2至0. 75的范围（其包括T5穗发育期）时。提供的 用相对发育尺度鉴定应用穗发育调节处理的最有效的期间的能力是本发明的一个方面。许 多穗发育调节处理，包括能够防止花粉发育或防止花粉散落的化学试剂，是本领域已知的， 可用于本发明方法的实施中。
[0185] 本发明可用于通过使用本发明的方法产生杂种种子。本发明提供了用于第一种 亲本玉米植物与第二种亲本玉米植物杂交的方法，其中应用发育调节处理可以抑制第一 种亲本玉米植物的花粉产生。本发明的方法可用于确定应用发育调节处理的是最有效的 发育期和/或时机。本发明尤其可用于美国专利号6, 762, 344和美国专利申请公开号 No. 2009/0165166中提供的方法中。在一种实施方式中，本发明是用本发明的方法产生的杂 种种子，包括由杂种种子生长而成的植物和植物部分以及由此产生的商业产品。
[0186] 本发明提供了使用用于杂种种子生产的转基因玉米事件M0N87427植物，其中草 甘膦被用作MON87427植物中的穗发育调节处理以防止花粉形成。这基于通过及时应用草 甘膦而防止含M0N87427的雌性亲本系花粉散落进而防止自花授粉发生的能力。如果相对 于穗形成太早应用草甘膦，雄性生殖体对于完整效果的处理可能是发育不足的。如果相对 于穗形成太晚应用，花药挤出可能已经正在进行，草甘膦处理不能够防止花粉发育。因此， 相对于穗发育应用草甘膦的时机对于保证最佳效率以及因此的产生的杂种种子的最高纯 度是重要的。在一种实施方式中，可通过使用相对发育尺度确定MON87427植物的穗发育 的时机并选择显示向期望穗发育期的成熟度的相对发育尺度上的范围而鉴定用于该方法 的草甘膦应用的最佳时机。然后可用这种穗发育时机的确定值鉴定将草甘膦作为发育调节 处理应用于MON87427植物、进而防止自花授粉并增加杂种种子生产的时机。本发明的方 法揭示了，对于将草甘膦应用于MON87427植物以防止花粉形成而言，相对发育尺度上的 〇. 62至〇. 75的范围或T5的穗发育是最佳范围。因此，在Roundup?杂交系统中，对于任 何给定成熟度组的任何给定亲本雌性系，通过该亲本雌性系到达P50所需的GDU乘以该范 围内的任何值而预测最佳时间。当该计算的结果等于该生长季的GDU时，就获得了草甘膦 应用的最佳时间。也可用其它花粉散落基准或其它T-尺度基准来产生相对发育尺度，也不 会偏离本发明的范围。
[0187] 本发明的另一方面提供了可用于确定其中生殖杂交最佳的穗发育期的方法。与基 因型间的发育差异妨碍单独地基于V-期或GDU的可靠地预测最佳调节处理的方式相似，异 花授粉的时机也可通过相对发育尺度而受益。用相对发育尺度的简单研宄揭示了在该尺 度的特定范围内异花授粉是最佳的。再次，通过知道给定基因型到达P50所需的GDU，在不 依赖于不可靠的营养基准或不进行费时的穗发育的物理评价的情况下，可查明何时到达该 范围。通常用于不同特征和农作物的育种方法的描述可见下列书本参考书之一（Allard， "PrinciplesofPlantBreeding，"JohnWiley&Sons，NY，U.ofCA，Davis，CA，50_98， 1960 ;Simmonds，"Principlesofcropimprovement，"Longman，Inc.，NY，369-399,1979; Sneep和Hendriksen，"Plantbreedingperspectives，"Wageningen(ed)，Centerfor AgriculturalPublishingandDocumentation?1979 ；Fehr?In：Soybeansimprovement? ProductionandUses，2ndEdition，Manograph.，16 :249,1987 ;Fehr，"Principlesof varietydevelopment，"TheoryandTechnique，(VolI)和CropSpeciesSoybean(Vol 2)，IowaStateUniv.，MacmillianPub.Co.，NY，360-376,1987) 〇
[0188] 在实施本发明的方法中，一种或两种玉米亲本植物可包括一种或多种期望的农业 兴趣的特征。例如，MON87427亲本玉米植物可用在杂种种子的生产中，用于与第二种亲本 玉米植物（其包含至少一种农业兴趣的基因和/或特征）的育种。在该实施方式中，相对发 育尺度可被用于监测和/或确定MON87427亲本玉米植物的生殖发育期，以便在花粉形成 前为用草甘膦处理MON87427亲本玉米植物进而防止自花授粉准确安排时间。可用第二种 亲本玉米植物对事件MON87427植物进行授粉，从事件MON87427植物收获玉米杂种种子， 其中从事件MON87427植物收获的种子，具有比从未处理或从相同条件下其它玉米植物收 获的玉米种子的更高产量的玉米杂种种子（即更高百分比的收获的杂种种子或更高的杂 种种子纯度）。
[0189] 农业兴趣的特征和基因是本领域公知的，包括但不限于，例如除草剂耐受性、雄性 不育、增加的产量、昆虫控制、真菌病抗性、病毒抗性、线虫抗性、细菌性疾病抗性、植物生长 和发育、淀粉产量、改良的和/或高油产量、改良的脂肪含量、高蛋白产量、水果催熟、增加 的动物和/或人类营养、生物聚合物、环境压力、药用肽和分泌肽、改进的加工特性、改进的 可消化性、低棉子糖、工业酶产量、改良的口味、固氮作用、杂种种子产量、纤维产量和/或 生物染料产量。具有一种或多种期望特性的植物的例子是在美国农业部动植物卫生检验 处（APHIS)登记的那些：除草剂耐受性（例如，玉米事件MON88017、NK603、DAS-68416-4、 HCEM485、DP-098140-6、DP-356043-5、MIR604、59122、TC-6275、1507 *、M0N802、T14 和 /或T25)、昆虫控制（例如，玉米事件MON863、M0N809、M0N810、M0N89034、M0N88017、MON802、MIR-162、TC-6275、DBT418、B16、TC-1507、DAS59122-7、MIR604 和 / 或MON80100) 和/或其它期望特性（例如，玉米事件LY038、M0N87460和/或3272)(这种特性的完整列 表的描述可见美国政府网站http： //www.aphis,usda.gov/brs/notreg.html) 〇
[0190] 在实施本发明的方法中，可使用近交系、变种、杂种或任何其它基因型。例如，优良 的近交系是优秀农学特性育种和筛选产生的玉米植物系。可以在育种方法中转化和/或使 用基因型以包含农学兴趣如草甘膦耐受性的基因，可筛选适合用作杂种种子生产系统中的 雌性或雄性亲本的事件。
[0191] 可用于实施本发明的玉米优良基因型包括但不限于CI9805(美国专利公开号 20030093826) ;LH321(美国专利公开号20030106086) ;H0I002(美国专利公开号 20030154524) ;H0I001(美国专利公开号20030172416) ;5750(美国专利公开号 20030177541) ;G0502(美国专利公开号20030177543) ;G1102(美国专利公开号 20030177544) ;HX879(美国专利公开号20040068771) ;6803(美国专利公开号 20040088767) ;5020(美国专利公开号20040088768) ;G3001(美国专利公开号 20040098768) ;LH268(美国专利公开号20040111770) ;LH311(美国专利公开号 20040111771) ;LH306(美国专利公开号20040111772) ;LH351(美国专利公开号 20040111773) ;LHE323(美国专利公开号20040111774) ;402A(美国专利公开号 20040123352) ;366C(美国专利公开号20040139491) ;NP2315(美国专利公开号 20040143866) ;PH0GC(美国专利公开号20040194170) ;SE8505(美国专利公开号 20050015834) ;D201 (美国专利公开号20050028236) ;BE1146BMR(美国专利公开号 20050076402) ;PHCAM(美国专利公开号20050114944) ;PHCK5(美国专利公开号 20050114945) ;PHC77(美国专利公开号20050114951) ;PHCND(美国专利公开号 20050114952) ;PHCMV(美国专利公开号20050114953) ;PHB00 (美国专利公开号 20050114955) ;PHCER(美国专利公开号20050114956);PHCJP(美国专利公开号 20050120437) ;PHADA(美国专利公开号20050120439) ;PHB8V(美国专利公开号 20050120443) ;6XN442(美国专利公开号20050125864) ;4XP811 (美国专利公开号 20050125865) ;PHCCW(美国专利公开号20050125866) ;MN7224(美国专利公开号 20050132433) ;BE9514(美国专利公开号20050132449) ;PHCA5(美国专利公开号 20050138697) ;PHCPR(美国专利公开号20050144687) ;PHAR1(美国专利公开号 20050144688) ;PHACV(美国专利公开号20050144689) ;PHEHG(美国专利公开号 20050144690) ;NP2391 (美国专利公开号20050160487) ;PH8WD(美国专利公开号 20050172367) ;D501(美国专利公开号20050177894) ;D601(美国专利公开号 20050177896) ;D603(美国专利公开号20050177904) ;PHCEG(美国专利公开号 20050223443) ;W16090(美国专利公开号20050273876) ;M10138(美国专利公开号 20050273877) ;N61060(美国专利公开号20050273878) ;NP2460(美国专利公开号 20060048243) ;BS112(美国专利公开号20060070146) ;PHDWA(美国专利公开号 20060107393) ;PH8JV(美国专利公开号20060107394);PHEffff(美国专利公开号 20060107398) ;PHEDR(美国专利公开号20060107399) ;PHE67(美国专利公开号 20060107400) ;PHE72(美国专利公开号20060107408) ;PHF1J(美国专利公开号 20060107410) ;PHE35(美国专利公开号20060107412) ;PHEHR(美国专利公开号 20060107415);PHDPP(美国专利公开号20060107416) ;PHEHC(美国专利公开号 20060107418) ;PHANF(美国专利公开号20060107419) ;PHC78(美国专利公开号 20060107420) ;PH8T0 (美国专利公开号20060107421) ;PHDRW(美国专利公开号 20060107422) ;PHEGV(美国专利公开号20060107423) ;PHEBA(美国专利公开号 20060107426) ;PHENE(美国专利公开号20060112463) ;PHEJW(美国专利公开号 20060112464);PHAPT(美国专利公开号20060112465);PHCND(美国专利公开号 20060130188) ;PHCEG(美国专利公开号20060130189) ;PHADA(美国专利公开号 20060130190) ;PHEED(美国专利公开号 20060143744) ;PHHB(美国专利号 5,633,427); LH262 (美国专利号5,633,428) ;LH227 (美国专利号5,633,429) ;LH226 (美国专利号5， 639,941);1^235(美国专利号 5,639,942);1^234 (美国专利号 5,639,943)屮邢?0(美国 专利号 5,639,946) ;PH06N(美国专利号 5,675,066) ;LH177(美国专利号 5,684,227); PH24E(美国专利号5,689,034) ;PHP38 (美国专利号5, 708,189) ;ASG06 (美国专利号5， 714,671) ;CG00685(美国专利号 5,723,721) ;PHND1(美国专利号 5,723,722) ;PH44A(美国 专利号 5,723,723);2501591(美国专利号 5,723,724);2501101(美国专利号 5,723,725); ZS01452(美国专利号 5,723,726) ;ZS01429(美国专利号 5,723,727) ;ZS01819(美国专利 号 5, 723, 728) ;ZS01250 (美国专利号 5, 723, 729) ;ZS01595 (美国专利号 5, 723, 730); 〇63冊97(美国专利号5,728,923);即938(934)(美国专利号5,728,924);?圆62(美国专利 号 5,731，491) ;CG5NA58(美国专利号 5,731，502) ;NP948(美国专利号 5,731，503); LH236(美国专利号5,731，504) ;CG00766(美国专利号5,731，506) ;PHOAA(美国专利号5， 750,829) ;PH15A(美国专利号 5,750,830) ;PH25A(美国专利号 5,750,831) ;PH44G(美国专 利号 5, 750,832);PHOCD(美国专利号 6,084,160) ;ASG25 (美国专利号 6,084,161); 8615115(美国专利号6,084，162)出￡4547(美国专利号6,084，163);?11211'(美国专利号6， 091，007);010邢16(美国专利号6,096,952)屮11224(美国专利号6,096,953)洫5626(美国 专利号 6,103,958) ;ASG28 (美国专利号 6,103,959) ;PH0V0 (美国专利号 6,107, 550); 901(^6(美国专利号6，111，171);220册11(美国专利号6，111，172) ;六5617(美国专利号6， 114,606)洫1?5253131113(美国专利号6，114,609)洫5627(美国专利号6，114,610) ;耶即2(美 国专利号6，114,611)丨11361?(美国专利号6，114,613)丨111即（美国专利号6，118,051) ; PH)JG(美国专利号6,118,053) ;PH189 (美国专利号6,118,054) ;PH12J(美国专利号6， 118,055)屮111￡]\1(美国专利号6，118,056);900邛28(美国专利号6，121，519)屮1112(：(美国 专利号6，121，520)屮册5(：(美国专利号6，121，522)丨113￡￥(美国专利号6，121，523) ; 254199(美国专利号6，121，525);?112￥7(美国专利号6，124,529)丨11打？（美国专利号6， 124,530)屮1131^(美国专利号6，124,531)屮112丽（美国专利号6，124,532)屮112冊（美国专 利号 6,124, 533) ;PH1K2 (美国专利号 6,124, 534) ;PH226 (美国专利号 6,124, 535); PH2VJ(美国专利号6,127,609) ;PH1M8(美国专利号6,127,610) ;WQCD10 (美国专利号6， 130,369)屮11188(美国专利号6，130,370);170册5(美国专利号6，133,512)屮110耶（美国 专利号6，133,513)屮11361((美国专利号6，133,514)丨112￥1((美国专利号6，137,036) ; PHlMD(美国专利号6,137,037) ;SM4603(美国专利号6,137,038) ;PH04G(美国专利号6， 140,562);咿2151(美国专利号6，140,563)屮11501?(美国专利号 6,727,413);1^254(美国 专利号 6,730,833) ;PH5WB(美国专利号 6,730,834) ;PH7CH(美国专利号 6,730,835); PH54M(美国专利号6,730,836) ;PH726(美国专利号6,730,837) ;PH48V(美国专利号6， 734,348) ;PH3PV(美国专利号 6,737,566) ;PH77V(美国专利号 6,740,795) ;PH7JB(美国专 利号 6,740,796) ;NP2316(美国专利号 6,740,797) ;PH70R(美国专利号 6,740,798); RAAl(美国专利号6, 747,194) ;VMM1 (美国专利号6, 747,195) ;PH3RC(美国专利号6, 747， 196);丽11(美国专利号6,753,465);5750(美国专利号6,756,527)屮册勝（美国专利号6， 756,528)屮11951(美国专利号6,756,530)屮册1^(美国专利号6,759,578) ;咿2171(美国 专利号6,759,579)屮118711(美国专利号6,759,580);?1126叭美国专利号6,765，132) ; RIIl(美国专利号6, 765,133) ;PH9AH(美国专利号6, 770,802) ;PH51H(美国专利号6, 774， 289)屮11941'(美国专利号6,774,290)屮11748(美国专利号6,777,599)屮册?1(美国专利号 6,781，042) ;PH75K(美国专利号 6,781，043) ;KW7606(美国专利号 6,784,348) ;PH8CW(美 国专利号 6,784,349) ;PH8PG(美国专利号 6,784,350) ;RB01 (美国专利号 6,797,869); 9SM990 (美国专利号6，803，509) ;PH5TG(美国专利号6，806，408) ; 1501150 (美国专利号6， 806,409);1390186(美国专利号6,806,410)屮册舅（美国专利号6,809,240);1(财636(美 国专利号6,809,243);1363128(美国专利号6,809,244) ;1^246(美国专利号6,812,386); 2JK221(美国专利号6,812,387) ;PHN46(美国专利号5,567,861) ;ZS0223(美国专利号5， 569,813);?11&」〇(美国专利号5,569,816)屮11113(美国专利号5,569,817) ;?11&?8(美国专 利号5,569,818) ;PHPP8 (美国专利号5,569,819) ;ZS1284 (美国专利号5,569,820); PHTll(美国专利号5,569,821);phte4(美国专利号5,569,822) ;ZS0114(美国专利号5， 569,826);7054(美国专利号 5,576,473);250560(美国专利号 5,585,533);250853(美国 专利号 5,585,534) ;ZS1791(美国专利号 5,585,539) ;ZS1513(美国专利号 5,585,541); 251679(美国专利号5,589,606);251022(美国专利号5,602,314);251202(美国专利号5， 602,315);251783(美国专利号5,602,316)屮册61(美国专利号5,602,318)屮1?￥1(美国 专利号 5,608，138) ;PH05F(美国专利号 5,608，139) ;PH38B(美国专利号 5,608，140); PH42B(美国专利号5,618,987) ;PHDD6(美国专利号5,625，129) ;ZS0541(美国专利号5， 625，131)屮11088(美国专利号5,625，132)屮11(^7(美国专利号5,625，133) ;1^233(美国专 利号 5,625,135) ;ASG05 (美国专利号 5, 723, 731) ;LH281 (美国专利号 5, 723, 739); PHBR)(美国专利号 5,728,919) ;CG5NA01 (美国专利号 5,728,922) ;AR5651bm3(美国专利 号5,977,458);1^266(美国专利号5,977,459) ;1^303(美国专利号5,977,460)山11301(美 国专利号5,981，855);450601(美国专利号5,986，182)屮111了8(美国专利号5,986，184) ; PH24D(美国专利号5,986,185) ;LH229 (美国专利号5,986,186) ;LH277 (美国专利号5， 986，187) ;PH1CN(美国专利号 5,990,393) ;LH261(美国专利号 5,990,394) ;W1498A(美国 专利号 5,990,395);购052(美国专利号 5,994,631);10858(美国专利号 5,998,710); PH09E(美国专利号5,998,711) ;LH284(美国专利号6,015,944) ;PH1B5(美国专利号6， 020,543)屮1110六（美国专利号 6,025,547);700^5(美国专利号6,031，160);619215(美 国专利号6,031，161);900)11(美国专利号6,031，162) ;900^2(美国专利号6,034,304); 90QDD1 (美国专利号6,034,305) ;R398D(美国专利号6,034,306) ;RDBQ2(美国专利号6， 037,53