1.一种用于提高孵化率的脱壳卤虫卵的制备方法,其特征在于具体步骤为:
(1)称取100~150g未成熟的山楂,经人工去籽后,用去离子水清洗3~5次,将洗净的山楂和500~600mL去离子水一同置于榨汁机中进行榨汁,得到山楂汁;
(2)称取100~200g卤虫卵加入到烧杯中,再加入300~400mL质量分数为8%氯化钠溶液和200~300mL上述山楂汁,曝气处理3~4h,使卤虫卵充分吸水膨胀,再用纱布过滤,收集卤虫卵,得到预处理卤虫卵;
(3)取300~400g新鲜猪胆汁和2~4g磷脂酶C加入到盛有300~400mL去离子水的烧杯中,搅拌混合3~5min后,再加入上述预处理卤虫卵,并通入空气,控制气流量为50~70m3/(m2·min),浸泡处理30~40min,使卤虫卵壳中的磷脂和胆固醇分解,再用纱布过滤,收集卤虫卵,备用;
(4)按重量份数计,称取10~20份橄榄油,20~30份蛋白胨,8~12份酵母粉,0.3~0.5份磷酸氢二钾,0.1~0.3份硫酸镁和600~700份去离子水,加入到培养皿中,搅拌混合3~5min后,置于灭菌箱中,在90~100℃下灭菌5~10min,得到发酵培养基;
(5)将上述发酵培养基转移至发酵罐中,再按6~8%的接种量将皱褶假丝酵母菌接种到发酵罐中,在25~30℃下发酵2~3天后,再加入步骤(3)备用的卤虫卵和0.3~0.5g木瓜蛋白酶,并通入空气,好氧发酵3~4h,发酵结束,收集发酵罐内的物料,并用纱布过滤,收集滤渣,并用去离子水洗涤3~5次后,再用去离子水洗去脱壳卵表面的酶和菌,得到脱壳卤虫卵。