、紫外线消毒灯。
[0102] 1. 2. 2实验动物手术设备
[0103] 无菌手术房间、动物手术台、无影灯、旁照灯、头灯、空调和通风设备、紫外线消毒 灯、负压吸引器、动物固定束缚带、狗头夹等。
[0104] 1. 2. 3实验动物手术器械
[0105] 动物实验无菌手术包：各种型号手术止血钳、卵圆钳、组织钳，各种型号手术刀柄、 刀片，甲状腺拉钩、S型拉钩，持针器，各种型号圆针、三角针，弯盘、圆碗，各种型号手术缝 线，可吸收手术缝线，吸引器弯头及管道，无菌手术巾和洞巾，无菌注射器和输液器，无菌纱 布和纱布垫等。
[0106] 1.2. 4实验检测设备
[0107] 全自动生化分析仪瑞士罗氏公司，C501
[0108] 血常规分析仪 英国DREWScientific公司，HEMAVET950
[0109] 高速离心机 上海安亭科学仪器厂，TDL-80-2B
[0110] 1.3实验药品
[0111] 戊巴比妥钠，生理盐水，葡萄糖注射液，葡萄糖生理盐水注射液，青霉素G，碘伏， 75 %酒精。
[0112] 2?实验方法
[0113] 2. 1实验动物与麻醉方法
[0114] 2. 1. 1术前准备
[0115] 术前禁食6小时。
[0116] 2. 1.2实验动物麻醉
[0117] 麻醉前称重。采用3%戊巴比妥经比格犬前肢内侧皮下头静脉（lmL/kg)麻醉。
[0118] 2. 1. 3实验过程中麻醉维持
[0119] 经由比格犬前肢内侧皮下头静脉留置针追加3%戊巴比妥（lmL/kg)麻醉。
[0120] 2. 2实验方法
[0121] 2. 2. 1手术步骤（第一次手术）
[0122] 麻醉成功后，实验比格犬取仰卧位，固定四肢和头部，保持呼吸道畅通。剪去实验 比格犬腹部体毛，范围上至剑突上5cm，下至双侧髂前上棘连线，两侧至腋前线。固定及脱 毛后，用碘伏消毒胸腹部，铺无菌单。取上腹部正中切口，长8-lOcm，逐层进腹，腹壁切口充 分止血，探查肝脏、胆囊、胃、肠管、脾脏等器官有无异常和病变，探查腹腔内有无渗夜、粘连 等。充分暴露肝十二指肠韧带和胆囊，仔细观察肝外胆管走行方向。于十二指肠上缘lcm 处剪开肝十二指肠韧带浆膜层，4号慕思线松散结扎胆总管，无菌纱布清理腹腔内渗血和积 液，清点器械后，逐层关腹，不放引流。手术时间均在45分钟以内。
[0123] 2. 2. 2术中情况处理
[0124] 术中静脉推注青霉素1支（160万单位/支）预防感染。
[0125] 2. 2. 3术后处理
[0126] 术后比格犬苏醒后按实验动物饲养方案饲养，注意观察神志、精神状态、进食情况 和生命体征变化。术后3天使用青霉素早、晚各1次（160万单位/天）。
[0127] 2. 2. 4实验动物血常规和血液生化指标检测
[0128] 术前和建模成功后血细胞分析、肝功能、胆红素。
[0129] 3.结果
[0130] 术后3天存活为建模成功。术中可充分暴露胆囊、胆总管，能清楚显示出胆囊管与 胆总管解剖关系，胆总管能可靠结扎，建模均成功。
[0131] 实施例6:纳米银粒子涂层胆管支架拮抗胆管沉积物的实验研宄
[0132] 1实验材料
[0133] 1.1实验动物
[0134] 梗阻性黄疸比格犬动物模型建立成功后的12只实验比格犬，由山东大学弘立医 学动物实验研宄有限公司提供和饲养，雌雄不限，体重在l〇_13Kg之间。饲养环境相同，分 笼饲养，统一重量的犬粮和饮用水，自由进食饮水，笼舍环境温度22-28°C，湿度40-60。
[0135] 将实验动物随机分成两组：实施例1制备的纳米银粒子涂层胆管支架，简称AgNPs 涂层胆管支架组；聚四氟乙烯（Teflon)胆管支架组，简称Teflon胆管支架组。
[0136] 1.2实验仪器
[0137]
【主权项】
1. 一种拮抗沉积的纳米银粒子涂层胆管支架的制备方法，其特征在于，步骤如下： (1) 将胆管支架浸泡于无水乙醇中，超声振荡1-1. 5小时，并用注射器将无水乙醇打入 胆管支架内部，控制在胆管支架内部无气泡产生； (2) 将步骤（1)处理后的胆管支架取出，干燥，置于萘钠处理液中，腐蚀3-5小时； (3) 将步骤（2)处理后的胆管支架用水超声清洗4-6分钟，不间断用冲洗球冲洗胆管支 架官腔内壁，除去胆管支架表面和管腔内残留的萘钠处理液； (4) 将步骤（3)清洗后的胆管支架放入粗化液中，进行粗化处理，处理温度为35-40°C， 处理时间为30-45分钟；所述粗化液为发烟硝酸和水按体积比4:15混合的溶液； (5) 将步骤（4)粗化处理后的胆管支架用水超声清洗4-6分钟，除去支架表面和管腔内 残留的粗化液； (6) 在避光条件下将步骤（5)清洗后的胆管支架放入敏化液中进行敏化处理，敏化处 理时间为25-35分钟，敏化温度为22-30°C ; (7) 将步骤（6)敏化处理后的胆管支架用水迅速涮洗，除去支架表面和管腔内残留的 敏化液； (8) 在避光条件下将步骤（7)清洗后的胆管支架放入到活化液中进行活化处理，活化 处理时间为25-35分钟，处理温度为22-30°C ;所述活化液的组成为：硝酸银、去离子水、氨 水、去离子水按（0. 3-0. 4) g : (15-20) ml :1ml :9ml 混合； (9) 将步骤（8)活化处理后的胆管支架用水超声清洗4-6分钟，除去支架表面和管腔内 残留的活化液，干燥，采用过氧化氢低温等离子灭菌，即得。
2. 如权利要求1所述的拮抗沉积的纳米银粒子涂层胆管支架的制备方法，其特征在 于，步骤⑵中萘钠处理液的加入量、步骤⑷中粗化液的加入量、步骤（6)中敏化液的加 入量和步骤（8)中活化液的加入量，均以能没过胆管支架为宜。
3. 如权利要求1所述的拮抗沉积的纳米银粒子涂层胆管支架的制备方法，其特征在 于，步骤（6)中，所述敏化液的组成为：311(：1 2、11(：1和1120按18:41^:961^混合。
4. 如权利要求3所述的拮抗沉积的纳米银粒子涂层胆管支架的制备方法，其特征在 于，步骤（6)中，敏化液的制备方法为：将HCl加入到H 2O中，再加入SnCl2。
5. 如权利要求1所述的拮抗沉积的纳米银粒子涂层胆管支架的制备方法，其特征在 于，步骤（8)中，活化液的制备方法为：将（0.3-0.4化硝酸银溶于（15-20)!111去离子水中， 制得硝酸银溶液；向Iml氨水中加入9ml去离子水，制得氨水溶液，将氨水溶液滴加到硝酸 银溶液中，即得活化液。
6. 如权利要求1所述的拮抗沉积的纳米银粒子涂层胆管支架的制备方法，其特征在 于，步骤（9)中，低温等离子灭菌的灭菌温度为42-50°C，灭菌剂为质量浓度为58-59%的 H 2O2，电压为 380V〇
7. 如权利要求1所述的拮抗沉积的纳米银粒子涂层胆管支架的制备方法，其特征在 于，步骤（2)中，胆管支架在萘钠处理液中的腐蚀时间为4小时。
8. 如权利要求1所述的拮抗沉积的纳米银粒子涂层胆管支架的制备方法，其特征在 于，步骤（6)中，敏化处理的时间为30min。
9. 如权利要求1所述的拮抗沉积的纳米银粒子涂层胆管支架的制备方法，其特征在 于，步骤（8)中，活化处理时间为30分钟，处理温度为25°C。
【专利摘要】本发明公开了一种拮抗沉积的纳米银粒子涂层胆管支架的制备方法，将胆管支架先用无水乙醇浸泡后，清洗，采用萘钠处理液对胆管支架进行腐蚀，然后依次用粗化液、敏化液和活化液进行处理，经过氧化氢低温等离子灭菌制备得到纳米银粒子涂层胆管支架。本发明制备得到的纳米银粒子涂层胆管支架的涂层厚度为1.5-6μm，纳米银粒子的粒径分布范围为60-80nm，不易团聚，粒子分散情况较好，具有较好的拮抗胆管沉积的作用。
【IPC分类】C23C18-28, C23C18-44, C23C18-30, B82Y40-00
【公开号】CN104846355
【申请号】CN201510181920
【发明人】田虎, 付真, 张帅, 夏明峰
【申请人】山东省千佛山医院
【公开日】2015年8月19日
【申请日】2015年4月16日