一种用于检测神经母细胞瘤的引物组及检测方法与流程

文档序号:12645054阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种用于检测神经母细胞瘤的引物组,其特征在于,所述引物组可以包含a~i9对引物,所述引物a的正向引物如SEQ ID No.1所示,引物a的反向引物如SEQ ID No.2所示,引物b的正向引物如SEQ ID No.3所示,引物b的反向引物如SEQ ID No.4所示,引物c的正向引物如SEQ ID No.5所示,引物c的反向引物如SEQ ID No.6所示,引物d的正向引物如SEQ ID No.7所示,引物d的反向引物如SEQ ID No.8所示,引物e的正向引物如SEQ ID No.9所示,引物e的反向引物如SEQ ID No.10所示,引物f的正向引物如SEQ ID No.11所示,引物f的反向引物如SEQ ID No.12所示,引物g的正向引物如SEQ ID No.13所示,引物g的反向引物如SEQ ID No.14所示,引物h的正向引物如SEQ ID No.15所示,引物h的反向引物如SEQ ID No.16所示,引物i的正向引物如SEQ ID No.17所示,引物i的反向引物如SEQ ID No.18所示。

2.一种权利要求1所述引物组检测神经母细胞瘤的PCR方法,其特征在于,包括如下步骤:

(1)将权利要求1所述的9对引物分别加入到单个PCR反应管中,并均加入核酸提取物、反转录酶、RNA酶抑制剂、DNA聚合酶、dNTP;其中,PCR反应的每个循环的条件为94摄氏度、30s;55摄氏度、30s;72摄氏度、10s;

(2)进行反转录和PCR反应,用琼脂糖凝胶电泳法进行检测。

3.一种权利要求1所述引物组检测神经母细胞瘤的荧光定量PCR方法,其特征在于,包括如下步骤:

(1)将权利要求1所述的9对引物分别加入到单个PCR反应管中,并均加入核酸提取物、反转录酶、RNA酶抑制剂、DNA聚合酶、dNTP;分别加入2×ChamQ SYBR qPCR Master Mix,其中,PCR反应的每个循环的条件为95摄氏度、10s和60摄氏度、30s;40个循环;每管设立三个复孔;

(2)进行反转录和PCR反应,并实时检测荧光;

(3)根据荧光检测结果计算出的Ct值,判断是否有标志物靶基因表达于样品中。

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