溶液，制得银杏叶提取物溶液，浓 度为150mg/mL，过0.45μηι微孔滤膜，进行一维液相色谱制备。一维液相色谱采用以硅胶为基 质的亲水型色谱填料(50\250臟，1(^!11，华谱新创科技有限公司），流动相采用乙醇为有机 相，水为水相，有机相浓度为95 %等度，采用DAD紫外检测器360nm选择吸收波长，制备温度 为室温，进样量为800yL/针，流动相流速为I lOmL/min，收集15-20分钟的组分和剩余组分， 将收集到的15~20分钟的组分进行旋转蒸发浓缩至干，为一维制备山奈酚-3-0-对香豆酰 基葡萄糖鼠李糖苷粗品。用60 %的乙醇一水溶液溶解山奈酚-3-0-对香豆酰基葡萄糖鼠李 糖苷粗品，浓度为200mg/mL，经微孔滤膜过滤，进行二维液相色谱制备，色谱柱为以硅胶为 基质键合C18反相填料（50 X 150mm，1 Ομπι，华谱新创科技有限公司），流动相选择乙醇（含 0.1 %甲酸)为有机相，水(含0.1%甲酸)为水相，采用等度洗脱方式，有机相浓度为15%共 60分钟。采用DAD紫外检测器360nm选择吸收波长，制备温度为室温，进样量为2500μ!7针，流 动相流速为100mL/min，收集保留时间50-55min的馏分，旋转蒸发至干，得到山奈酸-3-0-对 香豆酰基葡萄糖鼠李糖苷化合物，经液相色谱分析，二维制备的山奈酚-3-0-对香豆酰基葡 萄糖鼠李糖苷粗品中山奈酚-3-0-对香豆酰基葡萄糖鼠李糖苷的含量为95.7%，一维制备 山奈酚-3-0-对香豆酰基葡萄糖鼠李糖苷粗品中山奈酚-3-0-对香豆酰基葡萄糖鼠李糖苷 的含量为33 %。
[0147] 同实施例1分别采用质谱、IH-匪R和13C_WR(MeOD)对得到的终产物进行分析，最 终确认得到的为山奈酚-3-0-对香豆酰基葡萄糖鼠李糖苷。
[0148] 槲皮素-3-0-2"，6"_二鼠李糖基葡萄糖苷的制备
[0149] 将银杏叶提取物100g，溶于体积浓度70 %的乙醇一水溶液，制得银杏叶提取物溶 液，浓度为150mg/mL，过0.45μπι微孔滤膜，进行一维液相色谱制备。一维液相色谱采用以硅 胶为基质的亲水型色谱填料(50乂25〇 111111，1(^111，华谱新创科技有限公司），流动相采用乙醇 为有机相，水为水相，有机相浓度为95 %等度，采用DAD紫外检测器360nm选择吸收波长，制 备温度为室温，进样量为800μ!7针，流动相流速为I lOmL/min，收集30-32分钟的组分和残余 组分，将收集到的30 - 32分钟的组分进行旋转蒸发浓缩至干，为一维制备槲皮素-3-0-2"， 6" -二鼠李糖基葡萄糖苷粗品。用60 %的乙醇一水溶液溶解槲皮素-3-0-2"，6" -二鼠李糖基 葡萄糖苷粗品，浓度为200mg/mL，经微孔滤膜过滤，进行二维液相色谱制备，色谱柱为以硅 胶为基质键合C18反相填料（50 X 150mm，ΙΟμπι，华谱新创科技有限公司），流动相选择乙腈 (含0.1%甲酸)为有机相，水(含0.1%甲酸)为水相，采用等度洗脱方式，有机相浓度为20% 共60分钟。采用DAD紫外检测器360nm选择吸收波长，制备温度为室温，进样量为2500μ!7针， 流动相流速为100mL/min，收集保留时间40-45min的组分，旋转蒸发至干，得到槲皮素-3-0-2"，6"_二鼠李糖基葡萄糖苷化合物。
[0150] 同实施例1分别采用质谱、1H-NMR和13C-NMR(MeOD)对得到的终产物进行分析，最终 确认得到的为槲皮素-3-0-2"，6" -二鼠李糖基葡萄糖苷。
[0151 ] S3由银杏叶提取物形成的中药组合物的制备方法
[0152] 将所述残余组分和所述剩余组分旋转蒸发去除容积后混合，并干燥得到辅助品， 将所述辅助品、所述山奈酚-3-0-对香豆酰基葡萄糖鼠李糖苷和所述槲皮素-3-0-2"，6"_二 鼠李糖基葡萄糖苷混合得到本实施例的由银杏叶提取物形成的中药组合物。
[0153] 采用高效液相色谱对本申请的中药组合物进行检测，以所述中药组合物的质量百 分比计，银杏总黄酮37%，银杏内酯14%，银杏酸lppm，山奈酚-3-0-对香豆酰基葡萄糖鼠李 糖苷3.16 %，槲皮素-3-0-2"，6" -二鼠李糖基葡萄糖苷3.45%，银杏内酯A2.47 %，银杏内酯 BI. 4%和银杏内酯Cl. 3%，还检测有白果内酯和芦丁等化学成分。
[0154] S4银杏叶酊的制备
[0155] 取上述由银杏叶提取物形成的中药组合物0.4g，溶解于IOml体积浓度为60 %的乙 醇水溶液中形成银杏叶酊。
[0156] 临床实验
[0157] 本试验按照《中药品种保护条例》规定要求，由专家技术指导小组制定方案，全部 试验采用随机对照开放临床试验，由中南大学湘雅医院、中南大学湘雅三医院和冷水江市 中医院3豕医疗单位完成。
[0158] ( - )诊断标准
[0159] 1、冠心病心绞痛：
[0160] (1)心绞痛发作时可有心率增快、血压升高、焦虑、出汗，有时可闻及第四心音、第 三心音或奔马律，或出现心尖部收缩期杂音，第二心音逆分裂，偶闻双肺底啰音。
[0161] (2)心电图检查心电图异常包括ST段和T波改变、房室传导阻滞、束支传导阻滞、左 束支前分支或后分支阻滞、左心室肥大或心律失常等，疼痛发作时心电图可呈典型的缺血 性ST段压低的改变
[0162] (3)经休息或舌下含服硝酸甘油可缓解症状者。
[0163] 2、脑梗死
[0164] (1)突然起病，迅速出现局灶性神经功能缺损症状和体征，持续24h以上；
[0165] (2)可见的局灶性神经功能缺损的症状和体征，包括偏瘫、偏身感觉障碍、偏盲、言 语障碍、眩晕、吞咽困难、共济失调等；
[0166] (3)神经影像学检查:发病24h内常规头颅CT扫描多无明显改变，24~48h后可有梗 死区低密度改变;头颅MRI扫描能早期发现梗死灶，T，呈低信号，T，呈高信号，弥散加权成像 (DW[)和灌注加权成像(PWI)有助于缺血半暗带判断；磁共振血管成像(MRA)XT血管成像 (cTA)等检查，对明确病因或确定闭塞或狭窄血管的部位有益。
[0167] (二)病例选择标准
[0168] 1、纳入病例标准
[0169] 凡符合冠心病心绞痛、脑栓塞诊断属于血瘀证证型者，为纳入对象。
[0170] 2、排除病例标准
[0171] (1)合并中度以上高血压，重度心肺功能不全，重度心律失常，肝、肾、造血系统等 严重原发性疾病，精神病患者；
[0172] (2)妊娠或哺乳期妇女及过敏体质者。
[0173] (3)未按规定服药，无法判定疗效或资料不全等影响疗效判断或安全性判断者。
[0174] (三)用药方法及要求
[0175] 1、用药方法·
[0176] ⑴治疗组：
[0177] 冠心病心绞痛：
[0178]予实施例1制备得到的银杏叶酊剂每次2ml，l日3次，连服4周，可同时服用硝酸异 山梨酯，肠溶阿司匹林，心绞痛发作时可临时含服硝酸甘油，住院受试者必要时可给予低分 子肝素、硝酸甘油注射剂等。除此之外，不服用对本病有治疗作用的其他药物。
[0179] 急性脑梗死：
[0180] 予实施例2制备得到的银杏叶酊剂每次2ml，l日3次，连服4周。观察期间两组均给 予肠溶阿司匹林，住院受试者必要时可根据病情使用甘露醇脱水减轻脑水肿，防止酸碱水 电解质紊乱，神经细胞活化剂，加强护理，防止并发症等。除此之外，不服用对本病有治疗作 用的其他药物缺血性脑血管病：
[0181 ] 治疗组予实施例3制备得到的银杏叶酊剂每次2ml，1日3次，连服4周，同时服用阿 司匹林片及神经保护剂、降压、调脂、控制颅压药物，抗凝治疗应酌情使用。
[0182] (2)对照组冠心病心绞痛：
[0183] 予银杏叶片（江苏扬子江药业生产，批号:07042901)每次2片，1日3次，连服4周，可 同时服用硝酸异山梨酯，肠溶阿司匹林，心绞痛发作时可临时含服硝酸甘油，住院受试者必 要时可给予低分子肝素、硝酸甘油注射剂等。除此之外，不服用对本病有治疗作用的其他药 物。
[0184] 急性脑梗死：
[0185] 予银杏叶片(江苏扬子江药业生产，批号:07042901)每次2片，1日3次，连服4周。观 察期间两组均给予肠溶阿司匹林，住院受试者必要时可根据病情使用甘露醇脱水减轻脑水 月中，防止酸碱水电解质紊乱，神经细胞活化剂，加强护理，防止并发症等。除此之外，不服用 对本病有治疗作用的其他药物。
[0186] 缺血性脑血管病
[0187] 予银杏叶片(江苏扬子江药业生产，批号:07042901)每次2片，1日3次，连服4周，同 时服用阿司匹林片及神经保护剂、降压、调脂、控制颅压药物，抗凝治疗应酌情使用。
[0188] (四）观察指标及检测项目
[0189] 1、疗效观察：
[0190] (1)临床症状，体征、舌象变化等。
[0191] (2)血常规、尿常规，电解质，血脂，肝肾功能，血液流变学(包括全血黏度、血浆黏 度、红细胞聚集性、红细胞变形性等)等。
[0192] 2、安全性观测：
[0193] (1)-般体格检查项目。
[0194] (2)治疗前后血常规、尿常规、便常规检查(治疗前后各查1次）。
[0195] (五)终止治疗试验指征
[0196] (1)中途不合作，失访或死亡者。
[0197] (2)治疗期间，加用与本试剂有类似作用的中西药物。
[0198] (3)在用药过程中，因有出血倾向及严重不良反映，过敏反应而停药者。
[0199] (六)疗效评定标准
[0200] 冠心病心绞痛:疗效按照《中药新药临床研究指导原则》
[0201]显效:心纟父痛症状消失或基本消失；
[0202] 有效:心绞痛发作次数减少50%，发作程度及持续时间明显减轻；
[0203] 无效:症状基本与治疗目前症状相同
[0204] 急性脑梗死:参照第四届全国脑血管病会议通过的标准，观察治疗前及治疗Hd后 血液流变学指标及神经功能缺损评分及病残程度。疗效评定分为
[0205] 基本治愈:功能缺损评分减少91 %~100%，病残程度为0级：
[0206] 显著进步:功能缺损评分减少46%~90%，病残程度为1~3级：
[0207] 有效:功能缺损评分减少18%~45%，病残程度为4级：
[0208] 无效:功能缺损评分减少< 17%，病残程度为5级：
[0209] (5)恶化:神经功能缺损评分减少或增多18%以上。
[0210]缺血性脑血管病:参照《中药新药临床研究指导原则》:临床疗效评定标准：
[0211] 基本痊愈:功能缺损评分减少90%-100%，病残程度0级；
[0212] 显著进步:功能缺损评分减少46%-89%，病残程度1-3级；
[0213] 进步:功能缺损评分减少18%-45% ;
[0214]无变化:功能缺损评分减少或增加 18%以内；
[0215]恶化:功能缺损评分增加18 %以上；
[0216](七)不良反应的观察。
[0217] 如实记录各种不良反应及其出现时间、严重程度及处理方法、
[0218]效果。（八)统计方法：。
[0219]采用SSPS/PC+软件，对有关数据进行配对资料t检验和卡方检验。
[0220] 三、试验结果
[0221 ]试验结束共收集资料564例，不符合入选标准的病例8例，中途退出15例。疗效统计 病例数为303例，临床