述应用中,所述大麦或燕麦芽粉的制备方法中,所述烘干的温度为60°C。
[0032] 上述应用中,所述大麦或燕麦芽汁的糖度为6°Brix-20°Brix,具体为6° Brix、12° Brix或20° Brix〇
[0033] 上述应用中,所述发酵培养基为如下1)、2)、3)或4)所示:
[0034] 1)、由大麦或燕麦芽汁和NH4C1组成;所述NH4C1质量占所述发酵培养基质量的 0.5%,所述大麦芽汁的糖度为12°Brix;
[0035] 2)、由所述大麦或燕麦籽实体的水提取物与蛋白胨组成;所述蛋白胨占所述发酵 培养基质量的0.1%;
[0036] 3)、由大麦或燕麦籽实体粉、(NH4)2S〇4和水组成;所述(NH4)2S〇4占所述发酵培养基 质量的0.5%;所述水的质量是所述大麦籽实体粉质量的1倍;
[0037] 4)、由大麦或燕麦芽粉、(NH4)2S〇4和水组成;所述(NH4)2S〇4占所述发酵培养基质量 的0.5%;所述水的质量是所述大麦籽实体粉质量的1倍。
[0038] 上述应用中,所述发酵的温度为26°C_30°C或26°C或30°C ;所述发酵的时间为5d-7d或5d或6d或7d。
[0039] 上述应用中,所述发酵过程中还可搅拌;
[0040] 上述应用中,所述发酵过程中还可通风;
[0041 ] 上述应用中,所述发酵中溶氧为25%-30%或25%或30%;
[0042] 上述应用中,所述发酵过程中,发酵培养基还可静置。
[0043] 上述应用中,所述搅拌的速度为150r/min-200r/min或150r/min或200r/min;所述 通风量为150L/h。
[0044] 上述应用中,所述裂裙菌(Schi zophyl lum commune )为编号如下的裂裙菌 (Schizophyllum commune)菌株中的至少一种:CGMCC AS5.53、CGMCC AS5.113、CGMCC AS5.115、CGMCC AS5.116、CGMCC AS5.117、CGMCC AS5.118、CGMCC AS5.119、CGMCC AS5·120、CGMCC AS5.131、CGMCC AS5.386。
[0045] 动物游泳衰竭和游泳代谢实验结果表明,本发明裂褶菌发酵物具有显著的抗疲劳 作用,可以成为军用抗疲劳食品的功能基料。
【具体实施方式】
[0046] 以下的实施例便于更好地理解本发明,但并不限定本发明。下述实施例中的实验 方法,如无特殊说明,均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料,如无特殊说明,均为自 常规生化试剂商店购买得到的。以下实施例中的定量试验,均设置三次重复实验,结果取平 均值。
[0047] 中温α-淀粉酶购自苏州维邦生物科技有限公司。产品特性:外观黄褐色粉末,酶活 力2 4000u/g,水份< 8 % αΗ的影响:稳定pH范围6 · 0~7 · 0,最适ρΗ6 · 0 4Η5 · 0以下失活严 重。温度的影响:在60 °C以下较为稳定;最适作用温度为60~70°C;在70~90 °C之间。使用方 法:一般每克原料加酶6~12个单位。
[0048]实施例中所用的各个裂褶菌菌株,均获自中国普通微生物菌种保藏管理中心 (China General Microbiological Culture Collection Center,CGMCC),网址http: // www. cgmcc.net/index.html,具体信息见表 1 〇 [0049]表1各个裂褶菌菌株的具体信息
[0051] 实施例1、裂褶菌发酵物的制备
[0052] 一、各种培养基的制备
[0053] 大麦籽实体为未脱皮的大麦籽粒。
[0054] 1、大麦芽、大麦芽粉、大麦芽汁的制备
[0055] 大麦芽的制备:在17°C的条件下,将大麦籽实体用洁净的自来水浸泡4h,去除多余 水分,使其在室温(25 °C)保持湿润20h,再将其室温放置4d,得到大麦芽。
[0056] 大麦芽粉的制备:将大麦芽60°C烘干,去根,粉碎过40目筛,即得到大麦芽粉;
[0057]大麦芽汁的制备:将大麦芽粉加4倍体积的水,在60°C保温4h(每0.5h搅拌一次), 即得到大麦芽汁(经检测,糖度为20° Brix)。
[0058] 12°8^1、6°841的大麦芽汁分别是用水稀释20°8^1的大麦芽汁得到的。
[0059] 2、大麦粉、大麦粉汁的制备
[0060]大麦粉的制备:将大麦籽实体磨成粉状,过40目筛,得到大麦粉;
[0061 ]大麦粉汁的制备:取200g大麦粉加1L水煮沸30min,降温至60°C,加入中温α-淀粉 酶酶解至碘反应无蓝色后,用四层纱布过滤,取汁、用蒸馏水定容至1L,即得到大麦粉汁。 [0062] 3、培养基:
[0063] (1)斜面培养基(g/L):马铃薯200.0,葡萄糖20.0,MgS〇4 · 7Η20 1·5,ΚΗ2Ρ〇4 3.0, 维生素 Βι 0.01,琼脂20,余量为水。
[0064] (2) -级种子培养基(g/L):葡萄糖30、黄豆粉10、酵母膏1.0、MgS〇4 · 7H20 0.5、 KH2P〇4 1.0、维生素出0.01,余量为水。
[0065] (3)二级种子培养基:溶剂为12°Brix大麦芽汁;溶质及其浓度如下:0.5%NH4C1。
[0066] (4)发酵培养基:
[0067] 发酵培养基l:12°Brix大麦芽汁、0.5%NH4C1。
[0068] 发酵培养基2:大麦粉汁、0.1 %蛋白胨。
[0069] 发酵培养基3:大麦粉、0.5% (NH4)2S〇4、1倍于大麦粉质量的水。
[0070] 发酵培养基4:大麦芽粉、0.5%(NH4)2S〇4、l倍于大麦芽粉质量的水。
[0071] 这里所述浓度(%)是指溶质(如氮源)在培养基中的质量百分比;Brix是大麦芽汁 中糖度的单位。
[0072]上述培养基均pH值自然。
[0073]二、发酵
[0074](一)液态通气培养法制备抗疲劳发酵物 [0075] (1)斜面培养
[0076]将裂褶菌5.53的菌丝接入斜面培养基中部,26°C培养6d。
[0077] (2)-级液体种子培养
[0078] 用接种钩从步骤(1)中培养好的斜面中切lcm2带培养基的斜面菌丝接入装有一级 种子培养基的500ml三角瓶中(装液量为30%),在26°C、150r/min条件下培养3d,得到一级 液体种子。
[0079] (3)二级种子培养
[0080]将培养好的一级液体种子按照10%接种量接入装有二级种子培养基的发酵罐(装 液量为70% )中,在26°C、150r/min条件下培养3d,得到二级液体种子。
[0081] (4)发酵灌培养
[0082] 7L发酵罐中装入5L发酵培养基1,将步骤(3)中得到的二级液体种子按照10%的接 种量(〇. 5L)接入发酵罐中,溶氧控制为30 %,在26 °C,搅拌速度为200r/min,通气量为150L/ 11,发酵5(1。
[0083] (5)制备抗疲劳发酵液
[0084]终止发酵后,将发酵物(发酵灌中的所有物质记作发酵物)经板框过滤机(采用普 通滤布)过滤,将菌体与发酵液分离,所得滤液即为抗疲劳发酵液。
[0085] (6)抗疲劳发酵液的后处理
[0086]①采用真空浓缩装置对抗疲劳发酵液进行真空浓缩处理,蒸发温度控制在70°C以 下,将发酵液浓缩至干物质浓度为50 %以上。
[0087] ②配料、造粒
[0088] 将浓缩后的发酵液与变性淀粉、天然甜味剂、酸味剂和天然香精在混料机中湿法 混合,混合后的物料通过造粒机造粒。
[0089] (3)干燥
[0090] 将造好的颗粒物料通过流化床干燥。
[0091 ](二)液态静态培养法制备抗疲劳发酵物
[0092] (1)斜面菌种培养、(2)-级液体种子培养和(3)二级液体种子培养,方法与实验 (一)中所述相同。
[0093] (4)静态发酵
[0094]将步骤(3)中培养好的二级液体种子按照10% (体积比)的接种量接入培养容器 中,lm2培养容器装1.94L发酵培养基2,培养基表面积3.44 (m2/m3),在26 °C静止培养7d。 [0095] (5)制备抗疲劳发酵液
[0096] 终止发酵后,将发酵物(发酵灌中的所有物质记作发酵物)经板框过滤机(采用普 通滤布)过滤,将菌体与发酵液分离,所得滤液即为抗疲劳发酵液。
[0097] (6)抗疲劳发酵物的后处理:方法与实验(一)中所述相同。
[0098](