基于MECP2基因的非治疗目的的将病毒注入动物特定脑区进行基因编辑的方法与流程

文档序号:21171806发布日期:2020-06-20 17:12阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种基于mecp2基因的非治疗目的的将病毒注入非人灵长类动物特定脑区进行基因编辑的方法,其特征在于用微量注射器将病毒直接注射入非人灵长类动物的特定脑区域中;注射量为每1m3注射病毒1ul,注射病毒的滴度为10*1013vg/ml。

2.根据权利要求1所述基于mecp2基因的非治疗目的的将病毒注入非人灵长类动物特定脑区进行基因编辑的方法,其特征在于,所述非人灵长类动物的特定脑区域为海马脑区。

3.根据权利要求2所述基于mecp2基因的非治疗目的的将病毒注入非人灵长类动物特定脑区进行基因编辑的方法,其特征在于,所述非人灵长类动物为猕猴或食蟹猴。

4.根据权利要求3所述基于mecp2基因的非治疗目的的将病毒注入非人灵长类动物特定脑区进行基因编辑的方法,其特征在于,所述可表达靶向猕猴mecp2基因的sgrna如序列表中所示。

5.根据权利要求1-3中任一权利要求所述基于mecp2基因的非治疗目的的将病毒注入非人灵长类动物特定脑区进行基因编辑的方法,其特征在于,所述病毒以600~800nl/min的速度进行注射,注射后留针10~15min。

6.根据权利要求5所述基于mecp2基因的非治疗目的的将病毒注入非人灵长类动物特定脑区进行基因编辑的方法,其特征在于,所述病毒为腺相关病毒(adeno-associatedvirus,aav)。

7.根据权利要求1所述基于mecp2基因的非治疗目的的将病毒注入非人灵长类动物特定脑区进行基因编辑的方法,其特征在于,所述微量注射器放置在立体定位仪的注射泵上,在mri的定位指导下利用多点阵列注射法进行注射。


技术总结
本发明公开了一种基于MECP2基因的非治疗目的的将病毒注入动物特定脑区进行基因编辑的方法,利用脑立体定位注射泵将病毒直接注射入非人灵长类动物的特定脑区域中;注射量为每1m3注射病毒1uL,注射病毒的滴度为10*1013vg/mL。该方法直接将病毒注入非人灵长类动物的特定脑区域进行基因编辑,可以短时间内获得具有该疾病表型的转基因猴模型,解决现阶段迫切的孤独症谱系障碍(ASD)疾病研究需求。

技术研发人员:吴诗昊;李霄;程田林;秦冬冬;吴晶;胡新天;仇子龙
受保护的技术使用者:中国科学院昆明动物研究所
技术研发日:2019.12.10
技术公布日:2020.06.19
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