，即可将受精卵包装、运输至育苗场，受精卵在孵化24 — 26小时后，即可孵出仔鱼，用于人工育苗。包装运输方法采用用尼龙袋充氧运输法，一只70cmX40cm的尼龙袋，装上过滤海水5 — 8L，约占尼龙袋容积的1/4，放入受精卵100g，排除袋内空气，充进氧气并扎紧袋口，再用纸箱或泡沫塑料箱包装好，立即装上运输工具。运输受精卵，气温高时，包装箱中可加上适量冰袋降温，适宜的运输温度为24 — 25°C度。
[0068]运输仔鱼的方法:待仔鱼全部出膜后，停止充气5?1min，仔鱼上浮到水面，死胚胎沉底，用排除死卵或未受精卵的方法将死胚胎和下层多余的水排除，从孵化桶的上层用盆小心将仔鱼取出，用尼龙袋充氧运输法，每千克受精卵孵出的仔鱼，需要包装成30袋。
[0069]综上所述，本发明实现了棕点石斑鱼与清水石斑鱼的种间杂交，获得了兼具二种亲本特点的杂交子一代鱼的仔鱼，用于后续的人工养殖，培育出的杂交鱼养殖性能好，肉质鲜美，性价比高。
[0070]以上对本发明的较佳实施方式进行了具体说明，但本发明并不限于所述实施例，熟悉本领域的技术人员在不违背本发明精神的前提下还可作出种种的等同变型或替换，这些等同的变型或替换均包含在本申请权利要求所限定的范围内。
【主权项】
1.一种棕点石斑鱼与清水石斑鱼的人工杂交育种方法，其特征在于，包括以下步骤: (1)亲本选择 a.雌性亲本:选择5龄以上、体型正常、无病害、活力强的健康棕点石斑鱼作为雌性亲本； b.雄性亲本:选择5龄以上、体型正常、无病害、活力强的健康清水石斑鱼作为雄性亲本； (2)亲本的培育 a.采用池塘控温培育亲本，保证二种亲本的性腺发育在时间上达到同步成熟； b.棕点石斑鱼亲鱼培育池塘的规格及水温控制:培育亲本的池塘为露天池塘，取自然水温，池塘面积I亩，水深3 — 3.5m，设进、排水口各I个，培育密度200 — 300尾/亩，雌雄比例1:1，当春季水温上升至24°C开始进入强化培育； c.清水石斑鱼亲鱼培育池塘的规格及水温控制:培育亲本的池塘须加盖保温棚，春季水温较同期的露天池塘水温高出2°C左右，池塘面积I亩，水深3 — 3.5m，设进、排水口各I个，培育密度150 — 200尾/亩，雌雄比例1:1;春季水温上升至26°C开始进入强化培育； d.日常培育的饲料种类与投喂量:二种亲本都以小鱿鱼、蓝圆鰺、鲐鱼作为主要饲料，适合的饲料鱼块长6 — 8cm、宽4 一 6cm，每天投喂饲料I次，下午投喂，每次投喂量控制在鱼体重的2%—2.5% ； e.强化培育的饲料种类与投喂量:春季水温上升，当露天池塘的水温上升至24°C时，加盖保温棚的池塘水温上升至26°C左右，二种亲同时进入强化培育阶段，二种亲本都以小鱿鱼、蓝圆鰺、鲐鱼作为饲料，每个鱼块饲料中塞入维生素E软胶囊I粒(50mg)投喂，每天投喂I次，日投喂量为亲鱼体重的2 — 3%，实际投喂量受天气、水温等条件影响而有增减； (3)亲鱼性腺发育程度的检查和判断 a.对亲本进行强化培育二周后，每周从亲鱼群体中挑选部分个体进行一次成熟度检查； b.棕点石斑鱼雌性亲本的检查:从棕点石斑鱼群体中选择雌性个体，置于平台上实施检查，外观上腹部隆起，生殖孔微红，即可初步判定为达到性成熟； c.清水石斑鱼雄性亲本的检查:从清水石斑鱼群体中选择雄性个体，置于平台上实施检查，在鱼腹部，用手从鱼腹部向生殖孔方向推挤，能挤出白色精液的个体即已经达到性成熟； (4)人工受精 a.采精:取清水石斑鱼成熟的雄性个体，用干毛巾将鱼腹部擦干，酒精棉球对生殖孔消毒，用手在鱼体腹部，从前向生殖孔方向推挤，任乳白色的精液从生殖孔流出，用1ml注射器，将精液吸取，一尾成熟的雄性个体可取得精液3 — 8ml，注入试管中，备用； b.挤卵:用湿毛巾将棕点石斑鱼鱼体包裹，暴露生殖孔，操作者戴上乳胶手套，用手指插入鱼的生殖孔，将生殖孔打开，然后用手在鱼腹部从前向生殖孔方向推挤，成熟卵子即可流出，在生殖孔下方用盆接住流出的卵子； c.人工授精:向盛有卵子的盆内加入干净海水，I千克卵子加入海水10L，一边加水一边轻轻搅动，同时加入经过海水稀释的清水石斑鱼精液，加入量为每千克卵子1ml，精卵混匀之后静置3 — 5min，之后用干净的海水冲洗受精卵3 — 4遍； (5)受精卵的孵化 准备一个容积500L、底部设有排水阀的孵化桶，在孵化桶内放置气石充气，将经过步骤(4)处理过的受精卵放入孵化桶中孵化，受精卵孵化条件为水温25 — 30°C，盐度28 — 33，pH7.8?8.5，孵化密度为250 — 300万粒受精卵/m3，孵化过程中，发现其中有死卵或未受精卵需及时排除，每2小时换水一次，每次换水量为孵化桶容积的一半，以保持孵化桶内海水的清新； (6)受精卵的包装运输 a.杂种受精卵经孵化8小时左右，胚胎发育至原肠期，即可将受精卵包装、运输至育苗场，受精卵在孵化24 — 26小时后，即可孵出仔鱼，用于人工育苗； b.包装运输方法是用尼龙袋充氧运输法，一只70cmX 40cm的尼龙袋，装上过滤海水5 —8L，约占尼龙袋容积的1/4，放入受精卵100g，排除袋内空气，充进氧气并扎紧袋口，再用纸箱或泡沫塑料箱包装好，立即装上运输工具。2.根据权利要求1中一种棕点石斑鱼与清水石斑鱼的人工杂交育种方法，其特征在于:所述步骤(4)a中，将取出的精液注入试管，密封，4°C暂存，备用，暂存的精液在一周内仍有授精能力。3.根据权利要求2所述的一种棕点石斑鱼与清水石斑鱼的人工杂交育种方法，其特征在于:所述步骤(4)b中，对成熟雌性棕点石斑鱼合适的挤卵时机是农历初一至初六，人工授精操作的当天下午，提前从培育池塘中起捕棕点石斑鱼亲鱼，选择出雌性亲鱼，暂养于水泥池中，于20:00 — 24:00实施人工授精。4.根据权利要求4所述的一种棕点石斑鱼与清水石斑鱼的人工杂交育种方法，其特征在于:所述步骤(4)c中，清水石斑鱼精液较浓密，须用海水稀释后使用，稀释的方法是:将备用的精液取出Iml，注入烧杯，加入91m海水，晃动烧杯，将精液与海水快速混均，立即加入到已经加入海水的卵子中，从精子加入海水稀释至将稀释后的精液加入卵子中，全过程在I分钟内完成。5.根据权利要求5所述的一种棕点石斑鱼与清水石斑鱼的人工杂交育种方法，其特征在于:杂种鱼的受精卵在24 — 25°C度水温条件下，胚胎发育时间约24 — 26h，如果预计到达目的地之前仔鱼可能在运输过程中孵化出仔鱼，则不能使用受精卵运输的方式，改为运输仔鱼。6.根据权利要求5所述的一种棕点石斑鱼与清水石斑鱼的人工杂交育种方法，其特征在于:所述步骤(6)中，运输受精卵，气温高时，包装箱中需加上适量冰袋降温，适宜的运输温度为24 — 25°C度。
【专利摘要】本发明公开了一种棕点石斑鱼与清水石斑鱼的人工杂交育种方法，包括以下步骤：(1)亲本选择、(2)亲本的培育、(3)亲鱼性腺发育程度的检查和判断、(4)人工受精、(5)受精卵的孵化、(6)受精卵的包装运输。本发明实现了棕点石斑鱼与清水石斑鱼的属间杂交，获得了兼具二种亲本特点的杂交子一代鱼的仔鱼，用于后续的人工养殖，培育出的杂交鱼养殖性能好，肉质鲜美，性价比高，为鱼类各个苗种提供了一个新的品种。
【IPC分类】A01K61/00
【公开号】CN105532545
【申请号】CN201610076634
【发明人】蔡春有, 陈国华, 蔡有森, 蔡四川, 蔡建顺, 蔡惠明, 蔡金泉
【申请人】海南晨海水产有限公司
【公开日】2016年5月4日
【申请日】2016年2月3日