一种棕点石斑鱼与清水石斑鱼的人工杂交育种方法
【技术领域】
[0001 ]本发明涉及水产养殖技术领域，具体涉及一种棕点石斑鱼与清水石斑鱼的人工杂交育种方法。
【背景技术】
[0002]棕点石斑鱼(学名:Epinephelus fuscoguttatus)，隶属解形目、飽科、石斑鱼属，又称老虎斑、褐点石斑鱼，分布于红海、印度洋非洲东岸至太平洋波利尼西亚、北达琉球群岛、南至澳大利亚、台湾岛以及南海诸岛、澎湖列岛等海域等，栖息深度1-60米，体长可达120厘米，属于暖水性近岸及珊瑚礁鱼类，生活在水质清澈的珊瑚礁、泻湖。肉食性，以鱼类、头足类、甲壳类为食，可做为食用鱼、养殖鱼及观赏鱼。棕点石斑鱼摄食凶猛、生长快，广泛应用于养殖生产。
[0003]清水石斑鱼(EpinepheIus polyphekad1n)，是飽科石斑鱼属的一种，分布于红海、非洲东海岸的法属波利尼西亚、日本南部、澳大利亚的昆士兰州南部、豪勋爵岛等海域，清水石斑鱼属暖水性中下层鱼类。成鱼全身为褐色。尾鳍后缘圆形。栖息于近海底层。目前，还没有用于人工养殖。清水石斑鱼有生长快、肉质鲜甜爽口、容易烹调的特点。
[0004]为获得兼具二种亲本特点的杂交子一代，提供一种棕点石斑鱼与清水石斑鱼人工杂交育种的方法。
【发明内容】
[0005]本发明所要解决的问题是，针对自然物种在经济性状上的不足，设计出一种石斑鱼的种间杂交、得到兼具二亲本优势的批量仔鱼的方法，用于规模化养殖生产。
[0006]本发明为解决其问题所采用的技术方案是:
[0007]—种棕点石斑鱼与清水石斑鱼的人工杂交育种方法，包括以下步骤:
[0008](I)亲本选择
[0009]a.雌性亲本:选择5龄以上、体型正常、无病害、活力强的健康棕点石斑鱼作为雌性亲本；
[0010]b.雄性亲本:选择5龄以上、体型正常、无病害、活力强的健康清水石斑鱼作为雄性亲本；
[0011](2)亲本的培育
[0012]a.采用池塘控温培育亲本，根据二种亲本性腺发育对水温的要求不同，二种亲本分别在不同池塘进行培育，保证二种亲本的性腺发育在时间上达到同步成熟；
[0013]b.棕点石斑鱼亲鱼培育池塘的规格及水温控制:培育亲本的池塘为露天池塘，取自然水温，池塘面积I亩，水深3 — 3.5m，设进、排水口各I个，培育密度200 — 300尾/亩，雌雄比例1:1，当春季水温上升至24°C开始进入强化培育；
[0014]c.清水石斑鱼亲鱼培育池塘的规格及水温控制:培育亲本的池塘须加盖保温棚，春季水温较同期的露天池塘水温高出2°C左右，池塘面积I亩，水深3 — 3.5m，设进、排水口各I个，培育密度150 — 200尾/亩，雌雄比例1:1;春季水温上升至26°C开始进入强化培育；
[0015]d.日常培育的饲料种类与投喂量:二种亲本都以小鱿鱼、蓝圆鰺、鲐鱼作为主要饲料，适合的饲料鱼块长6 — 8cm、宽4一6cm，每天投喂饲料I次，下午投喂，每次投喂量控制在鱼体重的2% — 2.5% ；
[0016]e.强化培育的饲料种类与投喂量:春季水温上升，当露天池塘的水温上升至24°C时，加盖保温棚的池塘水温上升至26°C左右，二种亲同时进入强化培育阶段，二种亲本都以小鱿鱼、蓝圆鰺、鲐鱼作为饲料，每个鱼块饲料中塞入维生素E软胶囊I粒(50mg)投喂，每天投喂I次，日投喂量为亲鱼体重的2 — 3%，实际投喂量受天气、水温等条件影响而有增减；
[0017](3)亲鱼性腺发育程度的检查和判断
[0018]a.对亲本进行强化培育二周后，每周从亲鱼群体中挑选部分个体进行一次成熟度检查；
[0019]b.棕点石斑鱼雌性亲本的检查:从棕点石斑鱼群体中选择雌性个体，置于平台上实施检查，外观上腹部隆起，生殖孔微红，即可初步判定为达到性成熟；
[0020]c.清水石斑鱼雄性亲本的检查:从清水石斑鱼群体中选择雄性个体，置于平台上实施检查，在鱼腹部，用手从鱼腹部向生殖孔方向推挤，能挤出白色精液的个体即已经达到性成熟；
[0021](4)人工受精
[0022]a.采精:取清水石斑鱼成熟的雄性个体，用干毛巾将鱼腹部擦干，酒精棉球对生殖孔消毒，用手在鱼体腹部，从前向生殖孔方向推挤，任乳白色的精液从生殖孔流出，用1ml注射器，将精液吸取，一尾成熟的雄性个体可取得精液3 — 8ml，注入试管中，备用；
[0023]b.挤卵:用湿毛巾将棕点石斑鱼鱼体包裹，暴露生殖孔，操作者戴上乳胶手套，用手指插入鱼的生殖孔，将生殖孔打开，然后用手在鱼腹部从前向生殖孔方向推挤，成熟卵子即可流出，在生殖孔下方用盆接住流出的卵子；
[0024]c.人工授精:向盛有卵子的盆内加入干净海水，I千克卵子加入海水10L，一边加水一边轻轻搅动，同时加入经过海水稀释的清水石斑鱼精液，加入量为每千克卵子1ml，精卵混匀之后静置3 — 5min，之后用干净的海水冲洗受精卵3 — 4遍；
[0025](5)受精卵的孵化
[0026]准备一个容积500L、底部设有排水阀的孵化桶，在孵化桶内放置气石充气，将经过步骤(4)处理过的受精卵放入孵化桶中孵化，受精卵孵化条件为水温25 — 30°C，盐度28 —33，pH7.8?8.5，孵化密度为250 — 300万粒受精卵/m3，孵化过程中，发现其中有死卵或未受精卵要及时排除，每2小时换水一次，每次换水量为孵化桶容积的一半，以保持孵化桶内海水的清新；
[0027](6)受精卵的包装运输
[0028]a.杂种受精卵经孵化8小时左右，胚胎发育至原肠期，即可将受精卵包装、运输至育苗场，受精卵在孵化24 — 26小时后，即可孵出仔鱼，用于人工育苗；
[0029]b.包装运输方法是用尼龙袋充氧运输法，一只70cm X 40cm的尼龙袋，装上过滤海水5 — 8L，约占尼龙袋容积的1/4，放入受精卵100g，排除袋内空气，充进氧气并扎紧袋口，再用纸箱或泡沫塑料箱包装好，立即装上运输工具。
[0030]在本发明中，所述步骤(4)a中，将取出的精液注入试管，密封，4°C暂存，备用，暂存的精液在一周内仍有授精能力。
[0031]在本发明中，所述步骤(4)b中，对成熟雌性棕点石斑鱼合适的挤卵时机是农历初一至初六，人工授精操作的当天下午，提前从培育池塘中起捕棕点石斑鱼亲鱼，选择出雌性亲鱼，暂养于水泥池中，于20:00 — 24:00实施人工授精。
[0032]在本发明中，所述步骤(4)c中，清水石斑鱼精液较浓密，须用海水稀释后使用，稀释的方法是:将备用的精液取出Iml，注入烧杯，加入91m海水，晃动烧杯，将精液与海水快速混均，立即加入到已经加入海水的卵子中，从精子加入海水稀释至将稀释后的精液加入卵子中，全过程在I分钟内完成。
[0033]在本发明中，杂种鱼的受精卵在24— 25°C度水温条件下，胚胎发育时间约24 —26h，如果预计到达目的地之前仔鱼可能在运输过程中孵化出仔鱼，则不能使用受精卵运输的方式，应改为运输仔鱼。
[0034]在本发明中，所述步骤(6)中，运输受精卵，气温高时，包装箱中可加上适量冰袋降温，适宜的运输温度为24 — 25°C度。
[0035]综上所述，本发明为一种石斑鱼属间杂交育种方法，本发明的有益效果:
[0036](I)清水石斑鱼目前未用于人工养殖，本发明选择棕点石斑鱼作为雌性亲本、清水