钢盐、巧盐、镇盐等多种碱性无机盐后，最终发现钢盐可W在用量较少 的情况实现破乳，其余的盐类需加入较大量才能实现，因所筛选的无机盐不具有挥发性，需 要严格控制用量，W免其大量残留在成品中，因此选择钢盐；同时由于在制备升麻总皂巧的 过程中会有酸性杂质产生，选择碱性无机盐作为破乳剂和除酸剂，破乳同时除去酸性杂质。 选择不同破乳剂（破乳剂用量均为粗提物的3%)制备微乳分离纯化的升麻总皂巧，得到的 结果见表3 :
[0024] 表3不同破乳剂制备微乳分离纯化的升麻总皂巧：
[0027] 根据表3结果可知；碳酸钢和碳酸氨钢可W达到破乳效果，其他立种虽然可W分 层，但水油两层难W分清界限致使分离操作困难。
[0028] 碳酸钢和碳酸氨钢虽然可W作为破乳剂使用，但由于其分层慢，带来一定的操作 困难。发明人经过大量的实验研究发现，在助乳化剂中添加3%粗提物重量的氯化钢，结果 发现分离速度比不加氯化钢提高2倍W上。最终确定破乳剂选择两种组分，其中组分一为 氯化钢，组分二为碳酸钢或碳酸氨钢中的一种。
[0029] 发明人经过大量实验研究，最终确定了微乳体系各组分的比例范围为水相 40% -55%，油相23% -39%，乳化剂0.04% -0.5%，助乳化剂19% -25%。破乳剂组分 一与粗提物的比例为0.0 l -0. 03:1，组分二与粗提物的比例为0.0 l -0. 03:1。W上比例不 但能成功制备微乳，并能有效分离纯化升麻总皂巧。
[0030] 通过本发明提供的微乳体系分离纯化的升麻总皂巧，不但可W节约分离纯化时 间，减少有机溶剂使用及残留，利用微乳萃取技术实现工业化大生产目的，且利用该方法得 到的升麻总皂巧，在药效上要优于传统分离纯化方法得到的升麻总皂巧。
【附图说明】
[0031] 图1试验例1中升麻总皂巧的液相色谱图，其中上图为实施例7方法制备的升麻 总皂巧，下图为实施例5方法制备的升麻总皂巧。
【具体实施方式】
[0032] 实施例1
[0033] 将升麻粉碎成粗颗粒，称取250g，用70%己醇7(TC加热回流提取H次，每次用己 醇2000g，过滤，合并滤液，回收己醇，6(TC真空干燥，得到粗提物25. 7g。将粗提物分散到正 己焼中脱脂3次，每次用正己焼128. 5g，过滤，回收正己焼。将水424g、己酸己醋177. 4邑、 十二烷基硫酸钢0. 32g混合，揽拌，制成粗乳液，再加入无水己醇169. 28g制成微乳。将脱 脂后的粗提物溶于微乳中。溶解完毕后，向微乳体系中加入0. 4g氯化钢和0. 4g碳酸钢破 乳，静置分层。弃去水层，有机层减压浓缩回收溶剂，6(TC真空干燥，得到升麻总皂巧8. 24邑， 收率32. 1 %，经HPLC检测，含量为58. 6 %。
[0034] 实施例2
[0035] 将升麻粉碎成粗颗粒，称取250g，用75%己醇8(TC加热回流提取H次，每次用己 醇2500g，过滤，合并滤液，回收己醇，6(TC真空干燥，得到粗提物27. 9g。将粗提物分散到正 己焼中脱脂3次，每次用正己焼111. 6g，过滤，回收正己焼。将水590g、己酸己醋279g、十二 烷基硫酸