)，3. 19 (m，2H)，I. 25 (m，1H)，0? 60 (m，2H)，0? 32 (m，2H)。
[0399]步骤5:(23,31?，41?，53,61?)-2-(7-(4-(环丙基甲氧基）苄基）-2,3-二氢苯并呋 喃-5-基）-6-(羟基甲基）四氢-2H-吡喃-3,4, 5-三醇的制备
[0400] 通过与实施例1的步骤5相同的方法来获得了标题化合物（140mg)。
[0401]1H 谱（300MHz，MeOD) : S 7. 21 (dd，1H)，7. 09(d，2H)，7. 06(s，1H)，6. 92(s， 1H)，6. 88(d，2H)，4. 52(t，2H)，4. 01 (d，1H)，3. 86-3. 70(m，6H)，3. 61 (m，2H)，3. 46(m，2H)， 3. 14 (t，2H) I. 23 (m，1H)，0? 59 (m，2H)，0? 31 (m，2H) 〇
[0402] MS (ESI+，m/z) :[M+NH4]+m/z 460. 2334, [M+K]+m/z 481. 1623
[0403]实施例 37 :(2S，3R，4R，5S，6R)-2-(7-(4-乙氧基-3-氟苄基）-2,3-二氢苯并呋 喃-5-基）-6-(羟基甲基）四氢-2H-吡喃-3,4, 5-三醇的制备
[0404]
[0405] 步骤I : (5-溴-2, 3-二氢苯并呋喃-7-基）（4-乙氧基-3-氟苯基）甲醇的制备
[0406] 除了在实施例1的步骤1中使用4-溴-1-乙氧基-2-氟苯来代替1-溴-4-乙氧 基苯以外，通过与实施例1的步骤1相同的方法来获得了标题化合物（684mg)。
[0407] 1H 匪R 谱（300MHz，CDCl3) : S 7. 22(dd，2H)，7. 15-7. 06(m，2H)，6. 91 (t，1H)， 5. 81 (d，1H)，4. 60 (t，2H)，4. 09 (q，2H)，3. 19 (t，2H)，2. 73 (d，1H)，L 44 (t，3H)。
[0408] 步骤2 :5_溴-7-(4-乙氧基-3-氣苄基）-2, 3_二氢苯并咲喃的制备
[0409] 通过与实施例1的步骤2相同的方法来获得了标题化合物（619mg)。
[0410] 1H NMR 谱（300MHz，CDCl3) : S 7. 16(s，1H)，6. 97-6. 86(m，4H)，4. 57(t，2H)， 4. 07 (q，2H)，3. 77 (s，2H)，3. 20 (t，2H)，L 43 (t，3H)。
[0411] 步骤3:(31?，43,51?，61?)-3,4,5-三（苄氧基）-6-(苄氧基甲基）-2-(7-(4-乙氧 基-3-氟苄基）_2, 3-二氢苯并呋喃-5-基）四氢-2H-吡喃-2-醇的制备
[0412] 通过与实施例1的步骤3相同的方法来获得了标题化合物（918mg)。
[0413] 1H NMR 谱（300MHz，CDCl3) : S 7. 33-7. 16 (m，20H)，6. 96-6. 75 (m，5H)， 4. 89-4. 85 (m，2H)，4. 66-4. 55 (m，5H)，4. 41 (d，1H)，4. 09-4. 06 (m，1H)，4. 04-3. 69 (m，10H)， 3. 50 (dd，1H)，3. 18 (t，2H)，2. 89 (d，1H)，I. 39 (t，3H)。
[0414] 步骤 4 :7-(4-乙氧基-3-氟苄基）-5-(2S，3S，4R，5R，6R)-3,4,5-三（苄氧 基）-6-(苄氧基甲基）四氢-2H-吡喃-2-基）-2, 3-二氢苯并呋喃的制备
[0415] 通过与实施例1的步骤4相同的方法来获得了标题化合物（752mg)。
[0416] 1H NMR 谱（300MHz，CDCl3) : S 7. 39-7. 27 (m，13H)，7. 20-7. 15 (m，7H)， 6. 95-6. 87 (m，5H)，6. 73 (t，1H)，4. 90-4. 84 (m，3H)，4. 64-4. 51 (m，5H)，4. 36 (d，1H)，4. 02 (d， 1H)，4. 02 (q，2H)，3. 85-3. 75 (m，7H)，3. 55-3. 47 (m，2H)，3. 20 (t，2H)，I. 40 (t，3H)。
[0417] 步骤 5 : (2S，3R，4R，5S，6R) -2- (7- (4-乙氧基-3-氟苄基）-2, 3-二氢苯并呋 喃-5-基）-6-(羟基甲基）四氢-2H-吡喃-3,4, 5-三醇的制备
[0418] 通过与实施例1的步骤5相同的方法来获得了标题化合物（130mg)。
[0419] 1H NMR 谱（300MHz，CDCl3) : S 7. 08 (s，1H)，6. 95-6. 86 (m，3H)，6. 80 (t， 1H)，4. 52 (t，2H)，4. 14 (br，1H)，4. 05-3. 98 (m，3H)，3. 94 (br，1H)，3. 84-3. 58 (m，6H)， 3. 51-3. 48 (m，1H)，3. 38-3. 35 (m，1H)，2. 85 (br，1H)，2. 57 (br，1H)，I. 39 (t，3H)。
[0420] MS(ESI+, m/z) ： [M+NHj"45202075, [M+K]m/z 473.1371
[0421] 实施例 38 :(2S，3R，4R，5S，6R)-2-(7-(4-乙氧基-2-氟苄基）-2,3-二氢苯并呋 喃-5-基）-6-(羟基甲基）四氢-2H-吡喃-3,4, 5-三醇的制备
[0422]
[0423] 步骤I : (5-溴-2, 3-二氢苯并呋喃-7-基）（4-乙氧基-2-氟苯基）甲醇的制备
[0424] 除了在实施例1的步骤1中使用1-溴-4-乙氧基-2-氟苯来代替1-溴-4-乙氧 基苯以外，通过与实施例1的步骤1相同的方法来获得了标题化合物（624mg)。
[0425] 1H 匪R 谱（300MHz，CDCl3) : S 7. 33-7. 22 (m，2H)，7. 15(s，1H)，6. 68(dd，1H)， 6. 59 (dd，1H)，6. 11 (d，1H)，4. 61 (t，2H)，4. 00 (q，2H)，3. 19 (t，2H)，2. 86 (d，1H)，1. 41 (t， 3H) 〇
[0426] 步骤2 :5_溴-7-(4-乙氧基-2-氣苄基）-2, 3_二氢苯并咲喃的制备
[0427] 通过与实施例1的步骤2相同的方法来获得了标题化合物（494mg)。
[0428] 1H NMR 谱（300MHz，CDCl3) : S 7. 14 (s，1H)，7. 05 (t，1H)，6. 96 (s，1H)， 6. 62-6. 57 (m，2H)，4. 58 (t，2H)，3. 99 (q，2H)，3. 80 (s，2H)，3. 20 (t，2H)，L 40 (t，3H)。
[0429] 步骤3:(31?，43,51?，61?)-3,4,5-三（苄氧基）-6-(苄氧基甲基）-2-(7-(4-乙氧 基-2-氟苄基）-2, 3-二氢苯并呋喃-5-基）四氢-2H-吡喃-2-醇的制备
[0430] 通过与实施例1的步骤3相同的方法来获得了标题化合物（343mg)。
[0431] 1H NMR 谱（300MHz，CDCl3) : S 7. 33-7. 16 (m，20H)，7. 00-6. 95 (m，3H)， 6. 53-6. 50 (m，2H)，4. 89-4. 85 (m，3H)，4. 67-4. 54 (m，4H)，4. 38 (d，1H)，4. 12-3. 71 (m，11H)， 3. 53 (d，1H)，3. 17 (t，2H)，2. 87 (d，1H)，I. 34 (t，3H) 〇
[0432] 步骤4:7-(4-乙氧基-2-氟苄基）-5-((23,33,41?，51?，61?)-3,4,5-三（苄氧 基）-6-(苄氧基甲基）四氢-2H-吡喃-2-基）-2, 3-二氢苯并呋喃的制备
[0433] 通过与实施例1的步骤4相同的方法来获得了标题化合物（268mg)。
[0434] 1H NMR 谱（300MHz，CDC13) : S 7.33-7.27(m，13H)，7.20-7. 16(m，6H)，7.01(t，lH)， 6. 96 (s，1H)，6. 91-6. 88 (m，2H)，6. 56-6. 50 (m，2H)，4. 94-4. 84 (m，3H)，4. 65-4. 50 (m，5H)， 4. 34 (d，1H)，4. 11 (d，1H)，3. 96-3. 74 (m，9H)，3. 55-3. 47 (m，2H)，3. 19 (t，2H)，I. 37 (t，3H)。
[0435] 步骤 5 : (2S，3R，4R，5S，6R) -2- (7- (4-乙氧基-2-氟苄基）-2, 3-二氢苯并呋 喃-5-基）-6-(羟基甲基）四氢-2H-吡喃-3,4, 5-三醇的制备
[0436] 通过与实施例1的步骤5相同的方法来获得了标题化合物（109mg)。
[0437] 1H NMR 谱（300MHz，CDCl3) : S 7. 08-7. 02 (m，2H)，6. 89 (s，1H)，6. 58-6. 53 (m，2H)， 4. 53 (t，2H)，4. 03 (d，1H)，3. 97-3. 90 (m，3H)，3. 82-3. 59 (m，7H)，3. 47 (t，1H)，3. 39-3. 36 (m， 1H)，3. 14 (t，1H)，2. 64 (br，1H)，2. 42 (br，1H)，I. 36 (t，3H)。
[0438] MS(ESI+，m/z) :[M+NH4]+m/z 452. 2075, [M+K]+m/z 473. 1371
[0439] 实施例 39 :(2S，3R，4R，5S，6R)-2-(7-(4-羟基苄基）-2,3-二氢苯并呋 喃-5-基）-6-(羟基甲基）四氢-2H-吡喃-3,4, 5-三醇的制备
[0440]
[0441] 步骤I :(5-溴-2, 3-二氢苯并呋喃-7-基）（4-((叔丁基）二甲基硅氧基）苯基） 甲醇的制备
[0442] 除了在实施例1的步骤1中使用（4-溴苯氧基）（叔丁基）二甲基硅烷来代 替1-溴-4-乙氧基苯以外，通过与实施例1的步骤1相同的方法来获得了标题化合物 (290mg)。
[0443] 1H 匪R 谱（300MHz，CDCl3) : S 7. 07-6. 99(m，3H)，6. 62(d，2H)，6. 50(s，1H)， 5. 63 (d，1H)，4. 40 (t，2H)，2. 99 (t，2H)，0? 78 (s，9H)，0? 01 (s，6H)。
[0444] 步骤2 : (4-((5-溴-2, 3-二氢苯并呋喃-7-基）甲基）苯氧基）（叔丁基）二甲 基硅烷的制备
[0445] 通过与实施例1的步骤2相同的方法来获得了标题化合物（242mg)。
[0446] 1H NMR 谱（300MHz，CDC13) : S 7. 08(s，1H)，6. 85(d，2H)，6. 55(d，2H)，6. 52(s，1H)， 4. 38 (t，2H)，3. 60 (s，2H)，2. 98 (t，2H)，0? 79 (s，9H)，0? 01 (s，6H)。
[0447] 步骤3:(31?，43,51?，61?)-3,4,5-三（苄氧基）-6-(苄氧基甲基）-2-(7-(4-((叔丁 基）二甲基硅氧基）苄基）-2, 3-二氢苯并呋喃-5-基）四氢-2H-吡喃-2-醇的制备
[0448] 通过与实施例1的步骤3相同的方法来获得了标题化合物（0. 390mg)。
[0449] 1H NMR 谱（300MHz，CDCl3) : S 7. 22-6. 80 (m，26H)，4. 86-4. 74 (m，2H)， 4. 60-4. 30 (m，9H)，3. 98 (d，1H)，3. 81-3. 28 (m，6H)，3. 00 (t，2H)，0? 80 (s，9H)，0? 02 (s，6H)。
[0450] 步骤4:4-((5-((23,33,41?，51?，61?)-3,4,5-三（苄氧基）-6-((苄氧基）甲基）四 氢-2H-吡喃-2-基）-2, 3-二氢苯并呋喃-7-基）甲基）苯酚的制备
[0451] 通过与实施例1的步骤4相同的方法来获得了标题化合物（70mg)。
[0452] 1H NMR 谱（300MHz，CDCl3) : S 7. 10-6. 41 (m，26H)，4. 64-4. 56 (m，3H)， 4. 37-4. 31 (m，8H)，4. 27 (d，1H)，3. 85 (d，1H)，3. 58-3. 08 (m，6H)，2. 93 (t，2H)。
[0453] 步骤5 :(2S，3R，4R，5S，6R)-2-(7-(4-羟基苄基）-2,3-二氢苯并呋 喃-5-基）-6-(羟基甲基）四氢-2H-吡喃-3,4, 5-三醇的制备
[0454] 通过与实施例1的步骤5相同的方法来获得了标题化合物（6mg)。
[0455] 1H NMR 谱（300MHz，MeOD) : S 7.01 (s，lH)，6.94 (d，2H)，6.84 (s，lH)，6.55 (d，2H)， 4. 40 (t，2H)，3. 67 (d，2H)，3. 48-3. 20 (m，7H)，3. 01 (t，2H)。
[0456]MS(ESI+，m/z) :[M+NH4]+m/z406. 1858, [M+K]+m/z427. 1156
[0457] 实施例40:(23,33,41?，51?，63)-2-(羟基甲基）-6-(7-(4-(3-(甲基磺酰基）丙氧 基）苄基）-2, 3-二氢呋喃-5-基）四氢-2H-吡喃-3,4, 5-三醇的制备
[0458]
[0459] 将实施例11的步骤4中获得的化合物（70mg，0. 09mmol)溶解于二甲基甲酰胺2ml 之后，对其加入卜溴-3-(甲基磺酰基）丙烷（35. 5mg，0. 12mmol)以及碳酸钾（17. 4mg， 0. 13mmol)，在100°C下搅拌48小时。在上述反应液中加入水之后，用乙酸乙酯进行提取 并用无水硫酸镁干燥有机层之后，浓缩溶剂而获得了 7-(4-(3-(甲基磺酰基）丙氧基） 苄基）-5-((23,33,41?，51?，61?)-3,4,5-三（苄氧基）-6-((苄氧基）甲基）四氢-211-吡 喃-2-基）-2, 3-二氢苯并呋喃。对其无需实施提纯过程，并通过与实施例1的步骤5相同 的方法来获得了标题化合物（7mg)。
[0460] 1H NMR 谱（300MHz，Me0D) : S7.04-7.01(m，3H)，6.84(s，lH)，6.69(d，2H)，4.43(t， 2H)，3. 98-3. 89 (m，3H)，3. 73-3. 69 (m，4H)，3. 30-3. 16 (m，6H)，3. 05 (t，2H)，2. 89 (s，3H)， 2. 13(m，2H) 〇
[0461] MS(ESI+，m/z) :[M+NH4]+m/z 526. 2118
[0462] 生物活性实验
[0463] I. [14C]-AMG 吸收测定
[0464] 本实验是用于评价钠-葡萄糖共转运体（sodium glucose co-transporter)抑制 剂的药效的实验，使用HEK293-hSGLTl、HEK293-hSGLT2稳定细胞株来评价化合物的葡萄糖 吸收能力。将制备的 pcDNA3. I (+)-FLAG-hSGLTl、pcDNA3. I (+)-FLAG-hSGLT2 载体转染到 HEK293细胞株，得到稳定细胞株。
[0465] 在 96 孔 PDL 涂层板（96well PDL coated plate)中，以 2. 5X IO4细胞 / 孔密度接 种细胞之后，在37°C、5% 0)2细胞培养基中培养一天。用IX试验缓冲液（140mM NaCl，5mM KC1，2. 5mM CaCl2, ImM MgSO4.7H20, ImM KH2PO4, IOmM HEPES)洗涤一次之后，加入 IX 试验缓 冲液并在37°C、5% CO2细胞培养基中预培养30分钟。在IX试验缓冲液中将化合物稀释成 10X。以IX方式按照各浓度在板中加入稀释后的化合物之后，在37°C、5% CO2细胞培养基 中反应1小时。
[0466] 在IX试验缓冲液中，将珀金-埃尔默（Perkin Elmer)公司的[14C]-a -甲基-D-吡 喃葡萄糖苷（[14C]-alpha-methyl_D-glucopyranoside) (Cat.NEC659250UC)放射性物质稀 释成0. 2 y Ci的浓度。板的所有孔中加入等量的稀释后[14C]-AMG之后，在37°C、5% 0)2细 胞培养基中反应2小时。用Cold DPBS进行三次洗涤之后，加入0. 2N NaOH并在常温下搅 拌10分钟，从而溶解细胞。加入MicroSinct 20溶液并在常温下搅拌15分钟而反应之后， 用 (6-闪烁计数器（0-scintillation counter)测定[14C]_AMG 的活性。使用 GraphPad Prism 4. 0软件计算出各化合物的IC5。值。
[0467] 将结果整理在下述表4中。
[0468] 【表4】
[0469]
[0471] 从上述表4可知，本申请实施例的化合物具有优异的SGLT抑制活性。
[0472] 2.糖尿排出量测定试验（UGE test)
[0473] 通过利用C57BL/6雄鼠（8周龄，orient公司制作以及供应）的糖尿排出量测定 试验，确认了上述实施例中制备的化合物的药效。
[0474] 每组使用两只小鼠。试验如下进行：在禁食16小时后，将实施例的化合物（实施 例29-40的化合物，使用10mg/kg浓度；实施例1-26的化合物，使用3mg/kg浓度）溶解于 媒介（5% 1-甲基-2-吡咯烷酮，20% PEG以及75% 20mM二磷酸钠的混合溶液），然后口服 给药，经过30分钟后，对所有个体口服给药2g/kg的葡萄糖。之后，放入代谢笼，收集24小 时尿。作为饲料给予葡萄糖，1小时之后便自由摄食。
[0475] 上述试验的结果，即，对C57BL/6雄鼠实施的根据不同实施例化合物测定的糖尿
[0479] 从上述表5可知，本申请实施例的化合物具有优异的糖尿治疗效果。
[0480] 3?口服糖耐量测定（oGTT)
[0481] 通过利用C57BL/6雄性小鼠（8周龄，orient公司供应）的口服糖耐量测定，确认 了上述实施例29制备的化合物的药效。
[0482] 共计6只小鼠禁食16小时之后，测定体重，并分为三组。之后，向各组小鼠以IOmg/ kg用量口服给药实施例29的化合物、作为载体的5% 1-甲基-2-吡咯烷酮、20% PEG和 75%20mM二磷酸钠（sodium diphophate)的混合溶液，以及作为对照物公知的SGLT2抑 制剂即卡格列净，经过30分钟后对所有个体口服给药2g/kg的葡萄糖。之后，以葡萄糖口 服给药的时间点为基准，在第-2、0、0. 25、0. 5、1以及2小时时在试验小鼠的尾巴末端尾 静脉中划出小伤口而取得血液，然后通过触点血糖仪（Onetouch blood glucose meter， OneTouch_? U丨ti'a? Lifescan，Inc.，USA)测定血糖。
[0483] 将上述结果表示在图14以及图15中。图14是表示各时间对应的血中葡萄糖浓 度的图表，图15是表示0至2小时区间的AUC (area under curve)的图表。
[0484] 从上述图14以及图15可知，与典型的SGLT2抑制剂即卡格列净相比，本发明的化 学式2的化合物显示出更加优异的血糖抑制效果。
[0485] 4.小鼠口服糖耐量实验中的半数有效剂量ED5q
[0486] 8周龄的C57BL/6J雄鼠购自北京华阜康生物科技股份有限公司。实验前适应性饲 养于SPF级动物房，饲养条件：温度：23±2°C ;采用12小时光照12小时黑暗昼夜光变化周 期；自由摄食进水。
[0487] 在正式实验前，小鼠过夜禁食16小时（不禁水）。次日清晨，称量小鼠体重，尾尖 处取血，用血糖仪（购自罗氏，型号：Accu-Chek Performa)测量小鼠禁食血糖。根据小鼠的 体重和血糖将小鼠分成不同的实验组。按照实验设计，给药30分钟后，除正常对照组（给 水）外，其他所有组口服2g/kg的10%葡萄糖水溶液，并于给糖后的0、0. 25、0. 5、1、2小时 分别测定血糖浓度。所得血糖数据用Graphpad Prism作图，并计算血糖曲线下面积（AUC)。
[0488] 根据以下公式计算血糖AUC抑制率：
[0489] % inhibition = [l-([AUC]test-[AUC]nornialV([AUC]vehlcle-[AUC] nornial)]*100,根据 浓度-抑制率曲线用Graphpad Prism四参数方程拟合计算ED5。。
[0490]如图1、图2和图3所示，在小鼠口服糖耐量试验中，实施例26的化合物剂量依赖 性地显著降低小鼠血糖，其半数有效剂量ED mS 0. 29mg/kg。
[0491] 5.小鼠口服糖耐量实验中血糖峰值偏移效应的测试
[0492] 8周龄的C57BL/6J雄鼠购自北京华阜康生物科技股份有限公司。实验前适应性饲 养于SPF级动物房，饲养条件：温度：23±2°C ;采取12小时光照