裂素的浓度为lmg/L，激动素的浓度为0.5mg/L，荼乙酸的浓度为0.2mg/L，活性炭的浓度为2.0g/L ;新芽培养与丛生芽培养均是在温度24度、光照强度3000LX及每天光照时间12小时的条件下进行。
[0026]第三步:将丛生芽切成单芽，接种至第三培养基中进行生根培养，所述第三培养基是在1/2MS培养基的基础上添加了吲哚丁酸和活性炭所得，第三培养基中吲哚丁酸和活性炭浓度分别为0.5mg/L和2g/L，得到生根的试管苗；生根培养是在温度24度、光照强度3000LX及每天光照时间12小时的条件下进行。
[0027]第四步:将生根的试管苗移栽至由重量比3: I的泥炭和珍珠岩混合而成的基质中，浇足水后用塑料薄膜覆盖保温保湿防失水萎蔫，7天后揭开薄膜炼苗，每天叶面喷水3次，15天后施肥料液，肥料液中含有0.1?丨％硝酸铵、0.lwt%磷酸二氢钾、0.1?丨％氯化镁。30天后移栽至灌满纯泥炭的塑料穴盘中，经3个月培养后直接移栽至土壤中。
[0028]实施例2
[0029]类似于实施例1，区别在于，所述的第二步还包括:将所得的丛生芽切成单芽，接种至第二培养基上，经过连续继代增殖不断扩大繁殖系数，每45天增殖一次，增殖率为I: 3-5。
[0030]实施例1和2中的垂枝型墨西哥落羽杉移栽至土壤中后，存活率可达100%且缓苗期短生长快。本发明的离体培养方法只需少量材料(数个或几十个)就能在一年内获得数万至数十万株优质种苗，是其他繁殖方法无法比拟的。
【主权项】
1.一种垂枝型墨西哥落羽杉组织培养方法，其特征在于，包括: 第一歩:选取当年萌发的垂枝型墨西哥落羽杉新枝，剪去针状叶片，冲洗，消毒，用无菌水冲洗后用无菌滤纸吸干水份； 第二歩:在超净台上将第一步得到的新枝切成0.5-1.5cm长度的茎段进行新芽诱导，接种于第一培养基上进行新芽培养，所述第一培养基是在1/2MS培养基的基础上添加了玉米素和荼乙酸及活性炭所得，第一培养基中玉米素的浓度为2.5-3.5mg/L，荼乙酸的浓度为0.1-ο.3mg/L，活性炭的浓度为1.5-2.5g/L，待茎段萌发腋芽并长Icm以上时，将新芽切下接种至第二培养基上诱导丛生芽，所述第二培养基是在MS培养基基础上添加了细胞分裂素、激动素、荼乙酸和活性炭所得，第二培养基中细胞分裂素的浓度为0.5-1.5mg/L，激动素的浓度为0.3-0.8mg/L，荼乙酸的浓度为0.1-0.3mg/L，活性炭的浓度为1.5-2.5g/L ; 第三歩:将丛生芽切成单芽，接种至第三培养基中进行生根培养，所述第三培养基是在1/2MS培养基的基础上添加了吲哚丁酸和活性炭所得，第三培养基中吲哚丁酸和活性炭浓度分别为0.3-0.8mg/L和1.5-2.5g/L，得到生根的试管苗； 第四歩:将生根的试管苗移栽至由重量比2.5-3.5: I的泥炭和珍珠岩混合而成的基质中，浇足水后用塑料薄膜覆盖保温保湿防失水萎蔫，5-10天后揭开薄膜炼苗，每天叶面喷水3-5次，10-20天后施肥料液，25-35天后移栽至灌满纯泥炭的塑料穴盘中，经2_4个月培养后直接移栽至土壤或容器中。2.如权利要求1所述的垂枝型墨西哥落羽杉组织培养方法，其特征在于，所述第一步中，当年萌发的垂枝型墨西哥落羽杉新枝为半木质化的新枝。3.如权利要求1所述的垂枝型墨西哥落羽杉组织培养方法，其特征在于，所述的第一步中的清洗为用洗衣粉或洗洁精冲洗三遍，置自来水龙头下冲洗2h，所述的消毒在无菌室超净台上进行，先用75vol%乙醇溶液消毒lmin，然后用0.2vol %的洁尔敏溶液消毒15min，最后用8vol %次氯酸钠溶液消毒18min。4.如权利要求1所述的垂枝型墨西哥落羽杉组织培养方法，其特征在于，所述的第一培养基中玉米素的浓度为3mg/L，荼乙酸的浓度为0.2mg/L，活性炭的浓度为2.0g/L，琼脂粉浓度为5.5g/L，蔗糖浓度为30g/L，pH值为5.8。5.如权利要求1所述的垂枝型墨西哥落羽杉组织培养方法，其特征在于，所述的第二培养基中细胞分裂素的浓度为lmg/L，激动素的浓度为0.5mg/L，荼乙酸的浓度为0.2mg/L，活性炭的浓度为2g/L。6.如权利要求1所述的垂枝型墨西哥落羽杉组织培养方法，其特征在于，所述的第三培养基中吲哚丁酸和活性炭的浓度分别为0.5mg/L、2.0g/L。7.如权利要求1所述的垂枝型墨西哥落羽杉组织培养方法，其特征在于，所述的新芽培养是在温度24°C、光照强度3000LX及每天光照时间12小时的条件下进行。8.如权利要求1所述的垂枝型墨西哥落羽杉组织培养方法，其特征在于，所述的诱导丛生芽是在温度24°C、光照强度3000LX及每天光照时间12小时的条件下进行。9.如权利要求1所述的垂枝型墨西哥落羽杉组织培养方法，其特征在于，所述的生根培养是在温度24°C、光照强度3000LX及每天光照时间12小时的条件下进行。10.如权利要求1所述的垂枝型墨西哥落羽杉组织培养方法，其特征在于，所述的肥料液中含有0.^^%硝酸铵、0.lwt%磷酸二氢钾、0.1被％硫酸镁。
【专利摘要】本发明提供了一种垂枝型墨西哥落羽杉组织培养方法，其特征在于，包括：选取当年萌发的垂枝型墨西哥落羽杉新枝，剪去针状叶片，冲洗，消毒，用无菌水冲洗后用无菌滤纸吸干水份；在超净台上将第一步得到的新枝切成茎段进行新芽诱导，待茎段萌发腋芽并长1cm以上时，将新芽切下诱导丛生芽；将丛生芽切成单芽，进行生根培养，得到生根的试管苗；将生根的试管苗移栽至由重量比2.5-3.5∶1的泥炭和珍珠岩混合而成的基质中，浇足水后用塑料薄膜覆盖保温保湿防失水萎蔫，炼苗后移栽至灌满纯泥炭的塑料穴盘中，经培养后直接移栽至土壤中。本发明的优点是繁殖率高、繁殖速度快，可实现工厂化生产种苗。
【IPC分类】A01H4/00
【公开号】CN105145368
【申请号】CN201510632331
【发明人】姚德彪, 汤桂钧, 顾建平
【申请人】上海旭东园艺有限公司
【公开日】2015年12月16日
【申请日】2015年9月29日