技术特征：
1.一种酸性莼菜多糖，其特征在于，所述酸性莼菜多糖为性质均一的α构型吡喃糖，由摩尔比为0.08:1.39:1:0.23的d-甘露糖、d-半乳糖、d-木糖和l-岩藻糖组成，平均分子量为119.5kd。2.根据权利要求1所述的酸性莼菜多糖的分离纯化方法，其特征在于，所述方法步骤如下：(1)、制备莼菜粗多糖
①
将新鲜莼菜嫩叶用自来水洗净，沥干水分，无水乙醇回流脱脂，烘干，粉碎机粉碎，过100目筛，即得莼菜干粉；
②
向莼菜干粉中加入蒸馏水，加入果胶酶，调节溶液ph值，控制提取温度进行提取，90℃灭活10min，过滤去除莼菜干粉，滤液减压浓缩至原体积1/5；
③
向浓缩液中边搅拌边加入三倍体积的无水乙醇，4℃静置过夜，离心，得褐色沉淀物；
④
沉淀物以蒸馏水充分溶解，冷冻干燥，即得莼菜粗多糖；(2)、将莼菜粗多糖以20～30倍蒸馏水复溶，然后向溶液中加入savage试剂，充分搅拌1h，离心，取上清液，冷冻干燥，即得脱蛋白后的莼菜粗多糖；(3)、将步骤(2)获得的莼菜粗多糖通过deae-52纤维素柱进行分离纯化，得酸性莼菜多糖。3.根据权利要求2所述的酸性莼菜多糖的分离纯化方法，其特征在于，步骤(1)中莼菜干粉与蒸馏水的质量体积比为1:50，果胶酶的加入量为莼菜干粉质量的1～3％，溶液ph值调节为3.5～5.5，提取温度45～65℃，提取时间1～3h。4.根据权利要求2所述的酸性莼菜多糖的分离纯化方法，其特征在于，步骤(2)中莼菜粗多糖溶液与savage试剂的体积比为5：1，savage试剂中氯仿与正丁醇体积比为5:1。5.根据权利要求2所述的酸性莼菜多糖的分离纯化方法，其特征在于，将步骤(2)的操作重复5～10次，直至离心后液面中间无白色固体。6.根据权利要求2所述的酸性莼菜多糖的分离纯化方法，其特征在于，步骤(3)采用deae-52纤维素柱将脱蛋白后的莼菜粗多糖进行分离纯化，具体操作为：将莼菜粗多糖以蒸馏水完全溶解，离心后将上清液一次性上样于deae-52纤维柱中，控制流速为1ml/min，使用蒸馏水及浓度为0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mol/l的nacl溶液梯度洗脱，每10min收集一管，采用苯酚-硫酸法隔管检测洗脱液中多糖含量，收集主要吸收峰的洗脱液，蒸馏水透析72h，冷冻干燥，获得目标产物bsp-5。7.根据权利要求1所述的酸性莼菜多糖的应用，其特征在于，所述酸性莼菜多糖作为天然抗氧化剂。8.根据权利要求7所述的酸性莼菜多糖的应用，其特征在于，所述酸性莼菜多糖用于抑制肿瘤细胞增殖。
技术总结
本发明涉及多糖分离纯化方法及应用领域，具体涉及一种酸性莼菜多糖及其分离纯化方法和应用。首先制备粗多糖，然后脱蛋白，采用DEAE-52纤维素柱进行分离，得到了高纯度的酸性莼菜多糖BSP-5，通过红外光谱分析、紫外全波长扫描、高效液相色谱单糖组成分析、凝胶渗透色谱分子量测定等方法对该多糖进行了结构鉴定，结果显示该多糖为性质均一的α构型吡喃糖，由摩尔比为0.08:1.39:1:0.23的D-甘露糖、D-半乳糖、D-木糖和L-岩藻糖组成，是一种酸性杂多糖，平均分子量为119.5KD。体外抗氧化和抗肿瘤实验结果显示本发明分离提纯的酸性莼菜多糖具有较强的抗氧化作用和抗肿瘤生物活性。多糖具有较强的抗氧化作用和抗肿瘤生物活性。
技术研发人员：徐德锋 祁久乐 胡航
受保护的技术使用者：常州大学
技术研发日：2021.11.30
技术公布日：2022/3/29