使免疫原性组合物稳定且抑制其沉淀的新颖调配物的制作方法
【专利说明】
[0001] 本申请是申请号为201310587301. 4、申请日为2007年4月19日、发明名称为"使 免疫原性组合物稳定且抑制其沉淀的新颖调配物"的第一分案申请的第二分案申请。
[0002] 所述第一分案申请是申请号为200780014734. 3、申请日为2007年4月19日、发明 名称为"使免疫原性组合物稳定且抑制其沉淀的新颖调配物"的发明专利申请的分案申请。
技术领域
[0003] 本发明大体来说涉及免疫学、细菌学、疫苗调配、蛋白质稳定性和工艺过程开发领 域。更具体来说，本发明涉及抑制免疫原性组合物沉淀的新颖调配物。
【背景技术】
[0004] 生物制药领域一般公认，改进免疫原性组合物（例如，蛋白质免疫原、多糖-蛋白 质连结物）的稳定性是一个必需且特别需要的目标。举例来说，免疫原性组合物当投与患 者时，须看起来新鲜、品质优良且专门的。免疫原性组合物的稳定性和/或物理性质的任何 改变（诸如颜色改变、变浑或浑浊）都可能使患者或用户对产品失去信心。此外，由于许多 免疫原性调配物是分配于多剂量容器中，故必须确保随时间流逝活性成分（例如，多糖-蛋 白质连结物）的剂量均匀（例如，浑浊溶液可导致不均匀的剂量模式）。另外，免疫原性组 合物须在其"预期"保存期限内具活性，其中使免疫原性组合物失去活性或其它不合需要的 形式（例如，聚集）的任何破坏都会降低产品的总浓度。
[0005] 若干文献中的报道表明，特定免疫原性组合物（例如，蛋白质免疫原、多糖-蛋 白质连结物）的稳定性至少部分取决于特定蛋白质或载体蛋白（胡（Ho)等人，2001 ;胡 (Ho)等人，2002;波尔加诺（Bolgiano)等人，2001)。举例来说，与破伤风类毒素 （tetanus toxoid，TT)或CRM197载体蛋白连结的C群脑膜炎球菌（meningococcal C，MenC)多糖和b 型流感嗜血杆菌（Haemophilus influenzae type b，Hib)多糖的稳定性分析揭示视载体蛋 白而定不同的稳定性概况（胡等人，2002)。在另一研宄（胡等人，2001)中，分析来自两个 不同制造商的MenC-CRM197连结物（胡等人，2001)，其中MenC-CRM 197连结物的连结化学和 连结物多糖的长度不同（二者具有相同的载体蛋白，CRM197)。来自这项研宄的数据进一步 表明，诸如连结化学（例如，直接或经由化学联接基团还原胺化）、连结位点的数量、多糖链 长、PH值、存储缓冲剂、存储温度和冷冻/解冻循环等因素也会影响免疫原性组合物的稳定 性。
[0006] 因此，当研发用于免疫原性组合物的调配物时，须考虑许多因素以确保得到安全、 稳定、稳固和节省成本的产物。所述考虑因素包括（但不限于）免疫原性组合物的化学稳 定性（例如，糖水解、多糖解聚合、蛋白质的蛋白水解或发酵）、免疫原性组合物的物理/热 稳定性（例如，聚集、沉淀、吸附）、免疫原性组合物与容器/密封物系统的相容性、免疫原性 组合物与无活性成分（例如，缓冲剂、盐、赋形剂、防冻剂）之间的相互作用、制造工艺、剂型 (例如，冻干形式、液体）、装运、存储和处理过程中所遇到的环境条件（例如，温度、湿度、剪 切力）和制造与使用之间的时间长度。
[0007] 所属领域中已提出，诱导蛋白质二级和三级构型改变的硅油可能会引起在某些 蛋白质药物制剂中所见的聚集/沉淀（琼斯（Jones)等人，2005)。举例来说，19世纪 80年代的若干报道涉及到由一次性塑料注射器释放的硅油为引起人类胰岛素聚集的病 原体（辰特罗（Chantelau)和伯杰（Berger)，1985;辰特罗（Chantelau)等人，1986;辰 特罗（Chantelau)，1989 ;伯恩思坦（Bernstein)，1987 ;鲍德温（Baldwin)，1988 ;科利尔 (Collier)和道森（Dawson)，1985)。辰特罗等人（1986)观察到，在三次或三次以上从十剂 量的胰岛素制剂抽出（使用硅化一次性注射器）后，小瓶会因硅油污染而开始变浑浊，从而 导致胰岛素聚集和失活（辰特罗等人，1986)。不合理的是，硅油是塑料注射器的必需组分， 因为其用于润滑橡胶柱塞并且便利将柱塞移下注射管（即，硅油改进调配物的可注射性）。
[0008] 此外，由于硅油还用作用于使蛋白质吸附最小化的玻璃小瓶的涂层；在填充程序 期间防止橡胶塞堆集的润滑剂；对玻璃和弹性密封物的可加工性/机械加工性至关重要的 润滑剂；和便利针头穿透小瓶的橡胶塞的润滑剂，故硅油的使用不限于注射器。另外，注射 器、玻璃小瓶、橡胶塞等的硅化并非充分可控制和标准化的过程，且因此各批次间存在硅油 含量高可变性。
[0009] 因此，所属领域中不断需要增强免疫原性组合物的稳定性且抑制其沉淀的调配 物。
【发明内容】
[0010] 本发明大致涉及使免疫原性组合物稳定且抑制其沉淀的新颖调配物。更具体来 说，在某些实施例中，本发明针对抑制容器装置中所包含的免疫原性组合物沉淀的新颖调 配物。在一个特定实施例中，本发明针对使免疫原性组合物对于硅油相互作用、剪切力、装 运搅动等稳定的新颖调配物。
[0011] 因此，在某些实施例中，本发明针对使多糖-蛋白质连结物稳定的调配物，所述调 配物包含（i) pH值缓冲盐水溶液，其中所述缓冲液具有约3. 5到约7. 5的pKa值；（ii)表面 活性剂；和（iii) 一种或多种多糖-蛋白质连结物。在一个特定实施例中，多糖-蛋白质连 结物调配物包含于容器装置中。在某些实施例中，所述容器装置选自一个或多个以下组成 的群组：小瓶、小瓶塞、小瓶密封物（vial closure)、玻璃密封物、橡胶密封物、塑料密封物、 注射器、注射器塞、注射器柱塞、烧瓶、烧杯、量筒、发酵罐、生物反应器、管道、导管、袋子、广 口瓶、安瓿、药筒和一次性笔。在某些实施例中，所述容器装置经硅化。
[0012] 在某些实施例中，调配物的pH值缓冲盐水溶液具有5. 5到7. 5的pH值。在其它 实施例中，缓冲液为磷酸盐、琥珀酸盐、组氨酸或柠檬酸盐。在某些实施例中，缓冲液为最终 浓度为ImM到IOmM且pH值为5. 8到6. 0的琥珀酸盐。在一个特定实施例中，琥珀酸盐缓 冲液的最终浓度为5mM。在其它实施例中，pH值缓冲盐水溶液中的盐包含氯化镁、氯化钾、 氯化钠或其组合。在一个特定实施例中，PH值缓冲盐水溶液中的盐为氯化钠。
[0013] 在另一实施例中，调配物中的表面活性剂选自由以下组成的群组：聚山梨醇 醋20 (polysorbate 20)(吐温20 (Tween?20))、聚山梨醇醋40 (吐温40)、聚山梨醇醋 60(吐温60)、聚山梨醇酯65(吐温65)、聚山梨醇酯80(吐温80)、聚山梨醇酯85(吐 温 85)))、曲通 N-101 (Triton? N-101)、曲通 X-100、氧托夕醇 40 (oxtoxynol 40)、壬 苯醇醚-9(nonoxynol-9)、三乙醇胺、三乙醇胺多肽油酸盐、聚氧化乙稀-660羟基硬脂 酸酯（PEG-15,索罗托H15(Solutol H15))、聚氧化乙烯-35-蓖麻油酸酯（克林莫佛 EL (Cremophor EL?))、大豆卵磷脂（soy lecithin)和泊洛沙姆（poloxamer)。在一个特定 实施例中，表面活性剂为聚山梨醇酯80。在另一实施例中，调配物中聚山梨醇酯80的最终 浓度为每体积调配物至少〇. 01重量％到10重量％聚山梨醇酯80。在其它实施例中，调配 物中聚山梨醇酯80的最终浓度为每体积调配物0. 01重量％聚山梨醇酯80。在其它实施 例中，调配物中聚山梨醇酯80的最终浓度为每体积调配物0. 05重量％聚山梨醇酯80。在 另一实施例中，调配物中聚山梨醇酯80的最终浓度为每体积调配物0. 1重量％聚山梨醇酯 80。在某些其它实施例中，调配物中聚山梨醇酯80的最终浓度为每体积调配物I. 0重量％ 聚山梨醇酯80。在其它实施例中，调配物中聚山梨醇酯80的最终浓度为每体积调配物10. 0 重量％聚山梨醇酯80。
[0014] 在另一实施例中，多糖-蛋白质连结物包含一种或多种肺炎球菌多糖。在某些实 施例中，所述一种或多种肺炎球菌多糖为肺炎链球菌（s. pneumoniae)血清型4多糖、肺炎 链球菌血清型6B多糖、肺炎链球菌血清型9V多糖、肺炎链球菌血清型14多糖、肺炎链球 菌血清型18C多糖、肺炎链球菌血清型19F多糖、肺炎链球菌血清型23F多糖、肺炎链球菌 血清型1多糖、肺炎链球菌血清型3多糖、肺炎链球菌血清型5多糖、肺炎链球菌血清型 6A多糖、肺炎链球菌血清型7F多糖和肺炎链球菌血清型19A多糖。在某些实施例中，多 糖-蛋白质连结物调配物中的蛋白质选自由以下组成的群组：CRM197、破伤风类毒素、霍乱 类毒素、百日咳类毒素、大肠杆菌（E. coli)热敏性类毒素（LT)、肺炎球菌溶血素类毒素、 肺炎球菌表面蛋白A(PspA)、肺炎球菌粘附蛋白A(PsaA)、来自链球菌（Streptococcus)的 C5a肽酶、流感嗜血杆菌蛋白D、卵清蛋白、钥孔戚血蓝蛋白（keyhole limpet haemocyanin， KLH)、牛血清白蛋白（BSA)和结核菌素纯蛋白衍生物（purified protein derivative of tuberculin, PPD)〇
[0015] 在一个特定实施例中，多糖-蛋白质连结物调配物为7价肺炎球菌连结物（7vPnC) 调配物，其包含肺炎链球菌血清型4多糖与CRM197多肽的连结物、肺炎链球菌血清型6B多 糖与CRM197多肽的连结物、肺炎链球菌血清型9V多糖与CRM197多肽的连结物、肺炎链球菌血 清型14多糖与CRM197多肽的连结物、肺炎链球菌血清型18C多糖与CRM197多肽的连结物、肺 炎链球菌血清型19F多糖与CRM197多肽的连结物和肺炎链球菌血清型23F多糖与CRM 197多 肽的连结物。
[0016] 在另一特定实施例中，多糖-蛋白质连结物调配物为13价肺炎球菌连结物 (13vPnC)调配物，其包含肺炎链球菌血清型4多糖与CRM197多肽的连结物、肺炎链球菌血清 型6B多糖与CRM197多肽的连结物、肺炎链球菌血清型9V多糖与CRM 197多肽的连结物、肺炎 链球菌血清型14多糖与CRM197多肽的连结物、肺炎链球菌血清型18C多糖与CRM197多肽的 连结物、肺炎链球菌血清型19F多糖与CRM197多肽的连结物、肺炎链球菌血清型23F多糖与 CRM197多肽的连结物、肺炎链球菌血清型1多糖与CRM197多肽的连结物、肺炎链球菌血清型 3多糖与CRM197多肽的连结物、肺炎链球菌血清型5多糖与CRM 197多肽的连结物、肺炎链球 菌血清型6A多糖与CRM197多肽的连结物、肺炎链球菌血清型7F多糖与CRM197多肽的连结物 和肺炎链球菌血清型19A多糖与CRM197多肽的连结物。
[0017] 在其它实施例中，调配物另外包含一种或多种脑膜炎球菌多糖、一种或多种脑膜 炎球菌抗原蛋白或其组合。在其它实施例中，调配物另外包含一种或多种链球菌多糖、一种 或多种链球菌抗原蛋白或其组合。
[0018] 在某些其它实施例中，调配物另外包含一种或多种佐剂。例示性适当佐剂将于下 文中描述。
[0019] 在其它实施例中，本发明针对使链球菌C5a肽酶（SCP)组合物稳定的调配物，所述 调配物包含（i)pH值缓冲盐水溶液，其中所述缓冲液具有约3. 5到约6. 5的pKa值；（ii) 表面活性剂；和（iii)链球菌C5a肽酶。在一个特定实施例中，SCP调配物包含于容器装置 中。在某些实施例中，所述容器装置选自一个或多个以下组成的群组：小瓶、小瓶塞、小瓶密 封物、玻璃密封物、橡胶密封物、塑料密封物、注射器、注射器塞、注射器柱塞、烧瓶、烧杯、量 筒、发酵罐、生物反应器、管道、导管、袋子、广口瓶、安瓿、药筒和一次性笔。
[0020] 在其它实施例中，调配物的pH值缓冲盐水溶液具有5. 5到7. 5的pH值。在其它 实施例中，缓冲液为琥珀酸盐、组氨酸、磷酸盐或柠檬酸盐。在一个特定实施例中，缓冲液为 最终浓度为ImM到IOmM且p