两次，每次回流150分钟，回流完毕后，惊干，备用；
[0080] 做将步骤似所得产物置于容器中，加入步骤似所得产物重量6倍的水，调节 抑值为3,保持溫度在25°C，加入步骤（2)所得产物重量0. 001倍的葡萄糖氧化酶进行酶 解，酶解时间为15分钟；
[0081] (4)将步骤（3)中酶解产物进行超声处理，超声频率为lOOKHz，时间为40分钟，得 提取液；
[0082] (5)将提取液趁热过滤，得滤液，将滤液浓缩至原体积的1/3,乙醇沉淀两次，两次 均加入6倍体积的无水乙醇，均放置于5°C下保持48h，醇沉后离屯、，收集沉淀物，沉淀物用 无水乙醇反复洗涂，干燥，得到桑甚多糖提取物。
[0083] 经检测，提取得到的桑甚多糖提取物中含有多糖70wt% (苯酪-硫酸法）、糖醒酸 21wt% (间径基联苯比色法）、蛋白质Iwt%度ra壯ord法）和硫酸醋5wt% (氯化领-明 胶法）。其中多糖由质量比为2.4 : 1 : 2.5 : 61 : 3.4 : 18.8 : 13的鼠李糖残基、岩 藻糖残基、木糖残基、甘露糖残基、半乳糖残基、半乳糖醒酸残基和葡萄糖残基组成。
[0084] 实施例3桑甚多糖提取物按W下方法步骤制备： 阳0化](1)除杂：将200g桑甚原料进行水洗，干燥，粉碎，备用；
[0086] 似脱脂、脱色：将步骤（1)所得原料置于容器中，先加入400mL无水乙醇回流两 次，再加入400mL无水乙酸回流两次，每次回流105分钟，回流完毕后，惊干，备用；
[0087] (3)将步骤（2)所得产物置于容器中，加入步骤（2)所得产物重量11倍的水，调 节抑值为5,保持溫度在58°C，加入步骤（2)所得产物重量0. 003倍的葡萄糖氧化酶进行 酶解，酶解时间为38分钟；所述葡萄糖氧化酶配制成0. 2wt%~0. 4wt%的水溶液使用； 阳0蝴 （4)将步骤做中酶解产物进行超声处理，超声频率为80KHZ，时间为20分钟，得 提取液；
[0089] (5)将提取液趁热过滤，得滤液，将滤液浓缩至原体积的1/4,乙醇沉淀两次，两次 均加入5倍体积、浓度为95%的乙醇，均放置于4°C下保持30h;醇沉后离屯、，收集沉淀物， 沉淀物用无水乙醇反复洗涂，冷冻干燥，即得。
[0090] 经检测，提取得到的桑甚多糖提取物中含有多糖67. 9wt% (苯酪-硫酸法）、糖醒 酸18. 5wt% (间径基联苯比色法）、蛋白质1. 6wt% (Bra壯ord法）和硫酸醋6. 2wt% (氯 化领-明胶法）。其中多糖由质量比为2.1 : 0.6 : 2.2 : 60. 5 : 3.1 : 18.4 : 12. 5的 鼠李糖残基、岩藻糖残基、木糖残基、甘露糖残基、半乳糖残基、半乳糖醒酸残基和葡萄糖残 基组成。
[0091] 实施例4桑甚多糖提取物的应用
[0092] 按质量比8:6:5:0.4:8:0.3称取桑甚多糖提取物（实施例1制得）、葛根提取物、 益智仁提取物、糊精、薦糖和簇甲基纤维素钢，混匀，制成颗粒剂。用于预防或治疗急性酒精 性肝损伤，每日服用量：5~lOg。
[0093] 实施例5桑甚多糖提取物的应用
[0094] 按质量比8:4:3:0.4:0. 2:0. 3称取桑甚多糖提取物（多糖含量63wt% )、葛根提 取物、益智仁提取物、淀粉、薦糖和簇甲基纤维素钢，混匀，制成片剂，0. 3~0. 5g/片。用于 预防或治疗亚性酒精性肝损伤，每日服用量：3~5片。
[00巧]实施例6桑甚多糖提取物的应用
[0096] 按质量比8:5:0. 4:6:0. 3称取桑甚多糖提取物（多糖含量60wt%、糖醒酸含量 14wt%)、益智仁提取物、糊精、薦糖和簇甲基纤维素钢，混匀，制成颗粒剂。用于预防或治疗 药物性肝损伤，每日服用量：5~lOg。
[0097] 实施例7桑甚多糖提取物的应用
[009引按质量比8:4:0. 4:0. 1:0. 3称取桑甚多糖提取物（实施例2制得）、葛根提取物、 淀粉、薦糖和簇甲基纤维素钢，混匀，制成片剂，0. 3~0. 5g/片。用于预防或治疗化学毒物 造成的肝损伤，每日服用量：3~5片。
[0099] 实施例8桑甚多糖提取物的应用
[0100] 按质量比8:0. 2:0. 1:0. 2称取桑甚多糖提取物（实施例3制得）、淀粉、薦糖和簇 甲基纤维素钢，混匀，制成片剂，0. 3~0. 5g/片。用于预防或治疗亚性酒精性肝损伤，每日 服用量：3~5片。
【主权项】
1. 桑葚多糖提取物在制备预防或抑制化学性肝损伤的药物或保健品中的应用。2. 桑葚多糖提取物在制备预防或抑制酒精性肝损伤的药物或保健品中的应用。3. 根据权利要求1或2所述的桑葚多糖提取物的应用，其特征在于：所述桑葚多糖提 取物中含有多糖、糖醛酸、蛋白质和硫酸酯，其中多糖的重量百分含量大于55%。4. 根据权利要求3所述的桑葚多糖提取物的应用，其特征在于：所述桑葚多糖提取物 中糖醛酸的重量百分含量大于12%。5. 根据权利要求4所述的桑葚多糖提取物的应用，其特征在于：按照重量百分数计，所 述桑葚多糖提取物中含有多糖65%~70%、糖醛酸16%~21%、蛋白质1%~2%和硫酸 酯5%~7%〇6. 根据权利要求3所述的桑葚多糖提取物的应用，其特征在于：所述多糖由质量比为 1.8~2.4 : 0.3~1 : 1.9~2.5 : 60~61 : 2. 8~3.4 : 18~18.8 : 12.2~13 的鼠李糖残基、岩藻糖残基、木糖残基、甘露糖残基、半乳糖残基、半乳糖醛酸残基和葡萄糖 残基组成。7. 根据权利要求3所述的桑葚多糖提取物的应用，其特征在于：所述桑葚多糖提取物 是由桑葚的干燥果穗经脱脂、脱色、生物酶酶解和超声提取之后浓缩、醇沉得到的。8. 根据权利要求7所述的桑葚多糖提取物的应用，其特征在于：所述桑葚多糖提取物 是按以下方法步骤制得的： (1) 除杂：将桑葚原料进行水洗，干燥，粉碎，备用； (2) 脱脂、脱色：将步骤（1)所得原料置于容器中，先后加入乙醇、乙醚进行回流，回流 完毕后，晾干，备用； (3) 将步骤（2)所得产物置于容器中，加入水，调节pH值，保温，加入葡萄糖氧化酶进行 酶解； (4) 将步骤（3)中酶解产物进行超声处理，得提取液； (5) 将提取液趁热过滤，得滤液，将滤液浓缩，醇沉两次，离心，收集沉淀物，沉淀物用无 水乙醇反复洗涤，干燥，即得。9. 根据权利要求8所述的桑葚多糖提取物的应用，其特征在于：所述桑葚多糖提取物 是按以下方法步骤制得的： (1) 除杂：将桑葚原料进行水洗，干燥，粉碎，备用； (2) 脱脂、脱色：将步骤（1)所得原料置于容器中，先加入75%~100%乙醇回流两次， 再加入90%~100%乙醚回流两次，每次回流60~150分钟，回流完毕后，晾干，备用； (3) 将步骤（2)所得产物置于容器中，加入步骤（2)所得产物重量6~25倍的水，调 节pH值为3~7,保持温度在25°C~75°C，加入步骤（2)所得产物重量0. 001~0. 006倍 的葡萄糖氧化酶进行酶解，酶解时间为15~120分钟； (4) 将步骤（3)中酶解产物进行超声处理，超声频率为20~lOOKHz，时间为10~40 分钟，得提取液； (5) 将提取液趁热过滤，得滤液，将滤液浓缩至原体积的1/5~1/3,乙醇沉淀两次，两 次均加入4~6倍体积、浓度为90 %~100 %的乙醇，均放置于3°C~5°C下保持12h~48h ; 醇沉后离心，收集沉淀物，沉淀物用无水乙醇反复洗涤，干燥，即得。10. 根据权利要求9所述的桑葚多糖提取物的应用，其特征在于：所述桑葚多糖提取物 是按以下方法步骤制得的： (1) 除杂：将桑葚原料进行水洗，干燥，粉碎，备用； (2) 脱脂、脱色：将步骤（1)所得原料置于容器中，先加入无水乙醇回流两次，再加入无 水乙醚回流两次，每次回流105分钟，回流完毕后，晾干，备用； (3) 将步骤（2)所得产物置于容器中，加入步骤（2)所得产物重量11倍的水，调节pH 值为5,保持温度在58°C，加入步骤（2)所得产物重量0. 003倍的葡萄糖氧化酶进行酶解， 酶解时间为38分钟；所述葡萄糖氧化酶配制成0. 2wt%~0. 4wt%的水溶液使用； (4) 将步骤（3)中酶解产物进行超声处理，超声频率为80KHz，时间为20分钟，得提取 液； (5) 将提取液趁热过滤，得滤液，将滤液浓缩至原体积的1/4,乙醇沉淀两次，两次均加 入5倍体积、浓度为95%的乙醇，均放置于4°C下保持30h ;醇沉后离心，收集沉淀物，沉淀 物用无水乙醇反复洗涤，冷冻干燥，即得。
【专利摘要】本发明公开了桑葚多糖提取物在制备预防或抑制化学性肝损伤的药物或保健品中的应用。本发明的桑葚多糖提取物具有较为广泛的生物活性，活性高，能明显降低血清中丙氨酸转氨酶和天冬氨酸转氨酶的水平，有效提高肝脏中超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶的活性，明显降低肝脏中谷胱甘肽和丙二醛的含量。本发明的桑葚多糖提取物可用于制备药物或保健品，尤其是用于制备对化学性肝损伤有抑制或预防作用的药物或保健品。
【IPC分类】A61P1/16, A23L1/09, A61K31/715
【公开号】CN105147718
【申请号】CN201510431557
【发明人】周欣, 陈华国, 邓青芳, 赵超, 龚小见
【申请人】贵州师范大学
【公开日】2015年12月16日
【申请日】2015年7月22日