青稞麸皮提取物在制备α-葡萄糖苷酶活性抑制剂中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及农副产品深加工及综合利用领域；更具体地涉及青稞麸皮提取物在制 备α-葡萄糖苷酶活性抑制剂中的应用。
【背景技术】
[0002] 糖尿病（DiabetesMellitus，DM)及其并发症严重威胁着人类的健康，第17届国 际糖尿病大会报道，全球已确诊1. 5亿人，预测2025年将增至3亿。在发达国家DM患病率 已达3 %~7 %，成为仅次于癌症、艾滋病、心血管病之后第4位需要优先考虑的疾病，已成 为世界第5位死亡主因。我国的情况也不容乐观，2015年国家卫计委发布的《中国居民营养 与慢性病状况报告》中指出，当前我国18岁及以上成人糖尿病患病率为9. 7%，约已经达到 了 1.06亿，还有上亿糖尿病高危人群。因而研究开发预防糖尿病发生的功能食品和高效、 无毒副作用的降糖药物，是刻不容缓的事情。
[0003] α-葡萄糖苷酶（a-Glucosidase)位于小肠刷状细胞表面。多糖只有水解 成单糖后才能被人体吸收，而α-葡萄糖苷酶是多糖水解中的关键酶类[KimSD，Nho HJ.Isolationandcharacterizationofa-glucosidaseinhibitorfromthe fungusganodermalucidm.J.Microbiology, 2004, 42, 223-227]，是人体糖代谢中最重 要的酶之一。研究表明，α-葡萄糖苷酶抑制剂类药物能够通过降低α-葡萄糖苷酶 的活性、调节餐后胃肠激素的方式而有效控制餐后血糖的升高，产生较为理想的降糖效 果[RequejoF,UttenthalL0,BloomSR.Effectsofa-glucosidaseinhibitionand viscousfibreondiabeticcontrolandpostprandialguthormoneresponse. DiabetMed, 1990,7,515-520][MoritohY,TakeuchiK,HazamaM.Voglibose,and alpha-glucosidaseinhibitor,toincreaseactiveglucagon-likepeptide-llevels. MolCellPharmacol, 2009, 1，188-192]。a-葡萄糖苷酶抑制剂，依其来源可划分为微生物 代谢物、天然动植物或微生物提取物和化学合成物三大类。目前已被批准用于临床糖尿病 治疗的α-葡萄糖苷酶抑制剂主要为化学合成药物，包括：阿卡波糖（Acarbose)、伏格列波 糖（Voglibose)和米格列醇（Miglitol)。因长期服用化学合成药物会产生副作用，因此从 天然植物中获得更安全、高效的抑制剂的寻求仍然是II型糖尿病治疗药物和功能性食品开 发的研究热点。
[0004] 目前，应用到临床的α-葡萄糖苷酶抑制剂多为糖及其衍生物类的竞争性抑制 剂，而α-葡萄糖苷酶非竞争性抑制剂通过与酶的非活性部位结合导致其酶活性降低， 基本上属于非糖基化合物。通常，非竞争性抑制剂大都是通过筛选随机得到的。已报道 的从天然产物中得到的α-葡萄糖苷酶非糖基化合物抑制剂并没有统一的结构模型，种 类繁多，包括：姜黄素类、黄酮类、咕吨酮类、喹唑啉类、Schulzeine、芪类和萜类等[Melo EB,GomesASandCarvalhoI.a-andβ-glucosidaseinhibitors:chemicalstructure andbiologicalactivity.Tetrahedron, 2006,62:10277-10302]。因此，从天然产物 中筛选α-葡萄糖苷酶非竞争性抑制剂是寻找高效治疗II型糖尿病药物的有效途径。CN101849973.Α公开了具有降血糖作用的桦褐孔菌总三萜的制备方法，方法中依次采用乙 醇水溶液提取、石油醚萃取、正丁醇萃取、干燥等工艺，获得三萜含量70-300mg/g的桦褐孔 菌总三萜提取物。CN101953867.A公开了具有α-葡萄糖苷酶抑制作用的天山雪莲石油醚 提取物的制备方法。CN101810625A公开一种含量为5%~100%的蒲公英甾醇对α-葡萄 糖苷酶和α-淀粉酶的抑制作用。CN103705593A公开了从矮生二裂叶委陵菜中提取α-葡 萄糖苷酶抑制剂的方法，具体步骤：原料经粉碎后用6倍体积的70%乙醇回流提取，提取液 浓缩后依次进行石油醚、乙酸乙酯萃取，萃取液真空干燥得α-葡萄糖苷酶抑制剂。已报道 的技术通常含有多步提取、萃取过程，步骤均较为繁琐。
[0005] 青稞（HordeumvulgareL.var.nudumhook.f.)是我国青藏高原地区特有的一种 尚蛋白、尚纤维、尚维生素、低脂肪、低糖的多棱裸粒大麦。由于青棵生长在尚海拔地区，尚 寒、缺氧、强光照的极端环境，青稞相比其他谷物含有更丰富的次生代谢产物和更明显的保 健特性。人群调查试验已对青稞降血脂、降体重、改善胰岛素敏感性等保健作用进行了验 证，同时，青稞中的β-葡聚糖降血脂、降胆固醇、改善胰岛素敏感性等药理活性也已被证 实。此外，朱颖秋等研究结果显示超临界C02萃取的青稞麸皮油对实验性高脂血症大鼠的血 脂有很明显的调节作用，可预防动脉粥样硬化的发生[朱颖秋，蒋思萍，包善飞，等.超临界 C02萃取青稞麸皮油对高脂血症大鼠降脂作用研究[J].四川动物，2013, 32 (2) :272-275]。 报道并未涉及超临界〇)2萃取的工艺参数，且该研究认为青稞麸皮油中的亚油酸、十八碳烯 酸是降低血清TC、LDL-C的有效成分。
[0006] 总体而言，对青稞麸皮提取物的制备工艺及其功效作用的研究报道仍较少，且以 对β-葡聚糖、花色苷、黄酮等为主。中国专利文献CN101555294A公开了利用二次纤维素 酶酶解青稞麸皮，后续经过碱提离心、酸提离心除蛋白、高温α-淀粉酶酶解、离心醇沉、硫 酸铵沉淀等系列工艺后分别制得β-葡聚糖和青稞膳食纤维；CN104725526A公开了利用碱 提酸沉、过滤脱色、浓缩等步骤制备β-葡聚糖的方法；CN201410350638. 8公开了一次性连 续分离青稞蛋白、淀粉、纤维素和β-葡聚糖的方法，具体包括以下步骤：将青稞粉碎，粉碎 产物中加水并调节pH提取，过筛，筛上物烘干研磨后得青稞纤维粉；筛下物离心得第一沉 淀物为青稞淀粉；第一上清液调节pH离心后得第二沉淀物为青稞蛋白；第二上清液超滤得 透过液浓缩离心得第三沉淀物为青稞β-葡聚糖；CN200710039964. 7公开了以β-葡聚糖 为主成分的青稞提取物在治疗神经干细胞缺血药物中的应用；CN200910168946. 8公开了 含青稞β-葡聚糖的降血脂药物的配方及其制剂；CN201310196869. 3公开从紫色青稞中 分离花色苷的方法；CN201310400124. 4公开了黑青稞籽皮类黄酮及其制备方法与应用，该 黑青稞籽皮类黄酮具有预防和治疗缺氧损伤的作用；CN101696381A公开了用常规含水醇 溶媒回流提取青稞幼苗中黄酮类化合物的制备新工艺，方法中采用管式离心机除去杂质、 陶瓷膜过滤澄清、超滤膜截留分离和纳滤膜脱盐浓缩等工序，最后经喷雾干燥或微波干燥 制得含总黄酮80. 1%~14. 9%的青稞黄酮提取物；CN201410604115. 1公开了青稞膳食纤 维-多酚复合物的制备方法；CN201410603523. 5公开了青稞膳食纤维中多酚化合物的分离 方法；CN201410151798.X公开了青稞胚芽油闪式提取的制备方法，获得的胚芽油富含维生 素Ε、维生素D和谷维素；CN201410851568. 4公开了一种对糖尿病患者有保健功能的蚕豆 青稞饼干及其生产方法；CN201310506264.X公开了一种具有抗疲劳功能的含青稞苗提取 物的青稞全粉饼干，该饼干能显著提高小鼠的爬杆和负重游泳时间；另有多项专利涉及了 降低血脂、提高人体免疫力、提高记忆力、预防心血管疾病等功能的含有青稞或青稞提取物 的保健食品、饮