一种苤蓝组织培养快速繁殖方法与流程

文档序号:12598930阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种苤蓝组织培养快速繁殖方法,其特征在于其包括以下步骤:

1)采用苤蓝球茎顶端簇生叶的基部芽丛和球茎侧叶基部腋芽作为外植体,留取部分膨大块茎,去除叶片后清洗;

2)试材移至超净工作台,将清洗后的苤蓝组织小块消毒;

3)将经过消毒的带顶芽或腋芽的苤蓝茎块切成组织小块作为外植体,接种于培养基中进行愈伤诱导;

4)愈伤形成后,移入增殖培养基中培养,使诱导芽形成,丛芽增殖;

5)将步骤4)得到的诱导芽和丛芽进行生根培养;

6)当幼苗的根系长出3~4根、长度为2~3cm,幼苗形体已显健壮时,将幼苗取出,在清水中洗净附着在根上的培养基,将洗净的幼苗排好,用清水喷湿,然后分别以珍珠岩和腐殖土为基质进行炼苗后,将幼苗移栽定植即可。

2.如权利要求1所述一种苤蓝组织培养快速繁殖方法,其特征在于在步骤1)中,所述清洗是先用水冲洗,再用50%洗洁精进行超声清洗,最后用水将洗洁精洗净。

3.如权利要求1所述一种苤蓝组织培养快速繁殖方法,其特征在于在步骤2)中,所述消毒的具体方法为:将清洗后的苤蓝组织小块浸于75%乙醇消毒30s,无菌水冲洗3遍,沥干水分,再浸于加2滴吐温80的0.1%升汞中消毒5~10min,取出无菌水冲洗3~5遍,再沥干水分。

4.如权利要求1所述一种苤蓝组织培养快速繁殖方法,其特征在于在步骤3)中,如权利要求1所述一种苤蓝组织培养快速繁殖方法,其特征在于在步骤3)中,所述培养基的组成为改良MS培养基+细胞分裂素6-苄基腺嘌呤(1.0~2.0)mg/L+生长素a-萘乙酸(0.1~0.5)mg/L+蔗糖(25~30)g/L+琼脂(6.5~8)g/L,培养基的pH值为(5.8~6.2)愈伤诱导;所述切成组织小块可切成1.0~1.5cm组织小块。

5.如权利要求1所述一种苤蓝组织培养快速繁殖方法,其特征在于在步骤3)中,所述愈伤诱导的条件为:培养周期(10~20)d,培养温度(20~26)℃,光照强度1500lux,光照时间12h/d。

6.如权利要求1所述一种苤蓝组织培养快速繁殖方法,其特征在于在步骤4)中,所述增殖培养基的组成为:改良MS培养基+细胞分裂素6-苄基腺嘌呤(1.0~2.0)mg/L+生长素a-萘乙酸(0.1~0.5)mg/L+蔗糖(25~30)g/L+琼脂(6.5~8)g/L,培养基的pH值为5.8~6.2。

7.如权利要求1所述一种苤蓝组织培养快速繁殖方法,其特征在于在步骤4)中,所述培养的条件为培养周期(20~30)d,培养温度(20~26)℃,光照强度2500lux,光照时间12h/d。

8.如权利要求1所述一种苤蓝组织培养快速繁殖方法,其特征在于在步骤5)中,所述生根培养的生根培养基的组成为:改良MS培养基+细胞分裂素6-苄基腺嘌呤(0.05~0.1)mg/L+生长素a-萘乙酸(0.1~0.5)mg/L+蔗糖(15~25)g/L+琼脂(6.5~8)g/L,培养基的pH值为5.8~6.2。

9.如权利要求1所述一种苤蓝组织培养快速繁殖方法,其特征在于在步骤5)中,所述生根培养的条件为:培养周期(10~20)d,培养温度(20~26)℃,光照强度2500lux,光照时间12h/d。

10.如权利要求1所述一种苤蓝组织培养快速繁殖方法,其特征在于在步骤6)中,所述炼苗的条件在温度20~25℃,湿度60%~80%的条件下炼苗7~15d。

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