一种环肽类化合物及其制备方法和应用与流程

技术特征：

1.一种环肽类化合物，由亮氨酸组成，化学通式为环-leu-[leu]_n-，其特征在于，所述环肽类化合物中亮氨酸以肽键相互连接成环，n为1到7的整数，依次构成环二肽到环八肽。

2.如权利要求1所述环肽类化合物，其特征在于，该环肽类化合物的结构式分别为：

3.如权利要求1或2所述环肽类化合物，其特征在于，n为2。

4.一种含有权利要求1所述环肽类化合物的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括环二肽到环八肽共7种化合物或其药学上可接受的衍生物及盐类，该环二肽到环八肽的重量比为2-5：28-32：14-18：1-3：30-35：1：2-5。

5.如权利要求4所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物为药物制剂，由权利要求1所述的环肽类化合物及其药学上可接受的衍生物和盐类作为活性成分和药学上可接受的赋形剂组成。

6.一种权利要求1所述的环肽类化合物的提取方法，其特征在于，由以下步骤组成：

1)取鱼腥草全草粉碎，用水蒸汽蒸馏法得挥发油粗品，再用乙醚溶解，加硫酸溶液萃取多次，合并上层有机相，得到混合溶液；

2)向混合溶液中加氢氧化钠溶液萃取多次，合并下层水相，再加硫酸溶液和乙醚萃取多次，合并上层有机相，减压蒸去溶剂即得鱼腥草挥发油；

3)将鱼腥草挥发油进行快速减压柱色谱或常压柱色谱分离，石油醚-乙酸乙酯混合溶剂梯度洗脱，每固定体积为一馏分，收集多个馏分，经硅胶薄层层析检识，合并馏分；馏分经正相制备高效液相色谱等度洗脱分离得到多个馏分，所述梯度洗脱馏分经反相制备高效液相色谱梯度洗脱分离，去除溶剂得到所述环肽类化合物。

7.如权利要求6所述提取方法，其特征在于，由以下步骤组成：

1)取鱼腥草全草6000g，用水蒸汽蒸馏法加热2～5小时，得挥发油粗品，再用20～50倍乙醚溶解，置分液漏斗中加浓度8％～15％硫酸20～30ml萃取1～5次，取上层有机相，得到混合溶液；

2)向混合溶液中加质量体积分数1％～3％氢氧化钠溶液20～30ml萃取1～5次，取下层水相，再加浓度8％～15％硫酸20～30ml与相较挥发油粗品20～50倍的乙醚萃取1～5次，取上层有机相，减压蒸干溶剂即得挥发油样品100～300g；

3)挥发油样品进行快速减压柱色谱或常压柱色谱分离，所述石油醚的沸程为30～60℃，或60～90℃，所述石油醚-乙酸乙酯混合溶剂分别为体积比100:1、50:1、30:1、20:1、0:1五种流动相,分别逐次进行洗脱，柱子填料为200-300目柱层析凝胶，每300～500ml体积为一馏分，共收集到40～60个馏分，经硅胶薄层层析检识，合并得到5个馏分；5个馏分分别进行生物活性测试，选用活性最高的馏分经正相制备高效液相色谱正己烷-异丙醇等度洗脱，正己烷-异丙醇体积比为0.35％:1，流速1-3ml/min分离，色谱柱为安捷伦ZORBAX,9.4×250mm,5μm；得到8个馏分，8个馏分分别进行生物活性测试，选用活性最高的馏分经反相制备高效液相色谱进行梯度洗脱，所述反相制备高效液相色谱的流动相为乙腈和水，洗脱流程为：0min，乙腈：水的体积比20％：80％到30min，乙腈：水为100％：0，流速0.5-1.5ml/min,柱子为Thermo C18ODS柱,，旋转蒸发去除溶剂，得到环肽类化合物A～G。

8.一种权利要求1所述的环肽类化合物的合成方法，其特征在于，由以下步骤组成：

a)L-亮氨酸和Boc-亮氨酸为初始原料合成保护型二肽；

b)在步骤a)保护型二肽基础上，再与一分子Boc-亮氨酸合成保护型三肽；

c)在步骤a)保护型二肽基础上，由一分子脱Boc-保护基的二肽和一分子脱酯基的二肽，合成保护型四肽；依次合成保护型五肽到八肽；

d)所述步骤a所述保护型二肽脱去Boc-保护基，在甲醇中回流，环合成环二肽；

e)将步骤b)，c)所述的保护下三肽到八肽分别进行进一步脱去Boc保护基和甲酯保护基，在缩合剂的作用下，依次合成环三肽到环八肽。

9.如权利要求8所述的合成方法，其特征在于，由以下步骤组成：

a)L-亮氨酸与甲醇和氯化亚砜在低温的下反应成亮氨酸甲酯盐酸盐，亮氨酸甲酯盐酸盐与BOC-亮氨酸以DIEA为缚酸剂，DCC与HOBT为混合缩合剂，二氯甲烷为溶剂缩合成保护型二肽；

b)保护型二肽在三氟乙酸：二氯甲烷，体积比1:4的作用下脱掉BOC-保护基，生成二肽的三氟乙酸盐；在低温的条件下，以DIEA为缚酸剂，DCC与HOBT为混合缩合剂，二氯甲烷为溶剂与Boc-亮氨酸缩合成保护型的三肽；

c)上步的保护型三肽再在三氟乙酸：二氯甲烷，体积比1:4的作用下脱掉Boc-保护基；脱去BOC-保护基的三肽甲酯在氢氧化钠和水，体积比1:1的作用下脱去甲酯保护，生成三肽，三肽再在HATU与PyBOP缩合剂的存在下，以DIEA为缚酸剂，以四氢呋喃和二氯甲烷为溶剂，缩合成环三肽。

10.权利要求1所述的环肽类化合物在制备治疗炎症或细菌性疾病的药物中的应用。