一种与中枢神经衰老相关的乙酰化修饰CNP蛋白标记分子及其应用的制作方法

文档序号:23262652发布日期:2020-12-11 18:52阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种与中枢神经衰老相关的乙酰化修饰cnp蛋白标记分子,其特征在于:所述的与中枢神经衰老相关的乙酰化修饰cnp蛋白标记分子是第177位赖氨酸和第401位赖氨酸经乙酰化修饰的cnp蛋白。

2.根据权利要求1所述的与中枢神经衰老相关的乙酰化修饰cnp蛋白标记分子,其特征在于:所述的cnp蛋白的氨基酸序列如seqidno.1所示。

3.权利要求1或2所述的与中枢神经衰老相关的乙酰化修饰cnp蛋白标记分子在细胞、组织、器官或个体衰老程度检测中的应用。

4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于包括如下步骤:

(1)动物细胞或组织的蛋白提取和纯化;

(2)对纯化的蛋白进行酶解;

(3)特异性抗体对乙酰化修饰肽段富集;

(4)基于液相色谱质谱联用技术定量分析细胞或组织蛋白的乙酰化修饰;

(5)通过定量分析结果评估细胞、组织、器官或个体的衰老程度。

5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于:

步骤(1)中所述的动物包括鼠、人、猴和猩猩;

步骤(1)中所述的组织为脑组织;

步骤(2)中所述的酶解为采用fasp酶解方法实现;

步骤(3)中所述的富集通过免疫亲和沉淀实现。

6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于:

所述的鼠包括小鼠和大鼠;

所述的猴为食蟹猴;

所述的猩猩为苏门答腊猩猩。

7.根据权利要求4所述的应用,其特征在于:

步骤(4)中所述的定量分析过程的具体操作为:

1)将富集的乙酰化修饰肽段重悬,进行分离;

2)接着进行质谱鉴定,得到质谱原始数据;

3)质谱原始数据通过maxquant软件进行搜库,从而获得肽段信息列表;

步骤(5)中所述的评估的标准如下:cnp蛋白的第177位赖氨酸和第401位赖氨酸乙酰化修饰上调程度和衰老程度正相关。

8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于:

步骤1)中所述的分离通过easynanolc1000系统进行;

步骤2)中所述的质谱鉴定使用orbitrapfusionlumos质谱仪;

步骤3)中所述的搜库的参数如下:样本类型为standard,multiplicity为1;蛋白质消化酶为:trypsin;固定修饰:carbamidomethylc;可变修饰为acetylk,deamidationn,deamidationnq;最小肽段长度为6;肽段和蛋白的错配率阈值都小于0.01;用于蛋白质定量的肽段可变修饰为oxidationm,acetylproteinn-term,肽段为unique。

9.权利要求1或2所述的所述的与中枢神经衰老相关的乙酰化修饰cnp蛋白标记分子在制备预测衰老相关的退行性疾病的试剂盒中的应用。

10.权利要求1或2所述的与中枢神经衰老相关的乙酰化修饰cnp蛋白标记分子在制备预防和/或治疗衰老相关的退行性疾病中作为药物靶点的药物中的应用。


技术总结
本发明公开了一种与中枢神经衰老相关的乙酰化修饰CNP蛋白标记分子及其应用。该蛋白标记分子为第177和401位赖氨酸乙酰化修饰的CNP蛋白。以CNP蛋白上177和401位赖氨酸乙酰化修饰的上调作为细胞或者个体衰老检测的标志物。本发明为今后探索衰老的过程、衰老相关疾病的发生及抗衰老的研究提供了一个有效的研究方法以及研究方向。

技术研发人员:季煜华;陈子鑫;季秋虹
受保护的技术使用者:暨南大学
技术研发日:2020.06.01
技术公布日:2020.12.11
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