CasF2蛋白、CRISPR/Cas基因编辑系统及其在植物基因编辑中的应用

文档序号:29934523发布日期:2022-05-07 13:22阅读:来源:国知局

技术特征:
1.casf2蛋白,其特征在于,所述casf2蛋白的氨基酸序列如seq id no.2所示;或与seq id no.2所示的序列相比具有一个或多个氨基酸的置换、缺失或添加,且具有相同或相似生物学功能。2.根据权利要求1所述的casf2蛋白的编码基因,其特征在于,所述编码基因的核苷酸序列如seq id no.1所示。3.一种表达载体,其特征在于,所述表达载体包含权利要求2所述的核苷酸序列。4.权利要求1所述casf2蛋白、权利要求2所述的casf2蛋白的编码基因或权利要求3所述的表达载体在基因编辑中的应用。5.一种crispr/cas基因编辑系统,其特征在于,所述基因编辑系统包含权利要求1所述的casf2蛋白或表达所述casf2蛋白的质粒。6.根据权利要求5所述的crispr/cas基因编辑系统,其特征在于,所述基因编辑系统还包含sgrna或表达所述sgrna的质粒。7.根据权利要求5或权利要求6所述的crispr/cas基因编辑系统在植物基因编辑中的应用;优选地,所述植物为单子叶植物或双子叶植物;更优选地,所述植物选自拟南芥、烟草、大豆和玉米中的任一种。8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述应用包括以下步骤:(a)根据所述casf2蛋白的pam识别位点确定待编辑基因的sgrna;(b)将所述casf2蛋白的基因序列和相应的sgrna克隆到表达载体中;(c)将所述表达载体转化到农杆菌中,通过农杆菌介导的遗传转化方法,将所述表达载体导入目标植物,获得定向基因编辑植株;优选地,在所述遗传转化中,使用mgcl2激活基因编辑活性。9.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述植物为拟南芥,所述sgrna对应的核苷酸序列如seq id no.3所示。10.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述植物为烟草,所述sgrna对应的核苷酸序列如seq id no.4所示。

技术总结
本发明公开了一种CasF2蛋白、CRISPR/Cas基因编辑系统及其在植物基因编辑中的应用,涉及基因编辑技术领域。本发明CasF2蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示;或与SEQ ID No.2所示的序列相比具有一个或多个氨基酸的置换、缺失或添加,且具有相同或相似生物学功能。所述CRISPR/Cas基因编辑系统包含CasF2蛋白或表达所述CasF2蛋白的质粒。本发明提供了一种新的高效、稳定的基因编辑系统,可使用更短的sgRNA引导CasF2进行靶点序列的编辑,产生DNA序列的插入或缺失。插入或缺失。插入或缺失。


技术研发人员:刘文平 蔡勤安 马瑞 郭东全 郭东梅 鲁昕 于志晶 李源 魏嘉
受保护的技术使用者:吉林省农业科学院
技术研发日:2022.03.03
技术公布日:2022/5/6
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