1.一种将信使rna(mrna)包封在脂质纳米颗粒中的方法，所述方法包括：
混合包含预先形成的脂质纳米颗粒和mrna的溶液，使得形成包封mrna的脂质纳米颗粒，
其中所述预先形成的脂质纳米颗粒和/或所述mrna以不大于0.5mg/ml的浓度存在于所述溶液中。
2.如权利要求1所述的方法，其中所述预先形成的脂质纳米颗粒以不大于0.4mg/ml、0.3mg/ml、0.25mg/ml、0.2mg/ml、0.15mg/ml、0.1mg/ml、0.05mg/ml或0.01mg/ml的浓度存在。
3.如权利要求1或2所述的方法，其中所述mrna以不大于0.4mg/ml、0.3mg/ml、0.25mg/ml、0.2mg/ml、0.15mg/ml、0.1mg/ml、0.05mg/ml、或0.01mg/ml的浓度存在于所述溶液中。
4.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述预先形成的脂质纳米颗粒和所述mrna中的每一者以不大于0.1mg/ml的浓度存在于所述溶液中。
5.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述预先形成的脂质纳米颗粒和所述mrna中的每一者以不大于0.05mg/ml的浓度存在于所述溶液中。
6.如前述权利要求中任一项所述的方法，所述方法还包括稀释所述溶液以达到不大于0.5mg/ml的浓度的步骤。
7.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述预先形成的脂质纳米颗粒包含peg修饰的脂质。
8.如权利要求7所述的方法，其中所述peg修饰的脂质占所述脂质纳米颗粒中的总脂质的小于3％、小于2.5％、小于2％、小于1.5％或小于1％。
9.如权利要求7或8所述的方法，其中所述peg修饰的脂质占所述脂质纳米颗粒中的总脂质的0.1％至3％、或0.75％至2.5％、或0.5％至2％。
10.如权利要求7至9中任一项所述的方法，其中所述peg修饰的脂质占所述脂质纳米颗粒中的总脂质的约1％。
11.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述包含预先形成的脂质纳米颗粒和mrna的溶液包含小于10mm的柠檬酸盐。
12.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述包含预先形成的脂质纳米颗粒和mrna的溶液包含小于25％的非水性溶剂。
13.如前述权利要求中任一项所述的方法，所述方法还包括在所述混合之后将所述脂质纳米颗粒和所述mrna加热至高于环境温度的温度。
14.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中在所述混合之前将所述mrna和/或所述预先形成的脂质纳米颗粒加热至高于环境温度的温度。
15.如权利要求13或14所述的方法，其中所述温度为或大于约30℃、37℃、40℃、45℃、50℃、55℃、60℃、65℃或70℃。
16.如权利要求13至15中任一项所述的方法，其中所述温度在约25-70℃、约30-70℃、约35-70℃、约40-70℃、约45-70℃、约50-70℃或约60-70℃的范围内。
17.如权利要求13-16中任一项所述的方法，其中所述温度为约65℃。
18.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述预先形成的脂质纳米颗粒通过将溶解在乙醇中的脂质与水性溶液混合而形成。
19.如权利要求18所述的方法，其中所述预先形成的脂质纳米颗粒还包含一种或多种阳离子脂质和一种或多种非阳离子脂质。
20.如权利要求19所述的方法，其中所述一种或多种阳离子脂质选自由以下项组成的组：ckk-e12、of-02、c12-200、mc3、dlindma、dlinkc2dma、ice(基于咪唑)、hgt5000、hgt5001、hgt4003、dodac、ddab、dmrie、dospa、dogs、dodap、dodma和dmdma、dodac、dlendma、dmrie、clindma、cplindma、dmoba、docarbdap、dlindap、dlincarbdap、dlincdap、dlinssdma、klin-k-dma、dlin-k-xtc2-dma、3-(4-(双(2-羟基十二烷基)氨基)丁基)-6-(4-((2-羟基十二烷基)(2-羟基十一烷基)氨基)丁基)-1,4-二噁烷-2,5-二酮(靶标23)、3-(5-(双(2-羟基十二烷基)氨基)戊-2-基)-6-(5-((2-羟基十二烷基)(2-羟基十一烷基)氨基)戊-2-基)-1,4-二噁烷-2,5-二酮(靶标24)、ccbene、ml7以及它们的组合。
21.如权利要求20所述的方法，其中所述一种或多种阳离子脂质包括ccbene。
22.如权利要求20所述的方法，其中所述一种或多种阳离子脂质包括ml7。
23.如权利要求20所述的方法，其中所述一种或多种阳离子脂质包括dlinssdma。
24.如权利要求20所述的方法，其中所述一种或多种阳离子脂质包括核糖阳离子脂质。
25.如权利要求19所述的方法，其中所述一种或多种非阳离子脂质选自dspc(1,2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱)、dppc(1,2-二棕榈酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱)、dope(1,2-二油烯基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺)、dopc(1,2-二油烯基-sn-甘油-3-磷脂酰胆碱)、dppe(1,2-二棕榈酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺)、dmpe(1,2-二豆蔻酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺)、dopg(1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸-(1'-rac-甘油))。
26.如权利要求7-25中任一项所述的方法，其中所述peg修饰的脂质包含长度为最多5kda的聚(乙二醇)链，所述聚(乙二醇)链共价连接至具有一条或多条c6-c20长度的烷基链的脂质。
27.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中大于约50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％的所述预先形成的脂质纳米颗粒具有在75-150nm范围内的尺寸。
28.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中基本上所有的所述预先形成的脂质纳米颗粒具有在75-150nm范围内的尺寸。
29.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中大于约70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％的所述预先形成的脂质纳米颗粒具有在50-80nm范围内的尺寸。
30.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述方法导致大于约80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％的包封率。
31.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述方法导致大于约60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％的mrna回收率。
32.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述方法导致脂质纳米颗粒基本上没有聚集。