5天，而无可见的沉淀迹象（资料未显示）。因此，此资料表明，将表 面活性剂（例如，吐温80)添加到免疫原性组合物调配物中会增强免疫原性组合物的稳定 性。
[0122] 关于13vPnC的第二稳定性实验进一步证实，将表面活性剂添加到调配物中会 显著增强13vPnC的稳定性。在此实验中，在存在和不存在0. 05 %吐温80的情况下调配 13vPnC。在不存在吐温80(即0· 0% )的情况下调配的13vPnC制备如下：将0· 85%盐水 (150mM NaCl)添加到1升派热克斯玻璃烧杯中，随后添加50mM琥珀酸盐缓冲液（最终浓 度5mM)和13vPnC，总体积为500mL。具有0. 05%吐温80的13vPnC调配物制备如下：将 0.85 %盐水（150mM NaCl)添加到1升派热克斯玻璃烧杯中，随后添加50mM琥珀酸盐缓冲 液（最终浓度5禮)、0.05%吐温80和13￥?11(：，总体积为500111匕5001^调配物中各血清型 连结物的最终浓度为4. 4 μ g/mL (血清型6B除外，其为8. 8 μ g/mL)。经由转子/定子均质 机以6, 000rpm(2-8°C )将500mL调配物均质化120分钟。均质化过程产生空气-液体界面 (具有气泡）。
[0123] 如下评定2小时时间段内具有（表1)和不具有（表1)0. 05%吐温80的13vPnC 调配物的稳定性：在0、30分钟和120分钟时将样本（20-30mL)从0. 0%和0. 05%吐温80 调配物中移出，将样本以1 : 2稀释于蛋白质稀释剂（Armyi 360蛋白质稀释剂（目录号 663630);贝克曼库尔特有限公司（Beckman Coulter，Inc.);加州富尔顿（Fullerton，CA)) 中，且在Array? 360系统上分析13vPnC的所有13种血清型的抗原性。
[0124] 如表1中所示，在2小时的分析中，13种血清型多糖（未用吐温80调配）的抗原 性显著降低。然而，特别引人注目的是，包含0. 05 %吐温80 (表1)的13vPnC调配物在2小 时的抗原性分析中展现稳固的稳定性，不存在抗原性的降低。
[0125] 表 1
[0126] 具有和不具有吐温80的13VPNC调配物的稳定性分析
[0127]
【主权项】
1. 一种抑制聚硅氧诱导的硅化容器装置中所包含的多糖-蛋白质连结物聚集的调配 物，所述调配物包含（i)pH缓冲盐溶液，其中所述缓冲液具有约3. 5到约7. 5的pKa值；（ii) 铝盐；和（iii) 一种或多种多糖-蛋白质连结物。
2. 根据权利要求1所述的调配物，其中所述pH值缓冲盐溶液具有5. 5-7. 5的pH值。
3. 根据权利要求1-2中任一权利要求所述的调配物，其中所述缓冲液为磷酸盐、琥珀 酸盐、组氨酸或柠檬酸盐。
4. 根据权利要求1-2中任一权利要求所述的调配物，其中pH缓冲盐溶液中的盐包含氯 化镁、氯化钾、氯化钠或其组合。
5. 根据权利要求1-2中任一权利要求所述的调配物，其中所述铝盐为氢氧化铝、磷酸 错或硫fe错。
6. 根据权利要求1-2中任一权利要求所述的调配物，其中所述铝盐为磷酸铝。
7. 根据权利要求1所述的调配物，其中所述缓冲液为组氨酸，所述pH缓冲盐溶液中的 盐为氯化钠以及所述铝盐为磷酸铝。
8. 根据权利要求1所述的调配物，其中所述缓冲液为pH值5. 8的组氨酸，所述pH缓冲 盐溶液中的盐为氯化钠以及所述铝盐为磷酸铝。
9. 根据权利要求1-2中任一权利要求所述的调配物，其另外包括表面活性剂，所述表 面活性剂选自如下构成的群组： 聚山梨醇醋20 (polysorbate 20)(吐温20 (Tween?20))、聚山梨醇醋40 (吐温40)、 聚山梨醇酯60 (吐温60)、聚山梨醇酯65 (吐温65)、聚山梨醇酯80 (吐温80)、聚山梨 醇酯85(吐温85)))、曲通^101〇'1'行〇11111^101)、曲通父-100、氧托夕醇40((?七(《711〇1 40)、壬苯醇醚-9(nonoxynol-9)、三乙醇胺、三乙醇胺多肽油酸盐、聚氧化乙稀-660羟基 硬脂酸酯（PEG-15,索罗托H15(Solutol H15))、聚氧化乙烯-35-蓖麻油酸酯（克林莫佛 EL(Cremophor EL?))、大豆卵磷脂（soy lecithin)和泊洛沙姆（poloxamer) 〇
10. 根据权利要求1-2中任一权利要求所述的调配物，其另外包括聚山梨醇酯80。
11. 根据权利要求10所述的调配物，其中所述调配物中的所述聚山梨醇酯80的最终浓 度为每体积所述调配物至少〇. 001重量％到10重量％聚山梨醇酯80。
12. 根据权利要求1-2中任一权利要求所述的调配物，其中所述缓冲液为最终浓度为 ImM到IOmM且pH值为5. 8到6. 0的琥珀酸盐。
13. 根据权利要求12所述的调配物，其中所述琥珀酸盐缓冲液为最终浓度为5mM的琥 珀酸盐。
14. 根据权利要求1-2中任一权利要求所述的调配物，其中所述多糖-蛋白质连结物包 含一种或多种肺炎球菌多糖。
15. 根据权利要求1-2中任一权利要求所述的调配物，其另外包含一种或多种脑膜炎 球菌多糖、一种或多种脑膜炎球菌抗原蛋白或其组合。
16. 根据权利要求1-2中任一权利要求所述的调配物，其另外包含一种或多种链球菌 多糖、一种或多种链球菌抗原蛋白或其组合。
17. 根据权利要求1所述的调配物，其中所述多糖-蛋白质连结物包含一种或多种肺炎 球菌多糖，所述缓冲液为组氨酸，所述pH缓冲盐溶液中的盐为氯化钠以及所述铝盐为磷酸 错。
18. 根据权利要求1所述的调配物，其中所述多糖-蛋白质连结物包含一种或多种肺炎 球菌多糖，所述缓冲液为pH值5. 8的组氨酸，所述pH缓冲盐溶液中的盐为氯化钠以及所述 铝盐为磷酸铝。
19. 一种使多糖-蛋白质连结物稳定的调配物，所述调配物包含（i)pH缓冲盐溶液， 其中所述缓冲液具有约3. 5到约7. 5的pKa值；（ii)表面活性剂；和（iii) 一种或多种多 糖-蛋白质连结物。
20. 根据权利要求19所述的调配物，其中所述缓冲液为磷酸盐、琥珀酸盐、组氨酸或柠 檬酸盐。
21. 根据权利要求20所述的调配物，其中所述缓冲液为最终浓度为ImM到IOmM且pH 值为5. 8到6. 0的琥珀酸盐。
22. 根据权利要求19-21中任一权利要求所述的调配物，其中pH缓冲盐溶液中的盐包 含氯化镁、氯化钾、氯化钠或其组合。
23. 根据权利要求19所述的调配物，其中所述pH缓冲盐溶液具有5. 5-7. 5的pH值，其 中所述缓冲液是组氨酸以及其中所述PH缓冲盐溶液中的盐为氯化钠。
24. 根据权利要求19-21中任一权利要求所述的调配物，其包括表面活性剂，所述表面 活性剂选自如下构成的群组： 聚山梨醇醋20 (polysorbate 20)(吐温20 (Tween?20))、聚山梨醇醋40 (吐温40)、 聚山梨醇酯60 (吐温60)、聚山梨醇酯65 (吐温65)、聚山梨醇酯80 (吐温80)、聚山梨 醇酯85(吐温85)))、曲通^101〇'1'行〇11111^101)、曲通父-100、氧托夕醇40((?七(《711〇1 40)、壬苯醇醚-9(nonoxynol-9)、三乙醇胺、三乙醇胺多肽油酸盐、聚氧化乙稀-660羟基 硬脂酸酯（PEG-15,索罗托H15(Solutol H15))、聚氧化乙烯-35-蓖麻油酸酯（克林莫佛 EL(Cremophor EL?))、大豆卵磷脂（soy lecithin)和泊洛沙姆（poloxamer) 〇
25. 根据权利要求19-21中任一权利要求所述的调配物，其中所述调配物另外包含一 种或多种佐剂。
26. 根据权利要求25所述的调配物，其中所述佐剂为铝盐。
27. 根据权利要求26所述的调配物，其中所述铝盐为氢氧化铝、磷酸铝或硫酸铝。
28. 根据权利要求1-2和19-21中任一权利要求所述的调配物，其中所述一种或多种多 糖包含肺炎链球菌（S. pneumoniae)血清型4多糖、肺炎链球菌血清型6B多糖、肺炎链球菌 血清型9V多糖、肺炎链球菌血清型14多糖、肺炎链球菌血清型18C多糖、肺炎链球菌血清 型19F多糖和肺炎链球菌血清型23F多糖、肺炎链球菌血清型1多糖、肺炎链球菌血清型3 多糖、肺炎链球菌血清型5多糖、肺炎链球菌血清型6A多糖、肺炎链球菌血清型7F多糖和 肺炎链球菌血清型19A多糖。
29. 根据权利要求1-2和19-21中任一权利要求所述的调配物，其中所述多糖-蛋白 质连结物调配物为13价肺炎球菌连结物（13vPnC)调配物，其包含肺炎链球菌血清型4多 糖与CRM 197多肽的连结物、肺炎链球菌血清型6B多糖与CRM197多肽的连结物、肺炎链球菌血 清型9V多糖与CRM 197多肽的连结物、肺炎链球菌血清型14多糖与CRM 197多肽的连结物、肺 炎链球菌血清型18C多糖与CRM197多肽的连结物、肺炎链球菌血清型19F多糖与CRM 197多肽 的连结物、肺炎链球菌血清型23F多糖与CRM197多肽的连结物、肺炎链球菌血清型1多糖与 CRM 197多肽的连结物、肺炎链球菌血清型3多糖与CRM197多肽的连结物、肺炎链球菌血清型 5多糖与CRM197多肽的连结物、肺炎链球菌血清型6A多糖与CRM 197多肽的连结物、肺炎链球 菌血清型7F多糖与CRM197多肽的连结物和肺炎链球菌血清型19A多糖与CRM 197多肽的连结 物。
30. -种容器装置，其填充有权利要求1-29中任一权利要求所述的调配物。
31. 根据权利要求30所述的容器装置，其选自如下构成的群组：小瓶、注射器、烧瓶、发 酵罐、生物反应器、管道、导管、袋子、广口瓶、安瓿、药筒和一次性笔。
32. 根据权利要求31所述的容器装置，其中所述容器由玻璃、金属或聚合物制备。
33. 根据权利要求31所述的容器装置，所述容器为注射器。
34. 根据权利要求31所述的容器装置，所述容器为玻璃注射器。
35. 根据权利要求31-34中任一权利要求所述的容器装置，所述容器装置经硅化。
【专利摘要】本发明针对所属领域中改进诸如多糖-蛋白质连结物和蛋白质免疫原等免疫原性组合物的稳定性的不断增长的需求。本发明大致涉及使免疫原性组合物稳定且抑制其沉淀的新颖调配物。更具体来说，下文所述的本发明针对所属领域中对于使免疫原性组合物稳定且抑制其微粒形成(例如，聚集、沉淀)的调配物的需求，所述免疫原性组合物在诸如发酵罐、生物反应器、小瓶、烧瓶、袋子、注射器、橡胶塞、管道等容器装置中加工、研制、调配、制造和/或存储。
【IPC分类】A61K47-48, A61K47-18, A61K47-04, A61K39-095, A61P31-04, A61K39-09, A61K47-12
【公开号】CN104857524
【申请号】CN201510239424
【发明人】拉克希米·坎德克, 陈英, 汉扬·韩, 罗伯特·詹塞·小赛义德, 金照伟, 吉·隆·卢克, 罗纳德·马隆, 杨旭东
【申请人】惠氏公司
【公开日】2015年8月26日
【申请日】2007年4月19日
【公告号】CA2650056A1, CA2650056C, CA2803111A1, CA2803111C, CA2873346A1, CN101500612A, CN101500612B, CN103768615A, EP2010219A2, EP2676679A2, EP2676679A3, EP2679244A2, EP2679244A3, EP2679245A2, EP2679245A3, US7935787, US8562999, US20070253984, US20110172393, US20130034580, WO2007127665A2, WO2007127665A3