一种双重修饰β-胡萝卜素脂质体及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于化妆品生产技术领域，具体涉及一种双重修饰β-胡萝卜素脂质体； 本发明还涉及该双重修饰β-胡萝卜素脂质体的制备方法。
【背景技术】
[0002] 脂质体是由脂质双分子层组成，其内部为水相的闭合囊泡结构，由于其独特的结 构和性能，脂质体已被广泛应用与食品、医药以及化妆品领域。
[0003] 胡萝卜素具有多个双键，在光、热、氧气及活泼性较强的自由基离子存在的条 件下易氧化，从而有效地预防DNA和脂蛋白的氧化损伤，维持细胞功能，延缓机体衰老，是 一个公认的天然抗氧化剂；将其添加到化妆品中，能赋予化妆品吸收紫外线和美白皮肤的 双重功效；然而β-胡萝卜素在水、丙二醇、甘油、甲醇和乙醇等化妆品常用溶剂中不溶或 难以溶解，大大地限制了其在化妆品领域的使用。利用可溶性微球将β-胡萝卜素包覆起 来制成胡萝卜素脂质体，并将其添加到化妆品中，解决了 胡萝卜素不溶或难溶的问 题。但脂质体对酸、热等敏感，在贮藏期间易聚集溶合、絮凝，导致芯材泄漏，使用过程中释 药太快，容易产生突释，不易控制等缺点。所以需要用大分子材料壳聚糖和透明质酸进行 修饰，通过层层包覆技术可以改善脂质体对酸、热等敏感性，提高稳定性，控制释药速度，使 胡萝卜素不易渗漏。
[0004] 透明质酸HA作为天然保湿剂已被广泛用于化妆品的生产中，与传统保湿剂相比， 具有更高的保湿效果，且无油腻感和阻塞皮肤毛孔等缺点。透明质酸钠是透明质酸（HA) 的钠盐形式，是一种高分子量的直链多糖，广泛分布于动物和人体结缔组织细胞外基质中， 它在溶液中的无规则卷曲状态和它的流体动力学特点赋予其重要的物理特性，即高度粘弹 性、可塑性、渗透性和良好的生物相容性，是一种用途广泛的生物可吸收材料，因此将其包 裹在在β-胡萝卜素脂质体的最外层，在化妆品中作为保湿因子发挥独特的作用。而且目 前市面上销售的防晒霜和防晒露的最长防晒时间为4h，防晒时间太短，将β-胡萝卜素层 层包裹起来可以控制其缓释速度，延长有效防晒时间至8h，而且通过层层包裹降低了防晒 物质与皮肤的接触，减小了其对皮肤的刺激作用，能更好的保护皮肤。
[0005] 因此，如何将β-胡萝卜素制成β-胡萝卜素脂质体，并对β-胡萝卜素脂质体进 行层层包覆，是亟需解决的问题。
【发明内容】
[0006] 本发明的目的在于提供一种双重修饰β-胡萝卜素脂质体，解决了 β-胡萝卜素 脂质体添加到化妆品中时，会引起释药太快、容易产生突释且不易控制以及化妆品稳定性 差的问题。
[0007] 本发明的另一目的在于提供该双重修饰β -胡萝卜素脂质体的制备方法，制备工 艺简单，容易实现。
[0008] 本发明所采用的技术方案是，一种双重修饰β-胡萝卜素脂质体，按质量百分 比由以下组分组成：蛋黄卵磷脂15%~30%，双十六烷基磷酸I %~3%，保护剂30%~ 60%，β-胡萝卜素晶体0· 1%~1%，胆固醇5%~9%，吐温-8010%~20%，VeO. 5%~ 1%，VcO. 5%~1%，壳聚糖1%~3%，透明质酸钠1%~3%，以上组分质量百分比之和为 100%〇
[0009] 本发明的特征还在于，
[0010] 蛋黄卵磷脂中磷脂酰胆碱含量大于90%，保护剂为蔗糖和甘露醇的混合物，其中， 蔗糖与甘露醇的质量比为6:4 ;透明质酸的分子量为10-100万。
[0011] 脂质体为冻干粉末，平均粒径为240. 45±0. 28nm，体外细胞释药时间为8~10h。
[0012] 本发明所采用的另一技术方案是，一种双重修饰胡萝卜素脂质体的制备方 法，具体步骤如下：
[0013] 步骤1，分别称取蛋黄卵磷脂15 %~30%，双十六烷基磷酸1 %~3%，保护剂 30%~60%，β-胡萝卜素晶体(λ 1 %~1%，胆固醇为5%~9%，吐温-8010%~20%， VeO. 5%~1%，VcO. 5%~1%，壳聚糖1%~3%，透明质酸钠1%~3%，以上组分质量百分 比之和为100% ;
[0014] 步骤2,取步骤1称量的蛋黄卵磷脂、β -胡萝卜素晶体、胆固醇、吐温-80,双十六 烷基磷酸、^及V。溶解于有机溶剂中，常温磁力搅拌到各药品完全溶解，将完全溶解后溶液 倒入圆底烧瓶在温度为40°c、压力为0.0 OSMpa条件下在旋转蒸发器中旋转蒸发后，得脂质 体薄膜；
[0015] 步骤3,将步骤1称取的保护剂溶解于浓度为0. lmol/L的Tris缓冲液中，搅拌至 完全溶解；将含保护剂的Tris缓冲液加入到步骤2所得脂质体薄膜中进行洗膜，得粗脂质 体混悬液，将所得混悬液在45°C~55°C水浴磁力搅拌40min~60min，然后冰水浴有效超声 震荡处理15min~20min后，得β -胡萝卜素脂质体混悬液；
[0016] 步骤4,将步骤1称取的低分子量壳聚糖溶解在浓度为4%的柠檬酸溶液中，静置 8~16h，使其充分溶解后，得浓度为0· 685mg/mL~2. 055mg/mL的壳聚糖溶液，备用；
[0017] 步骤5,取步骤3所得β-胡萝卜素脂质体以0. lmL/s的速度滴加到步骤4所得壳 聚糖溶液中，在500rmp速度下搅拌40min~60min，使其混合均勾后，将混合物在冰浴中有 效超声震荡IOmin~15min，放置在3~4°C环境中8~16h，然后将其在15000rpm的转速 下离心处理30min，最后将离心处理后的沉淀物用蒸馏水溶解，得壳聚糖-包脂质体溶液；
[0018] 步骤6,将步骤1称取的透明质酸钠溶解在双蒸水中，静置8~16h，使其充分溶 解，得浓度为0. 685mg/mL~2. 055mg/mL的透明质酸溶液；
[0019] 步骤7,将步骤5所得壳聚糖-包脂质体溶液以0. lmL/s的速度滴加到步骤6所得 透明质酸溶液中，滴加完后继续搅拌40min~60min，冰浴有效超声震荡IOmin~15min，得 透明质酸-壳聚糖-脂质体混悬液，然后依次过〇. 45 μ m微滤膜和0. 22 μ m微滤膜进行整 粒；
[0020] 步骤8,将步骤7过滤得到的透明质酸-壳聚糖-脂质体混悬液在-60±1°C和 10±1°C环境条件下反复冻溶两到三次，分装入西林瓶中在_60±1°C环境条件下预冻30h 后，再在-52±2°C、真空度小于IOOmT的环境条件下冷冻干燥25h~30h，即得脂质体冻干 粉。
[0021] 本发明的特征还在于，
[0022] 步骤1中，蛋黄卵磷脂中磷脂酰胆碱含量大于90%，蛋黄卵磷脂与双十六烷基磷 酸的用量比为10:1 ;胆固醇与双十六烷基磷酸的用量比为2. 5:1 ;保护剂与蛋黄卵磷脂的 用量比为2:1 ;保护剂为蔗糖和甘露醇的混合物，其中，蔗糖与甘露醇的质量比为6:4;透明 质酸的分子量为10-100万。
[0023] 步骤2中，有机溶剂为无水乙醇与氯仿的混合物，其中无水乙醇与氯仿的体积比 为 1:2〇
[0024] 步骤4中，壳聚糖为低分子量壳聚糖，其分子量为5万~19万。
[0025] 步骤5中，β-胡萝卜素脂质体混悬液与壳聚糖溶液的体积比为1:1。
[0026] 步骤7中，透明质酸溶液与壳聚糖-包脂质体混悬液的体积比为1:1。
[0027] 本发明的有益效果是，利用有效超声震荡和过滤膜整粒处理，使透明质酸-壳聚 糖-脂质体的粒径大小均匀，分散性好，不易堵塞皮肤的毛孔；层层包覆释药时间长，可以 长时间防晒，而且包裹后降低了防晒成分与皮肤的接触浓度，减少了其对皮肤的刺激作用； 采用冻干工艺使脂质体以粉末状存在，有利于长期保存，且存贮、使用方便。
【附图说明】
[0028] 图1是本发明双重修饰β -胡萝卜素脂质体的制备工艺流程图；
[0029] 图2是本发明实施例1所得脂质体的粒径分布图；
[0030] 图3是本发明对比例所得脂质体的粒径分布图；
[0031] 图4是本发明实施例1和对比例所得脂质体体细胞缓释图；
[0032] 图5是利用本发明实施例1所得脂质体制备的防晒霜SPF值表征图；
[0033] 图6是利用本发明实施例1所得脂质体制备的防晒霜的紫外透过率变化曲线图。
【具体实施方式】
[0034] 下而结合附图和【具体实施方式】对本发明进行详细说明。
[0035] 实施例1
[0036] 步骤1，分别称取2. 400g蛋黄卵磷脂、0. 240g双十六烷基磷酸、0. 047gf3 -胡萝卜 素晶体、0. 600g胆固醇、I. 471g吐温-80、0. 0758￥￡及0. 075gVc溶解于30mL无水乙醇与氯仿 的混合物中，混合物中无水乙醇与氯仿的体积比为1:2,常温磁力搅拌到各药品完全溶解， 将完全溶解后溶液倒入圆底烧瓶在温度为40°C、压力为0. 008Mpa条件下在旋转蒸发器中 旋转蒸发后，得脂质体薄膜；
[0037] 步骤2,称取I. 920g甘露醇和2. 880g蔗糖溶解于150mL浓度为0. lmol/L的Tris 缓冲液中，搅拌至完全溶解，得含保护剂的Tris缓冲液；将含