养基中培 养35?45天得到带根的木鳖植株，其中，生根培养中的培养温度为23-26°C，光照强度为 1400-20001ux，光照周期为10-12小时/天。
[0032] 作为优选，在所述步骤三之后还进行步骤四，所述步骤四包括：炼苗和移栽：先 将步骤三中得到的带根的木鳖植株在温度25°C下炼苗2-4天，之后再移栽到沙土壤中生 长45天，最后再移栽至大田生长，其中，大田的生长条件为：温度为20-28°C，相对湿度为 75-80%，遮阳率为70%。
[0033] 作为优选，所述步骤四中，木鳖植株移栽至大田后，第1-7天，每天早晚间隔10个 小时各喷雾3?5次，每次喷雾lOmin，第8天至以后，每天早晚间隔10个小时各喷雾1次， 每次IOmin。
[0034] 作为优选，所述步骤一中，MS分化培养基包含：MS，0.1-0. 4mg/LKT，L0-2.Omg/L 6-BA，0? 2-1.Omg/LNAA，25-30g/L蔗糖和4. 8-5. 8g/L琼脂，并调节初始pH值为5. 8。
[0035] 作为优选，所述步骤二中，MS壮苗培养基包含：MS，0?5-2.Omg/L6-BA、 0? 1-0. 4mg/LKT、0. 2-1.Omg/LIAA，25-30g/L蔗糖和 3. 8-4. 8g/L琼脂，并调节初始pH值为 5. 8〇
[0036] 作为优选，所述步骤三中，MS生根培养基包含：1/2MS，0.5-1.Omg/LIBA、 L0-2. 0mg/LNAA、25-30g/L蔗糖和 3. 8-4. 8g/L琼脂，并调节初始pH值为 5. 8。
[0037] 作为优选，在所述步骤一之前还包括木鳖外植体获取，木鳖外植体获取的具体过 程包括：取木鳖嫩芽作为外植体，首先使用体积百分比2%的洗洁精水溶液浸泡5-15min、 之后使用自来水冲洗10_20min，然后用质量体积分数0. 1 %的升汞消毒8-10min，最后用无 菌水冲洗3-5次，除去表面水分得到木鳖外植体。
[0038] 作为优选，所述质量体积分数0. 1 %的升汞中还包含吐温-20。
[0039] 作为优选，所述MS分化培养基、MS壮苗培养基和MS生根培养基均为固体培养基， 在固体培养基中放置一支架，该支架包括一水平设置的支撑滤网和多根吸水柱，所述多根 吸水柱的一端均固定在所述支撑滤网上且靠近所述支撑滤网边框的部位设置的吸水柱的 数量多，所述支架由吸水树脂制成，所述支撑滤网位于所述固体培养基的表面，而所述多根 吸水柱延伸插入到所述固体培养基中，在所述支撑滤网上进行所述分化培养、壮苗培养和 生根培养。这样该支架吸收很多还为凝固的培养基，而且，可以根据培养容器的形状制定该 支架，使其与培养容器的形状贴合，当培养基凝固为固体后，该支架也同时被固定在固体培 养基中，由于其具有强吸水性，这样能够保持固体培养基的表面和内部的湿润度，同时，由 于沿支撑滤网边框的位置设置有更多跟的吸水柱，这样，也能保证固体培养基的边缘也保 持湿润。因为一般情况下是固体培养基的边缘更加容易干化，造成周缘的植株生长不好。本 发明设置的支架可以避免这种情况。本发明的支撑滤网的孔径为50?30目左右，该支架 可以有诸如淀粉接枝丙烯酸盐类、接枝丙烯酰胺、交联羧甲基纤维素接枝丙烯酰胺等材料 制成。
[0040] 本发明中的MS培养基的配方组成如下：
[0041] MS培养基
[0042]
【主权项】
1. 一种木鳖的培养方法，其特征在于，包括： 步骤一、分化培养：将木鳖外植体接种到MS分化培养基中培养25?35天直至木 鳖外植体的侧芽分化长出丛生芽，其中，分化培养中的培养温度为23-26°C，光照强度为 1400-20001ux，光照周期为10-12小时/天；之后进入步骤二， 步骤二、壮苗培养：将步骤一中经过分化培养的木鳖外植体在MS壮苗培养基中培 养35?45天得到木鳖健壮植株，其中，壮苗培养中的培养温度为23-26°C，光照强度为 1400-20001ux，光照周期为10-12小时/天；之后进入步骤三， 步骤三、生根培养：将经步骤二中得到的木鳖健壮植株置于MS生根培养基中培养 35?45天得到带根的木鳖植株，其中，生根培养中的培养温度为23-26°C，光照强度为 1400-20001ux，光照周期为10-12小时/天。
2. 如权利要求1所述的木鳖的培养方法，其特征在于，在所述步骤三之后还进行步骤 四，所述步骤四包括：炼苗和移栽：先将步骤三中得到的带根的木鳖植株在温度25°C下炼 苗2-4天，之后再移栽到沙土壤中生长45天，最后再移栽至大田生长，其中，大田的生长条 件为：温度为20-28°C，相对湿度为75-80%，遮阳率为70%。
3. 如权利要求1所述的木鳖的培养方法，其特征在于，所述步骤四中，木鳖植株移栽至 大田后，第1-7天，每天早晚间隔10个小时各喷雾3?5次，每次喷雾lOmin，第8天至以 后，每天早晚间隔10个小时各喷雾1次，每次lOmin。
4. 如权利要求1所述的木鳖的培养方法，其特征在于，所述步骤一中，MS分化培养基包 含：MS，0? 1-0. 4mg/LKT，I. 0-2.Omg/L6-BA，0? 2-1.Omg/LNAA，25-30g/L蔗糖和 4. 8-5. 8g/ L琼脂，并调节初始pH值为5. 8。
5. 如权利要求1所述的木鳖的培养方法，其特征在于，所述步骤二中，MS壮苗培养基包 含：MS，0. 5-2.Omg/L6-BA、0. 1-0. 4mg/LKT、0. 2-1. 0mg/LIAA，25-30g/L蔗糖和 3. 8-4. 8g/ L琼脂，并调节初始pH值为5. 8。
6. 如权利要求I所述的木鳖的培养方法，其特征在于，所述步骤三中，MS生根培养基包 含：1/2MS，0. 5-1. 0mg/LIBA、1. 0-2. 0mg/LNAA、25-30g/L蔗糖和 3. 8-4. 8g/L琼脂，并调节 初始pH值为5. 8。
7. 如权利要求1所述的木鳖的培养方法，其特征在于，在所述步骤一之前还包括木鳖 外植体获取，木鳖外植体获取的具体过程包括：取木鳖嫩芽作为外植体，首先使用体积百分 比2%的洗洁精水溶液浸泡5-15min、之后使用自来水冲洗10-20min，然后用质量体积分数 〇. 1 %的升汞消毒8-10min，最后用无菌水冲洗3-5次，除去表面水分得到木鳖外植体。
8. 如权利要求7所述的木鳖的培养方法，其特征在于，所述质量体积分数0. 1 %的升汞 中还包含吐温-20。
9. 如权利要求1所述的木鳖的培养方法，其特征在于，所述MS分化培养基、MS壮苗培 养基和MS生根培养基均为固体培养基，在固体培养基中放置一支架，该支架包括一水平设 置的支撑滤网和多根吸水柱，所述多根吸水柱的一端均固定在所述支撑滤网上且靠近所述 支撑滤网边框的部位设置的吸水柱的数量多，所述支架由吸水树脂制成，所述支撑滤网位 于所述固体培养基的表面，而所述多根吸水柱插入到所述固体培养基中，在所述支撑滤网 上进行所述分化培养、壮苗培养和生根培养。
【专利摘要】本发明公开了一种木鳖的培养方法，包括：步骤一、分化培养：将木鳖外植体接种到MS分化培养基中培养25～35天直至外植体的侧芽分化，培养温度23-26℃，光照强度1400-2000lux，光照周期10-12小时/天；步骤二、壮苗培养：将木鳖外植体在MS壮苗培养基中培养35～45天得到木鳖健壮植株，培养温度23-26℃，光照强度1400-2000lux，光照周期10-12小时/天；步骤三、生根培养：将木鳖健壮植株置于MS生根培养基中培养35～45天得到带根的木鳖植株，培养温度23-26℃，光照强度1400-2000lux，光照周期10-12小时/天。发明的方法能够快速繁殖出大量适合移栽的木鳖种苗。
【IPC分类】A01H4-00
【公开号】CN104542307
【申请号】CN201510053984
【发明人】李刚, 王晓峰, 周琼, 缪剑华, 韦坤华
【申请人】广西壮族自治区药用植物园
【公开日】2015年4月29日
【申请日】2015年2月2日