德森氏隐抱子虫（Cryptosporidium andersoni)、赖安氏隐 抱子虫（Cryptosporidium ryanae)、鼠隐抱子虫（Cryptosporidium muris)、普遍隐抱子 虫（Cryptosporidium ubiquitum)、人隐抱子虫（Cryptosporidium hominis)、犬隐抱子 虫（Cryptosporidium canis)、猫隐抱子虫（Cryptosporidium felis)、贝利氏隐抱子虫 (Cryptosporidium baileyi)、火鸡隐抱子虫（Cryptosporidium meleagridis)或肖氏隐抱 子虫（Cryptosporidium xiaoi) 〇
[0069] "小隐孢子虫、牛隐孢子虫、安德森氏隐孢子虫、赖安氏隐孢子虫、鼠隐孢子虫、 普遍隐孢子虫、人隐孢子虫、犬隐孢子虫、猫隐孢子虫、贝利氏隐孢子虫、火鸡隐孢子虫 或肖氏隐孢子虫"意指能够在大部分哺乳动物中引起水性质的肠病症的顶复门的原生 动物。这些寄生虫尤其能够在具有未成熟或缺陷的免疫系统的绵羊、山羊、猪、牛、马科 动物、骆驼、骆驼科动物、犬科动物、猫科动物或人中引起隐孢子虫病（Fayer，2004, Vet. Parasitol.，126, 37-59)〇
[0070] 本发明还涉及具有通过涉及micl和mic3这两个基因的遗传修饰而失活的MICl 和MIC3这两种粘附素的鼠弓形体或犬新孢子虫株系，其用于在哺乳动物中预防或治疗与 隐孢子虫科的顶复门动物相关的病理学状况之中使用，所述与隐孢子虫科的顶复门动物相 关的病理学状况为隐孢子虫病。
[0071] 本发明还涉及从其天然环境中分离并具有免疫刺激效应的鼠弓形体或犬新孢子 虫株系，其用于在哺乳动物中预防或治疗与隐孢子虫科的顶复门动物相关的病理学状况之 中使用，所述鼠弓形体或犬新孢子虫株系具有通过涉及mic-1和mic-3这两个基因的遗传 修饰而失活的MIC-I和MIC-3这两种粘附素，并且所述与隐孢子虫科的顶复门动物相关的 病理学状况为隐孢子虫病。
[0072] 本发明还涉及从其天然环境中分离并具有免疫刺激效应的鼠弓形体或犬新孢子 虫株系，其用于在哺乳动物中预防或治疗与隐孢子虫科的顶复门动物相关的病理学状况之 中使用，所述鼠弓形体或犬新孢子虫株系具有通过涉及micl和mic3这两个基因的遗传修 饰而失活的MICl和MIC3这两种粘附素，并且按照20至IO 9个速殖子向所述哺乳动物施用 所述鼠弓形体或犬新孢子虫株系。
[0073] "速殖子"意指鼠弓形体或犬新孢子虫的快速复制形式。速殖子具有月牙形状， 其大小变化为5-8X2-3ym。寄生虫的顶端部分包含参与寄生虫穿透入宿主细胞中的类 锥体。微线体、棒状体和致密颗粒构成了速殖子的三种主要器官，速殖子还包含核、顶体 (apicoplast)、高尔基体、内质网和类似于线粒体的细胞器。
[0074] 确定为了哺乳动物的预防性治疗的速殖子的有效剂量使得能够限制对隐孢子虫 病负有责任的致病因子的感染或传播。这样的治疗将可以由本领域技术人员依照哺乳动物 的年龄和免疫学状态进行调整和/或重复，进行与需要一样多的次数。
[0075] 速殖子与哺乳动物的接触不仅在具有隐孢子虫病所固有的症状的哺乳动物上而 且在不具有隐孢子虫病的任何症状但与其他被小隐孢子虫或被能够诱导隐孢子虫病的其 他隐孢子虫属物种感染的哺乳动物相接触的哺乳动物上是可实现的。
[0076] 根据一个特别的实施方案，用于根据本发明的用途的从其天然环境中分离并具有 免疫刺激效应的选自弓形体属物种或新孢子虫属物种的肉孢子虫科株系以从包括下列或 由下列组成的组中选择的盖仑氏形式存在：液体悬浮体、固体或液体分散体、粉剂、糊剂或 冻干物。
[0077] 所述盖仑氏形式由本领域技术人员依照所选择的施用方式进行调整。可以设想所 有传统的施用方式：通过肠胃外途径（静脉内、皮下、真皮内、肌内、腹膜内和鼻内），或者通 过肠途径。
[0078] 根据一个更特别的实施方案，用于根据本发明的用途的从其天然环境中分离并具 有免疫刺激效应的选自弓形体属物种或新孢子虫属物种的肉孢子虫科株系与至少一种其 他抗原、或至少一种佐剂、或至少一种稳定剂、或至少一种防腐剂或者至少两种所述产品的 混合物相联合，从而使得能够增强所述哺乳动物的免疫应答。
[0079] "抗原"意指源自寄生虫或除了弓形体属物种或新孢子虫属物种之外的其他致病 因子的以其天然或突变形式的任何天然或重组蛋白质，其能够在哺乳动物中诱导细胞或体 液免疫应答。弓形体属物种或新孢子虫属物种的突变株与这样抗原进行联合的目的是放大 哺乳动物的免疫应答，并因此赋予它以更好的针对顶复门动物感染的保护。
[0080] "佐剂"意指能够加强和延长针对所靶向的抗原的免疫应答的任何物质。为了使得 免疫应答更有效而牵涉的机制取决于所使用的佐剂。佐剂是本领域技术人员熟知的物质， 其中尤其包括铝盐、角鲨烯、皂苷、细菌的组成成分或毒素或者某些蛋白质（蛋白胨、白蛋 白、酪蛋白）。
[0081] "稳定剂或防腐剂"意指允许弓形体属物种或新孢子虫属物种的株系在其包装内 完好保存的化合物。
[0082] 稳定剂或防腐剂是本领域技术人员熟知的物质，其中尤其包括碳水化合物（山 梨糖醇、甘露醇、乳糖、蔗糖、葡萄糖、右旋糖酐、海藻糖）、极性有机溶剂例如DMSO(二甲亚 砜）、聚山梨酯。
[0083] "增强免疫应答"意指免疫系统的各种不同途径的激活。在具有未成熟或缺陷的免 疫系统的哺乳动物中，它涉及通过不同类别的细胞因子（例如干扰素或白介素）的合成增 加来激活非特异性应答。在这些细胞因子之中，可以提及白介素-12(IL-12)，其将会激活 ⑶4+或⑶8+LT细胞以及NK。这些被激活的细胞自身将会分泌干扰素-y (IFN- y )，其在下 述的免疫学机制中发挥作用：控制许多细胞内寄生虫的繁殖，如此从而阻止其在生物体内 蔓延。在具有成熟的免疫系统的成年哺乳动物中，除了非特异性应答以外，免疫应答的增强 还经过适应性免疫（响应于外来抗原而发生的特异性增殖）。
[0084] 本发明还涉及用于在哺乳动物中诱导免疫应答的方法，所述方法包括下述步骤： 向所述哺乳动物施用从其天然环境中分离并具有免疫刺激效应的选自弓形体属物种或新 孢子虫属物种的肉孢子虫科株系的速殖子，从而使得能够诱导免疫应答。
[0085]本发明还涉及用于在新生哺乳动物中诱导免疫应答的方法，所述方法包括下述步 骤：向所述新生哺乳动物施用从其天然环境中分离并具有免疫刺激效应的选自弓形体属物 种或新孢子虫属物种的肉孢子虫科株系的速殖子，从而使得能够诱导免疫应答。
[0086] "免疫应答"意指由抗原的识别和旨在消除所述抗原的反应构成的两个必要阶段。 当抗原首次进入生物体中时，非特异性免疫应答被激活。它牵涉非克隆机制，因为它不需要 特异的细胞克隆。通过该非特异性应答而产生的炎症反应将会导向适应性免疫。该应答牵 涉特异地识别抗原的细胞，并且然后将会导致克隆扩充。该克隆扩充将会是非常有效的免 疫应答和记忆应答（从抗原第二次进入生物体中起的特异性免疫应答）的根源。
[0087]根据一个特别的实施方案，在根据本发明的方法中，所述哺乳动物为新生动物。
[0088] 根据一个更特别的实施方案，在根据本发明的方法中，所述哺乳动物为人类或动 物。
[0089] 根据一个更加特别的实施方案，在根据本发明的方法中，所述动物属于包括下列 或由下列组成的组：绵羊、山羊、猪、牛、马科动物、骆驼科动物、犬科动物或猫科动物。
[0090] 根据另一个实施方案，在根据本发明的方法中，所述选自弓形体属物种或新孢子 虫属物种的肉孢子虫科株系至少具有通过涉及基因micl和/或mic3中的至少一个的遗传 修饰而失活的粘附素MICl和/或粘附素MIC3。
[0091] 根据另一个特别的实施方案，在根据本发明的方法中，所述选自弓形体属物种或 新孢子虫属物种的肉孢子虫科株系具有通过涉及micl和mic3这两个基因的遗传修饰而失 活的MICl和MIC3这两种粘附素。
[0092] 根据另一个更特别的实施方案，在根据本发明的方法中，所述选自弓形体属物种 或新孢子虫属物种的肉孢子虫科株系分别为鼠弓形体或犬新孢子虫。
[0093] 根据另外一个特别的实施方案，在根据本发明的方法中，所述选自弓形体属物 种或新孢子虫属物种的肉孢子虫科株系诱导非特异性免疫应答，其尤其以IL-12和/或 IFN-y的分泌为特征。
[0094] 本发明还涉及用于保护哺乳动物免于与隐孢子虫科的顶复门动物相关的寄生虫 病的方法，所述方法包括下述步骤：向所述哺乳动物施用从其天然环境中分离并具有免疫 刺激效应的选自弓形体属物种或新孢子虫属物种的肉孢子虫科株系的速殖子，从而使得能 够诱导针对所述寄生虫病的保护。
[0095] 根据一个更特别的实施方案，在根据本发明的方法中，所述哺乳动物为新生动物。
[0096] 根据一个更加特别的实施方案，在根据本发明的方法中，所述哺乳动物为人类或 动物。
[0097] 根据一个特别的实施方案，在根据本发明的方法中，所述动物属于包括下列或由 下列组成的组：绵羊、山羊、猪、牛、马科动物、骆驼科动物、犬科动物或猫科动物。
[0098] 根据一个特别的实施方案，在根据本发明的方法中，所述选自弓形体属物种或新 孢子虫属物种的肉孢子虫科株系至少具有通过涉及基因micl和/或mic3中的至少一个的 遗传修饰而失活的粘附素MICl和/或粘附素MIC3。
[0099] 根据一个更特别的实施方案，在根据本发明的方法中，所述选自弓形体属物种或 新孢子虫属物种的肉孢子虫科株系具有通过涉及micl和mic3这两个基因的遗传修饰而失 活的MICl和MIC3这两种粘附素。
[0100] 根据一个更特别的实施方案，在根据本发明的方法中，所述与隐孢子虫科的顶复 门动物相关的寄生虫病为隐孢子虫病。
[0101] 根据另一个更特别的实施方案，在根据本发明的方法中，所述对隐孢子虫病负有 责任的隐孢子虫科的顶复门动物为至少一种从由下列组成的组中选择的顶复门动物：小隐 孢子虫、牛隐孢子虫、安德森氏隐孢子虫、赖安氏隐孢子虫、鼠隐孢子虫、普遍隐孢子虫、人 隐孢子虫、犬隐孢子虫、猫隐孢子虫、贝利氏隐孢子虫、火鸡隐孢子虫或肖氏隐孢子虫。
[0102] 根据一个更加特别的实施方案，在根据本发明的方法中，向所述哺乳动物施用所 述选自弓形体属物种或新孢子虫属物种的肉孢子虫科株系的所述速殖子通过肠途径或通 过肠胃外途径来进行。
[0103] 根据另外一个实施方案，在根据本发明的方法中，向所述哺乳动物施用所述选自 弓形体属物种或新孢子虫属物种的肉孢子虫科株系的所述速殖子在所述哺乳动物暴露于 对隐孢子虫病负有责任的隐孢子虫科的顶复门动物之前进行。
[0104] 根据另外一个实施方案，在根据本发明的方法中，向所述哺乳动物施用所述选自 弓形体属物种或新孢子虫属物种的肉孢子虫科株系的所述速殖子在所述哺乳动物暴露于 对隐孢子虫病负有责任的隐孢子虫科的顶复门动物期间进行。
[0105] 根据另外一个实施方案，在根据本发明的方法中，向所述哺乳动物施用所述选自 弓形体属物种或新孢子虫属物种的肉孢子虫科株系的所述速殖子在所述哺乳动物暴露于 对隐孢子虫病负有责任的隐孢子虫科的顶复门动物之后进行。
[0106] 在上述的三个实施方案中，所述哺乳动物可以为新生动物。
[0107]下面的附图和实施例仅作为本发明的目标的举例说明而给出，它们无论如何不构 成对本发明的限制。
[0108] 附图描述
[0109] 图1:该图图解说明了用于获得株系Neo ncmicl-3 KO的2个步骤的同源重组。同 源重组的第一个步骤允许编码二氢叶酸还原酶（DHFR)的基因整合到基因ncmic3的基因座 处。用乙胺嘧啶来进行的选择使得能够扩增单突变株Neo ncmic3 K0。如此获得的株系Neo ncmic3 KO用于同源重组的第二个步骤，其允许编码嵌合蛋白"氯霉素乙酰转移酶/绿色荧 光蛋白"（CAT-GFP)的基因整合到基因ncmicl的基因座处。然后，用氯霉素来进行的选择 使得能