技术特征：
1.一种富集和无分化扩增悬浮肿瘤干细胞的方法，其特征在于，其方法步骤如下：(1)在血液肿瘤细胞的胚胎干细胞培养基中加入delta-like4、jagged1和fgf2成分因子作为培养基主要组分；(2)向所述胚胎干细胞培养基中加入抑制gsk信号通路抑制剂和酪氨酸激酶抑制剂，进行半固体培养，血液肿瘤干细胞形成集落；(3)所述胚胎干细胞培养基的组成原料按体积比包括30-100％的dmem基础培养基、0-70％的胚胎干细胞培养基hescgro、0-2μg/ml的dii4、0-1μg/ml的fgf2、0-2μg/ml的jag1、0-1μg/ml的scf、0-1μg/ml的lif、0-1μg/ml的tgf-β、0-1μg/ml的tpo、0-300nm的chir99021、0-1μm的pd173074、0-1μm的pd184352和0-1μm的pd0325901。2.根据权利要求1所述的富集和无分化扩增悬浮肿瘤干细胞的方法，其特征在于，所述抑制gsk信号通路抑制剂和酪氨酸激酶抑制剂为chir99021、pd173074、pd184352或pd0325901。
技术总结
本发明提出了一种富集和无分化扩增悬浮肿瘤干细胞的方法，其步骤如下：在血液肿瘤细胞的胚胎干细胞培养基中加入Delta-like4、Jagged1和FGF2成分因子作为培养基主要组分；向胚胎干细胞培养基中加入抑制GSK信号通路抑制剂和酪氨酸激酶抑制剂，进行半固体培养，血液肿瘤干细胞形成集落；胚胎干细胞培养基的组成原料按体积比包括30-100％的DMEM基础培养基、0-70％的胚胎干细胞培养基HEScGRO、0-2μg/ml的DII4、0-1μg/ml的FGF2、0-2μg/ml的Jag1、0-1μg/ml的SCF、0-1μg/ml的LIF、0-1μg/ml的TGF-β、0-1μg/ml的TPO、0-300nM的CHIR99021、0-1μM的PD173074、0-1μM的PD184352和0-1μM的PD0325901。本发明的有益效果如下：解决了现有技术中肿瘤干细胞无法高效低毒的实现富集和无分化扩增的问题。效低毒的实现富集和无分化扩增的问题。效低毒的实现富集和无分化扩增的问题。
技术研发人员：黄兵 殷勤伟
受保护的技术使用者：北京智能宝生物科技有限公司
技术研发日：2022.03.17
技术公布日：2022/4/26