由此允许较不频繁的给药和更大的患者依从性。 在诸如干眼综合征和改变的角膜敏感性的情形中，由于它们通常是慢性病症，这是特别重 要的。
[0047] 记住制备所述药物，可以配制本发明各个方面的siRNA。优选地，所述siRNAs的 组合物和制剂可以局部施用至目的器官。在甚至更优选的实施方案中，它们可以配制用于 局部施用至眼睛，优选地施用至眼睛的角膜表面。例如，应用至角膜表面可以以眼用滴液、 凝胶剂、洗液、乳膏或眼部插入物的形式进行。对眼睛的其他施用形式可以包括注射到眼睛 中。
[0048] 本发明各个方面的更优选的实施方案涉及前述段落中所述的特异性靶向SEQ ID NO :1的siRNA，其用作用于治疗以增加的TRPV1的表达和/或活性为特征的眼部病症的药 物，其中所述siRNA按照本文公开的给药方案施用。如前文所述，其可以是包含或由靶向 SEQ ID NO :1的19个核苷酸双链结构组成的siRNA。该siRNA可以是平端的。优选地，所 述siRNA是SEQ ID N0:2。本发明本发明使用的其他siRNA可以选自SEQ ID.N0. 3,4,5,6， 8,9,10,11，12,13,14,15 或 16。
[0049] 在本发明的上下文中，为了"特异性靶向"某种序列，本发明的siRNA优选地包含 至少相同的种子序列。因此，本发明所述的特异性靶向SEQ ID No. 1的任意序列优选地在 反义链的位置2-8是相同的。
[0050] 尽管如上文所述，本发明各个方面的siRNAs可以用于沉默眼部之外的组织中的 TRPV1表达。由此，所述siRNAs应该被相应地配制。
[0051] 例如，siRNA分子可以包含递送赋形剂（delivery vehicle)，包括脂质体，用于施 用给受试者。载体和稀释剂及其盐可以存在于药用制剂中。核酸分子可以通过本领域技 术人员已知的多种方法施用至细胞中，所述方法包括，但不限于，包封在脂质体中，通过离 子电渗疗法，或通过结合在其他赋形剂中，如生物可降解的聚合物、水凝胶、环糊精聚（乳 酸-共-乙醇酸）（PLGA)和PLCA微球体、可生物降解的纳米胶囊以及生物粘附性微球体，或 通过蛋白质样载体进行。在另一个实施方案中，本发明的核酸分子还可以与聚乙烯亚胺及 其衍生物一起配制或与聚乙烯亚胺及其衍生物复合，如聚乙烯亚胺-聚乙二醇-N-乙酰半 乳糖胺（PEI-PEG-GAL)或聚乙烯亚胺-聚乙二醇-三-N-乙酰半乳糖胺（PEI-PEG-triGAL) 衍生物。本发明的优选的组合物是水溶液，特别是盐水溶液，如pH范围在约7. 0-约74、优 选pH为7. 2 ±0. 5的磷酸缓冲的盐水（PBS)。
[0052] 本发明的siRNA分子可以与膜分解剂和/或阳离子脂质或辅助脂质分子复合。
[0053] 可以用于本发明的递送系统包括，例如，水性和非水性凝胶、乳膏、复合型乳剂、微 乳剂、脂质体、油膏、水溶液和非水性溶液、洗液、气溶胶、烃类基质和粉剂，并且可以包含赋 形剂（excipients)，如增溶剂、渗透促进剂（例如，脂肪酸、脂肪酸醋、脂肪醇和氨基酸）、亲 水聚合物（例如，聚卡波非和聚乙烯吡咯烷酮）。在一个实施方案中，药用载体是脂质体或 经皮增强剂。
[0054] 本发明的药物制剂以适于施用（例如，系统或局部施用）至细胞或受试者中的形 式存在，所述受试者包括，例如，人。适当的形式部分取决于应用或进入途径，例如，口服、经 皮或通过注射的途径。其他因素在本领域中是已知的，并且包括这样的考虑，如毒性和防止 所述组合物或制剂发挥其效果的形式。
[0055] 本发明还包括制备的用于存储或施用的组合物，其包含在药用载体或稀释剂中的 药物有效量的需要的化合物。用于治疗用途的可接受的载体或稀释剂在制药领域中是公知 的。例如，可以提供防腐剂、稳定剂、染料和调味剂。这些包括苯甲酸钠、山梨酸和对-羟基 苯甲酸的酯。另外，还可以使用抗氧化剂和混悬剂。
[0056] 药物有效剂量是预防、抑制发生或治疗（在某种程度上减轻症状，优选地减轻所 有的症状）疾病状态所需要的剂量。药物有效剂量通常取决于疾病的类型、所用的组合物、 施用的途径、治疗的哺乳动物的类型、所考虑的具体的哺乳动物的体格特征、同时使用的药 物和医学领域技术人员所认识到的其他因素。
[0057] 特别地，已知除了剂量之外，施用时间表是通过siRNA分子有效下调的重要决定 因素。
[0058] 本发明人已经研发了用于施用siRNA的有效的剂量时间表，用于治疗以增加的 TRPV1表达和/或活性为特征的眼部病症，特别是干眼症和/或眼部疼痛，其避免副作用并 且可以安全施用。因此，按照本文所述的给药方案施用siRNA分子引起临床改进，其中所述 分子特异性靶向SEQ ID NO :1，并且当引入到细胞中时减少TRPV1基因的表达。
[0059] 当用在本文中时，"有效的剂量时间表"是指足以治疗或管理与TRPV1的过表达相 关的眼部病症的本发明的siRNA的量。为了治疗人的干眼症和/或眼部疼痛，优选地减轻 眼部疾病的水平，如由本领域技术人员已知的不同的参数所测量的，例如，使用0SDI(眼睛 表面指数）调查表（用于干眼症）和/或用于眼部疼痛的VAS (视觉模拟等级）。与治疗前 的水平相比，这些水平中的任何减少都是有利的，而不管本发明的化合物是单独递送的，还 是与另一种适当的治疗剂组合递送的。（例如，本发明考虑大于约5%，约10%，约25%，约 30 %，约35 %，约40 %，约50 %或约60 %的治疗前I0P的0SDI和/或VAS的减少）。
[0060] 治疗有效量还可以指足以延缓或最小化与干眼症和/或眼部疼痛相关的眼部病 症的发作的siNA的量。治疗有效量还可以指在与干眼症和/或眼部疼痛相关的眼部病症 的治疗或管理中提供治疗益处的治疗剂的量。此外，关于本发明的siNA的治疗有效量意指 单独的治疗剂的量，或与其他治疗剂组合的量，所述量在与干眼症和/或眼部疼痛相关的 眼部病症的治疗或管理中提供治疗益处。与本发明的siNA的量联系使用，该术语可以包括 改善整体治疗、减少或避免不需要的作用或增强另一种治疗剂的功效或与另一种治疗剂协 同作用的量。
[0061] 在诸如干眼症和/或眼部疼痛的眼部病症的治疗或管理中的治疗益处是疼痛和/ 或不需要的感觉的持续减少。鉴于siRNA将减少TRPV1受体在细胞内的水平，当治疗终止 时，在感觉到疼痛感觉之前，细胞必须重新合成新的受体。由此，基于siRNA治疗的疗法将 具有更持久的效果。这被认为是治疗功效的显著提高。
[0062] 使用siRNA的另外的益处是由其在系统循环中的存在所导致的副作用或急性毒 性稳定的最小的可能性，而这些通常与不同的基于滴眼液的治疗相关。这是由于这样的事 实：当所述化合物进入血流中时，其将迅速地被存在于血液中RNA酶降解。
[0063] 另一方面，本文所述的制剂可以提供在单剂量的小瓶中的事实意指结合抗微生物 防腐剂，其存在于现在的市场上的大部分制剂中，并且其在一些患者中产生某种不耐受性， 使得其需要停止治疗。当考虑到如同干眼症和/或眼部疼痛的病症通常是慢性的，并且因 此这样进行治疗时，这两个问题是特别重要的。
[0064] 一种优选的施用途径是局部施用，直接滴到眼睛中，优选地使用滴眼液进行。如上 文所述，预计使用针对TRPVlmRNA的siRNAs的治疗性治疗比小分子局部眼用滴剂有益，其 增加所观察到的效果的时间持久性，由此允许较不频繁的给药和更大的患者依从性。当将 siRNA直接施用至眼睛时，通常每天每只眼睛可以施用约0.0 lmg至约100mg的量。在一个 实施方案中，每天每只眼睛施用的量是约0. lmg至约10mg。在另一个实施方案中，每天每 只眼睛施用约〇? 04mg至80mg，约0? 04mg至约20mg，约0? 08mg至约10mg，约0? 08mg至约 1. 2mg，约 0? 3 至约 0? 9mg，或约 0? 08mg 至约 0? 9mg 的 siNA。
[0065] 在一个实施方案中，所述剂量是约0. 5mg至约1. 5mg。在一个实施方案中，所述剂 量是约0. 3至0. 9mg，优选地约0. 6mg至约0. 9mg。备选地，优选的剂量是每只眼睛每天约 0? 6mg 或约 0? 9mg。
[0066] 上文提及的优选的施用途径中的一种是通过使用滴眼剂进行。在一个实施方案 中，这些滴眼剂具有25-50微升的体积，含有给定剂量的化合物，优选为26-40微升。优选 地，商业点眼药器可以用于药物的最终呈递，并且产生的体积将是每滴约30-约33微升。在 另外优选的实施方案中，滴眼剂以约40 yl的体积递送。在另外的实施方案中，本发明的组 合物在可接受的溶液（如磷酸缓冲的盐水）中以约7. 5至约22. 5mg/ml的浓度、或备选地 约15mg/ml至约22. 5mg/ml的浓度包含siRNA，如SEQ ID NO :2的siRNA。本发明的组合物 可以包含在PBS和任选地药用赋形剂（诸如例如苯扎氯按（benzalkonium chloride))中 的上述浓度的siRNA。
[0067] 以上述剂量的治疗可以给药 1，2, 3,4, 5,6, 7,8,9,10,11，12,13,14,15,16,17,18， 19, 20或更多天。优选地，给药10-15天，最优选地10天。给药可以伴有休息期，例如，在继 续治疗前7天的休息期。备选地，鉴于干眼症和/或眼部疼痛通常是慢性病症，剂量可能在 长期的时间期内以每天为基础给药，导致长期的给药。因此，给药可以以每天为基础持续多 于4周，或者备选地，给药可以不以每天为基础持续多于4周。精确的时间表可以依据所述 慢性病症的严重性来确定。
[0068] 然而，如前文所解释的，还可以使用除了直接给药到眼睛之外的给药途径。用于所 述制剂的精确的剂量和给药时间表也将取决于给药途径，但是可以使用上述剂量，并且通 常每天每只眼睛可以给药约O.Olmg至约100mg的量。技术人员应该理解，要用的精确的 剂量和给药时间表也取决于病症的严重性，并且应该按照执业者的判断和每名患者的情形 来决定。还理解用于任意具体的受试者的特定的剂量水平取决于多种因素，包括所用的具 体的化合物的活性、年龄、体重、一般健康状况、性别、日常饮食、给药时间、给药途径和排泄 率、药物组合和治疗中的特定疾病的严重性。
[0069] 本发明的和所述的制剂或siRNA可以以单位剂量制剂进行给药，所述单位剂量制 剂包含常规无毒药用载体、辅药和/或赋形剂。制剂可以以适于口