一种木鳖的培养方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种植物繁殖方法，特别是一种木鳖的培养方法。
【背景技术】
[0002] 木鳖（Momordicacochinchinensis(Lour)Spreng)为萌芦科苦瓜属多年生草质藤 本雌雄异株植物，具有重要的观赏和药用价值。以皂角甙、木鳖子素、留醇、生物硷等为主要 活性成分，在外科用药、杀虫农药等方面具有广泛开发应用前景。木鳖子在我国主要分布广 西、四川、广东、江西、湖南、湖北、云南、贵州等省，在南方大部分省区有栽培（陈小军，木鳖 子栽培技术，南方园艺，2010,03 :54-55.)。
[0003] 木鳖常用种子和块根繁殖；但种子数量受限、发芽和成苗率较低，又因雌雄异株， 种子苗后代遗传背景杂合、群体差参不齐，且难以保证当年开花结实；块根繁殖通常根据块 根上芽眼的数目切成若干小块，每块至少具有一个芽眼，埋入播种穴内，每穴一块，一般当 年即可开花结果，比种子繁殖快，但繁殖数量也有限（赵世伟主编，园林工程景观设计：植 物配置栽培应用大全（上、中、下卷），中国农业科技出版社，2000年09月第1版，第1457 页）。所以，木鳖的快速繁殖是其种植业中亟待解决的"瓶颈问题"。
【发明内容】
[0004] 本发明的一个目的是解决至少上述问题和/或缺陷，并提供至少后面将说明的优 点。
[0005] 本发明还有一个目的是提供一种木鳖组织培养快速繁殖方法，它能够快速繁殖出 大量适合移栽的优良木鳖种苗。
[0006] 本发明还有一个目的是提供一种在固体培养基中培养木鳖时，使其有效吸收固体 培养基中的营养成分的问题。
[0007] 本发明提供的技术方案为：
[0008] 一种木鳖的培养方法，包括：
[0009] 步骤一、分化培养：将木鳖外植体接种到MS分化培养基中培养25?35天直至 木鳖外植体的侧芽分化长出丛生芽，其中，分化培养中的培养温度为23-26°C，光照强度为 1400-20001ux，光照周期为10-12小时/天；之后进入步骤二，
[0010] 步骤二、壮苗培养：将步骤一中经过分化培养的木鳖外植体在MS壮苗培养基中 培养35?45天得到木鳖健壮植株，其中，壮苗培养中的培养温度为23-26°C，光照强度为 1400-20001ux，光照周期为10-12小时/天；之后进入步骤三，
[0011] 步骤三、生根培养：将经步骤二中得到的木鳖健壮植株置于MS生根培养基中培 养35?45天得到带根的木鳖植株，其中，生根培养中的培养温度为23-26°C，光照强度为 1400-20001ux，光照周期为10-12小时/天。
[0012] 优选的是，所述的木鳖的培养方法中，在所述步骤三之后还进行步骤四，所述步骤 四包括：炼苗和移栽：先将步骤三中得到的带根的木鳖植株在温度25°C下炼苗2-4天，之 后再移栽到沙土壤中生长45天，最后再移栽至大田生长，其中，大田的生长条件为：温度为 20-28°C，相对湿度为75-80%，遮阳率为70%。
[0013] 优选的是，所述的木鳖的培养方法中，所述步骤四中，木鳖植株移栽至大田后，第 天，每天早晚间隔10个小时各喷雾3?5次，每次喷雾lOmin，第8天至以后，每天早晚 间隔10个小时各喷雾1次，每次lOmin。
[0014] 优选的是，所述的木鳖的培养方法中，所述步骤一中，MS分化培养基包含：MS， 0? 1-0. 4mg/LKT，I. 0-2.Omg/L6-BA，0. 2-1.Omg/LNM，25-30g/L蔗糖和4. 8-5. 8g/L琼脂， 并调节初始pH值为5. 8。
[0015] 优选的是，所述的木鳖的培养方法中，所述步骤二中，MS壮苗培养基包含：MS， 0? 5-2.Omg/L6-BA、0. 1-0. 4mg/LKT、0. 2-1.Omg/LIM，25-30g/L蔗糖和 3. 8-4. 8g/L琼脂， 并调节初始pH值为5. 8。
[0016] 优选的是，所述的木鳖的培养方法中，所述步骤三中，MS生根培养基包含：1/2MS， 0? 5-1. 0mg/L IBA、1. 0-2. 0mg/LNAA、25-30g/L蔗糖和3. 8-4. 8g/L琼脂，并调节初始pH值为 5. 8〇
[0017] 优选的是，所述的木鳖的培养方法中，在所述步骤一之前还包括木鳖外植体获取， 木鳖外植体获取的具体过程包括：取木鳖嫩芽作为外植体，首先使用体积百分比2%的洗 洁精水溶液浸泡5-15min、之后使用自来水冲洗10-20min，然后用质量体积分数0. 1 %的升 汞消毒8-10min，最后用无菌水冲洗3-5次，除去表面水分得到木鳖外植体。
[0018] 优选的是，所述的木鳖的培养方法中，所述质量体积分数0. 1 %的升汞中还包含吐 温-20。
[0019] 优选的是，所述的木鳖的培养方法中，所述MS分化培养基、MS壮苗培养基和MS生 根培养基均为固体培养基，在固体培养基中放置一支架，该支架包括一水平设置的支撑滤 网和多根吸水柱，所述多根吸水柱的一端均固定在所述支撑滤网上且靠近所述支撑滤网边 框的部位设置的吸水柱的数量多，，所述支架由吸水树脂制成，所述支撑滤网位于所述固体 培养基的表面，而所述多根吸水柱插入到所述固体培养基中，在所述支撑滤网上进行所述 分化培养、壮苗培养和生根培养。
[0020] 本发明至少包含如下优点：
[0021] (1)通过生物技术对木鳖进行组织培养快速繁殖，在短时间内培育出大量可供大 田栽培的木鳖幼苗，提高了木鳖种苗的繁殖系数和种苗质量，实现规模化生产，满足生产上 的需要。
[0022] (2)在MS繁殖培养基中添加L 0-2. 0mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA和0? 1-0. 4mg/ L的激动素KT可促进丛生芽的分化；添加浓度为0. 2-1. 0mg/L的生长激素萘乙酸NAA可促 进丛生芽的生长；
[0023] 在MS壮苗培养基中添加浓度为0? 5-1. 5mg/L的6-BA和0? 2-0. 6mg/L的吲哚乙酸 IAA可促进丛生芽叶片的展开；
[0024] 在MS生根培养基上组合使用浓度为0. 5-1.0mg/L的吲哚丁酸IBA和I. 0-2. Omg/ L的生长素NAA，可获得带根的完整植株，这些植株经炼苗后可直接移栽沙床。
[0025] (3)采用本发明的方法，得到的单芽增殖系数达到5-8倍，获得的组培苗生根率在 95%以上，每株平均带3-4个根，根长为3-5厘米，移栽沙床成活率在98%以上；快速、便 捷、高效地进行木鳖组织培养，实现木鳖组培种苗的规模化生产。
[0026] (4)本发明还设置有一个支架，由吸水树脂制成，可将该支架在固体培养基未凝固 前或灭菌之前插入到其中，这样，由于吸水树脂的强吸水性，其能够吸收大量的培养基中的 营养物质，在凝固后，将木鳖在该支架上培养，其除了能够从培养基中吸收营养成分，培养 基也不易很快干化，也能够从该支架中吸收营养，且靠近所述支撑滤网边框的部位设置的 吸水柱的数量多，这样，靠近培养基周边生长的木鳖也能够吸收到足够的营养成分，且固体 培养基的表面也能保持湿润，解决了固体培养基容易干化、营养成分难以扩散分布失衡等 问题。
【具体实施方式】
[0027] 下面对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据 以实施。
[0028] 本发明提供一种木鳖的培养方法，包括：
[0029] 步骤一、分化培养：将木鳖外植体接种到MS分化培养基中培养25?35天直 至外植体的侧芽分化长出丛生芽，其中，分化培养中的培养温度为23-26°C，光照强度为 1400-20001ux，光照周期为10-12小时/天；之后进入步骤二，
[0030] 步骤二、壮苗培养：将步骤一中经过分化培养的木鳖外植体在MS壮苗培养基中 培养35?45天得到木鳖健壮植株，其中，壮苗培养中的培养温度为23-26°C，光照强度为 1400-20001ux，光照周期为10-12小时/天；之后进入步骤三，
[0031] 步骤三、生根培养：将经步骤二中得到的木鳖健壮植株置于MS生根培