1.一种兼有igg结合活性及生物素结合活性的双功能蛋白g-sa,其特征在于所述双功能蛋白g-sa包括链球菌蛋白g(spg)片段和sa蛋白,所述链球菌蛋白g(spg)片段为含有spg的c3区段的序列。
2.如权利要求1所述的兼有igg结合活性及生物素结合活性的双功能蛋白g-sa;
其中,链球菌蛋白g(spg)片段和sa蛋白之间的连接序列为如seqidno.8所示;
所述链球菌蛋白g(spg)片段的核苷酸序列如seqidno.6所示;
sa蛋白的核苷酸序列如seqidno.7所示。
3.如权利要求1所述的兼有igg结合活性及生物素结合活性的双功能蛋白g-sa,所述双功能蛋白g-sa的核苷酸序列如seqidno.5所示。
4.一种兼有igg结合活性及生物素结合活性的双功能蛋白g-sa的表达方法,所述方法为:根据g蛋白的c3片段的基因序列,从含有c3片段的菌液中pcr扩增出c3序列;
通过pcr从含有sa序列的菌液中扩增出sa序列;
先将扩增出的sa序列双酶切后,连接到表达载体上,经鉴定后再将c3片段双酶切后连接上去,构建重组蛋白的原核表达质粒;
将所述表达载体转入表达宿主中培养,活化至对数生长期后加入诱导表白蛋白;
经破碎、纯化后制得融合蛋白g-sa;
将所述表达载体、共表达载体转入表达宿主中培养,活化至对数生长期后加入诱导表白蛋白。
5.如权利要求4所述的表达方法,其中,步骤(1)中使用的引物对如seqidno.1、2所示;
步骤(2)中使用的引物对如seqidno.3、4所示。
6.一种用于免疫分析的产品,所述产品包括权利要求1所述的一种兼有igg结合活性及生物素结合活性的双功能蛋白g-sa。
7.一种非诊断目的的免疫pcr方法,其中所述方法:
生物素标记dna报告分子的制备;
免疫pcr法检测;
结果判断;
其中,步骤1)具体为:利用生物素标记的上游引物ⅰ和无生物素标记的下游引物ⅱ,通过pcr扩增出生物素化dna作为免疫pcr的报告分子(本报告分子选用红色荧光蛋白rfp的一段基因序列,报告基因可以有很多选择,可以选用其它的各种碱基序列);
步骤2)具体为:
(1)包被:
(2)封闭;
(3)加一抗;
(4)加g-sa;
(5)加生物素标记的dna;
(6)预变性;
(7)pcr扩增;
(8)电泳。