一种丙泊酚脂质体冻干制剂及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于医药技术领域，更具体地说涉及一种无刺激和无痛的丙泊酚脂质体冻 干制剂及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 丙泊酸（Propofol)，又称为双丙泊酸、异丙酸、2,6_二异丙基苯酸，分子式： C12H1S0,分子量：178. 3,其化学结构式见图1。
[0003] 丙泊酚是一种低分子的苯酚衍生物，是可注射的麻醉剂，可诱导和维持全身麻醉， 具有起效快、消除迅速、安全性高等优点，今年来广泛用于门诊小手术、胃肠镜查、人工流产 等无痛治疗。
[0004] 由于丙泊酚亲脂性强，难溶于水，所以，目前上市产品主要为丙泊酚脂肪乳剂，所 用辅料包括大豆油、中链甘油三酯、卵磷脂、油酸、甘油和注射用水。但是，此乳剂具有一些 缺点：
[0005] ①此乳剂为非均匀相液体制剂，属于热力学及动力学不稳定体系，因此乳剂在长 期放置中，乳滴粒子容易合并以致粒径增大、或导致乳剂漂油、分层等不稳定现象；
[0006] ②此制剂采用天然蛋黄卵磷脂和大豆油作为辅料，它们含有微量蛋黄蛋白和大豆 蛋白，容易导致过敏反应；
[0007] ③此乳剂在制备过程中的高温处理及在长期储存过程中，乳剂中的药物、大豆油 及卵磷脂容易被氧化产生降解，从而引起过敏等副作用：丙泊酚结构中存在酚羟基，易被氧 化生成2,6-二异丙基-1，4-苯醌或发生聚合反应生成3, 3, 5, 5' -四异丙基联苯酚（化学 结构见图2)，这两个杂质具有较大的毒性；
[0008] ④为了防止丙泊酚被氧化，制剂中常加入EDTA_2Na、亚硫酸盐、硫代硫酸盐等辅 料，但是这些辅料也容易引起过敏反应，尤其是对特发性哮喘患者；
[0009] ⑤此制剂中的脂肪、磷脂等物质在液态环境中是微生物生产良好的基质，因此在 储存和使用中存在细菌和真菌感染的风险，如果使用不当，容易造成感染等后果；
[0010] ⑥此制剂注射部位的疼痛发生率高达28%~90%，给患者造成了严重影响；
[0011] ⑦此乳剂静脉给药后容易引起高甘油三酯血症，尤其对于长期接受输液的患者；
[0012] ⑧此制剂应避免高低温保存，同时不能剧烈振摇，因此该产品不便于运输、存储。
[0013] 因此，丙泊酚脂肪乳注射液在临床使用上产生了很多不良反应，其中过敏性休克 的发生率较高，严重可导致死亡。在2010年，美国食品药品管理局（FDA)表示，由于生产方 面的问题迫使梯瓦与Hospira Inc(HSP)暂停生产，并召回部分产品。此外，由于丙泊酚注 射疼痛高发生率给患者造成了严重影响，因此被美国麻醉界列为当代麻醉7大重要事件之 一。所以，开发一种无刺激和无痛的丙泊酚制剂具有重要意义。
[0014] 申请号为201510021939. 0的专利制备了丙泊酚脂肪乳注射液，其克服了初乳粒 径偏差过大、乳液易破乳、且高压均质后乳液粒径偏差过大的缺陷，但是它采用天然蛋黄卵 磷脂和大豆油作为辅料，容易引起过敏反应。
[0015] 申请号为201410819727. 2的专利制备了丙泊酚脂肪乳注射液，其中不含防腐剂 依地酸二钠，减小了制剂的毒副作用，但是它采用的天然蛋黄卵磷脂和大豆油仍会产生过 敏现象。
[0016] 授权公告号为CN 101006992 B的专利制备了丙泊酚冻干乳，其增加了乳剂的稳定 性，但是它采用天然蛋黄卵磷脂和大豆油作为辅料，容易引起过敏反应。
[0017] 申请号为201410130319. 6的专利制备了丙泊酚脂质体，其具有包封率高、载药量 高、粒径小的优点，但是它采用乳化剂吐温-80以及天然的蛋黄卵磷脂，容易产生过敏反 应。
[0018] 授权公告号为CN 102805728 B的专利制备了一种丙泊酚脂肪乳注射液，解决了丙 泊酚脂肪乳粒径大、易破乳的问题，同时减轻了注射疼痛，但是它采用吐温-80以及天然的 蛋黄卵磷脂和大豆油，容易产生过敏反应。
[0019] 申请号为201210419120. 6的专利制备了一种稳定、高效的丙泊酚中/长链脂肪乳 注射液，它比普通的丙泊酚脂肪乳更稳定，同时，能明显减少注射疼痛的发生率，改善了病 人的顺应性，但是它含有的天然蛋黄卵磷脂容易产生过敏反应。
[0020] 授权公告号为CN 102552136 B的专利制备了一种丙泊酚中/长链注射液，其中不 含防腐剂依地酸二钠，减小了制剂的刺激性，但是它采用的天然蛋黄卵磷脂和大豆油仍会 产生过敏现象。
[0021] 申请号为CN 104288130 A的专利制备了一种注射用丙泊酚组合物，它通过添加助 溶剂丙二醇、非离子表面活性剂吐温20、吐温80、聚氧乙烯蓖麻油等增加丙泊酚在制剂中 的包封率，减少游离的丙泊酚所产生的注射疼痛，但是它添加的这些辅料会产生过敏刺激 性现象。
[0022] 为了解决丙泊酚注射液在临床所产生的过敏刺激反应和注射疼痛问题，本专利将 采取以下措施，同时，对比以上专利，本专利具有以下优势：①将丙泊酚注射液的脂肪乳剂 型改为脂质体剂型，此剂型不含市面上丙泊酚脂肪乳注射剂中的大豆油，从根源上避免了 大豆油中的微量蛋白导致的过敏现象；②本发明制剂的制备处方中采用人工合成磷脂替代 天然来源的卵磷脂，从根源上避免了天然来源的卵磷脂中微量蛋白所导致的过敏现象；③ 本制剂不含脂肪乳制剂中常用的吐温-80、EDTA-2Na、亚硫酸盐、硫代硫酸盐等辅料，进一步 避免产生过敏现象；④本专利将所得丙泊酚脂质体进一步冻干，在冻干后采用抽真空状态 压盖，使得瓶中为负压，彻底避免了丙泊酚及制剂中辅料的氧化降解，同时也有效防止了制 剂在保存过程中细菌的生长，从而杜绝了过敏现象；⑤本制剂采用特殊的制备处方和工艺， 使得丙泊酚在脂质体中的包封率达到98%以上，以避免游离的丙泊酚所产生的注射疼痛； ⑥本制剂制备的丙泊酚脂质体，其平均粒径小于l〇〇nm，避免了传统丙泊酚脂肪乳由粒径大 所产生的注射疼痛；⑦本发明制剂静脉给药后不会引起高甘油三酯血症；⑧本制剂采用冻 干保存，其含水量低，不易被氧化，稳定性好，利于制剂产品的长途运输和长期保存，并能充 分发挥脂质体载药系统的优势，降低药物的毒副作用，提高生物利用度。
[0023] 综上所述，本发明制备的一种无刺激和无痛的丙泊酚脂质体冻干制剂，解决了丙 泊酚注射液在临床所产生的过敏刺激反应和注射疼痛问题，具有临床安全性高、顺应性好、 制剂稳定性高、便于运输和储存等优点。
【发明内容】
[0024] 本发明的目的之一是提供一种无刺激过敏副作用的注射用丙泊酚脂质体冻干制 剂；
[0025] 本发明的第二个目的是提供无注射疼痛的注射用丙泊酚脂质体冻干制剂；
[0026] 本发明的第三个目的是提供无刺激和无痛的丙泊酚脂质体冻干制剂的制备方法。
[0027] 本发明为了得到一种无刺激和无注射疼痛的丙泊酚脂质体冻干制剂，将从制剂处 方和制剂工艺上严格控制：首先，为了减少刺激，本制剂从处方上杜绝使用一些可能引起刺 激的原料及辅料，同时，冻干后使所得产品瓶中为负压，从而杜绝外界空气进入，彻底避免 了丙泊酚及制剂中辅料的氧化降解，也有效防止了制剂在保存过程中细菌的生长，进一步 杜绝了过敏现象；其次，为了减少注射疼痛，本制剂提高了丙泊酚在脂质体中的包封率，以 减少丙泊酚的泄露，同时减小制剂的粒径，从而减轻注射疼痛。
[0028] 对于大多数的脂质体药物制剂，被包裹的药物的药学性质主要由脂类包裹物的组 成和浓度所控制。为了形成包封率高的丙泊酚脂质体注射剂，重要的是寻找能与丙泊酚相 容性良好、包封率高不渗漏、同时提供适当释放性能的成膜材料，以及寻找能使丙泊酚脂质 体稳定的赋形剂成分。
[0029] 本发明人通过大量的试验研究发现：针对丙泊酚的特点，二棕榈酰磷脂酰胆碱 (DPPC)、二肉豆蔻磷脂酰甘油（DMPG)和胆固醇组合应用特别适于作为基础磷脂成膜材料， 可以形成品质良好的丙泊酚脂质体注射剂，从而达到本发明的目的。
[0030] 二棕榈酰磷脂酰胆碱价格相对较低，容易得到，其相变温度较高，易于形成稳定的 脂质体膜。为了增加丙泊酚在脂质体中的包封率，增加丙泊酚脂质体的稳定性，本发明人在 大量的筛选试验时意外发现：当使用二棕榈酰磷脂酰胆碱、二肉豆蔻磷脂酰甘油和胆固醇 组合时，制备出的丙泊酚脂质体包封率高、稳定性好；而使用除之外的任何磷脂和或胆固醇 组合时，均没有获得包封率高的脂质体，所得脂质体在高温40°C、相对湿度75% ±5%的加 速试验下，粒径、包封率和稳定性等性质较差。
[0031] 本发明的丙泊酚脂质体注射剂中，相对于1重量份的丙泊酚，二棕榈酰磷脂酰胆 碱的用量为2~60重量份。如果二棕榈酰磷脂酰胆碱的用量低于2重量份，则无法形成稳 定的脂质体；反之，如果二棕榈酰磷脂酰胆碱的用量高于60重量份，则形成的丙泊酚脂质 体粘稠，不易冻干。
[0032] 本发明的脂质体中，二肉豆蔻磷脂酰甘油为本发明优选的负电荷磷脂，二肉豆蔻 磷脂酰甘油与二棕榈酰磷脂酰胆碱相结合使用特别适用于作为丙泊酚脂质体的基础成膜 材料，二肉豆蔻磷脂酰甘油有效地增大了脂质体表面的Zeta电位绝对值，使脂质体表面的 静电斥力增大，能有效抑制脂质体的聚集。在冻干粉针制备过程中，预冻阶段随着脂质体外 水相冰析出，脂质体不断被浓缩，聚集的趋势增大，而加入负电荷磷脂可以有效地阻止此时 脂质体的聚集，保证丙泊酚脂质体冻干粉针复溶后的粒径稳定在一定范围内。
[0033] 本发明的丙泊酚脂质体注射剂中，胆固醇用于调节脂质体的膜稳定性和通透性， 以获得稳定的丙泊酚脂质体注射剂和适当的丙泊酚释放。胆固醇是一种很好的脂质膜稳定 剂，胆固醇可阻止其凝聚成晶体结构。胆固醇掺入二棕榈酰磷脂酰胆碱和二肉豆蔻磷脂酰 甘油的双层，能提高该双层膜之间的化学能，从而提高脂质体的化学稳定性。所以，胆固醇 能使脂质体双分子膜