一种用于治疗卵巢癌的新二萜化合物的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于药物领域，具体涉及从芫花中分离得到的一种新的二萜化合物及其制 备方法和医药用途。
【背景技术】
[0002] 芫花又称紫芫花、南芫花、头痛花、药鱼草等，始载于《神农本草经》，列为下品，为 传统的峻下逐水药。《本草纲目》列入毒草类，按《吴普本草》谓芫花"二月生青叶，加厚则 黑，花有紫、赤、白者，三月实落尽，叶乃生。"韩保昇《蜀本草》谓"近道处处有之，苗高二三 尺。叶似白前及柳叶，根皮黄似桑根，正月二月花发，紫碧色，叶未生时收。"结合《本草图经》 "安徽滁州芫花"和"四川锦州芫花"附图看，古今药用芫花品种一致，其原植物均为Daphne genkwasieb.Etzucc?无疑。《中国药典》2010版收载其为瑞香科（Thymelaeaceae)瑞香属 (Daphne)植物芫花（Daphnegenkwasiebetzucc)的干燥花蕾。谢宗万曾对芫花进行了 本草学考证，确证了历代本草中所记载的芫花应该为紫芫花Daphnegenkwasieb.Etzucc 的干燥花蕾。该植物为全国大多数地区临床习用的品种，其野生主要产于河南、山东、江苏、 安徽、四川等省，河南省主要分布在信阳、南阳等地的山区。
[0003] 到目前为止，从芫花的花、花蕾、叶、枝条、根中提取分离出化合物有70多种，其中 含有黄酮类成分、二萜原酸酯类成分、香豆素类成分、绿原酸类成分、木脂素类成分、酚苷类 等多种成分。
[0004] 芫花为传统的峻下逐水药，有毒，功能泻水逐饮，解毒杀虫，现代研究表明其具有 以下药理作用：①利尿作用；②镇咳祛痰作用；③杀虫、抗寄生虫作用；④引产作用；⑤抗 炎、抗肿瘤作用；⑥免疫调节作用。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于提供一种从芫花中分离得到的一种新的二萜类化合物；
[0006] 本发明的另一目的在于提供该新化合物的制备方法；
[0007] 本发明的再一目的在于提供该化合物用于制备治疗卵巢癌药物的医药用途。
[0008] 本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：
[0009] 具有下述结构式的化合物（I)，
[0010]
[0011] 所述的化合物（I)的制备方法，包含以下操作步骤：(a)将干燥的芫花粉碎，用 75%乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正 丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(b)步骤（a)中乙酸 乙酯萃取物用大孔树脂除杂，依次用10 %乙醇和70 %乙醇洗脱，收集70 %乙醇洗脱液，减 压浓缩得70%乙醇洗脱物浸膏；（c)步骤（b)中70%乙醇洗脱浸膏用正相硅胶分离，依次 用体积比为80:1、40 :1、20:1、10:1和1:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到5个组分；（(1) 步骤（c)中组分3用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为30:1、20:1和10:1的二氯甲 烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；(e)步骤（d)中组分2用十八烷基硅烷键合的反相硅胶 分离，用体积百分浓度为70 %的甲醇水溶液等度洗脱，收集12个柱体积洗脱液，洗脱液减 压浓缩得到纯的化合物（I)。
[0012] 进一步地，所述大孔树脂为AB-8型大孔吸附树脂。
[0013]药物组合物，其中含有治疗有效量的所述的化合物（I)和药学上可接受的载体。
[0014] 所述的化合物（I)在制备治疗卵巢癌的药物中的应用。
[0015] 所述的药物组合物在制备治疗卵巢癌的药物中的应用。
[0016] 本发明化合物用作药物时，可以直接使用，或者以药物组合物的形式使用。
[0017]该药物组合物含有治疗有效量的本发明化合物（I)，其余为药物学上可接受的、 对人和动物无毒和惰性的可药用载体和/或赋形剂。
[0018] 所述的可药用载体或赋形剂是一种或多种选自固体、半固体和液体稀释剂、填料 以及药物制品辅剂。将本发明的药物组合物以单位体重服用量的形式使用。本发明药物可 通过口服或注射的形式施用于需要治疗的患者。用于口服时，可将其制成片剂、缓释片、控 释片、胶囊、滴丸、微丸、混悬剂、乳剂、散剂或颗粒剂、口服液等；用于注射时，可制成灭菌的 水性或油性溶液、无菌粉针、脂质体或乳剂等。
[0019] 说明书附图
[0020] 图1为化合物（I)结构式；
[0021] 图2为化合物（I)理论E⑶值与实验E⑶值比较。
【具体实施方式】
[0022] 下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明保护范 围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
[0023] 实施例1:化合物（I)分离制备及结构确证
[0024] 药材和试剂来源：乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷为分析纯，购自上海 凌峰化学试剂有限公司，甲醇，分析纯，购自江苏汉邦化学试剂有限公司。芫花购自安徽亳 州中药材市场，产地福建。
[0025] 制备方法：（a)芫花（8kg)粉碎至绿豆大小，用75%乙醇热回流提取（25LX3次）， 合并提取液，浓缩至无醇味（3L)，依次用石油醚（3LX3次）、乙酸乙酯（3LX3次）和水饱 和的正丁醇（3LX3次）萃取，浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物（375g)和正 丁醇萃取物；(b)步骤（a)中乙酸乙酯萃取物用纯净水溶解至2L，医用脱脂棉过滤，滤液用 AB-8型大孔树脂（1.5kg)分离，依次用10%乙醇（10L)和70% (12L)乙醇洗脱，收集70% 乙醇洗脱液，减压浓缩得70%乙醇洗脱物浸膏（168g) ;(c)步骤（b)中70%乙醇洗脱浸膏 用200-300目正相硅胶分离，依次用体积比为80:1 (10个柱体积）、40:1 (10个柱体积）、 20:1 (8个柱体积）、10:1 (8个柱体积）和1:1 (5个柱体积）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得 到5个组分；（d)步骤（c)中组分3 (48g)用200-300目正相硅胶进一步分离，依次用体积 比为30:1 (10个柱体积）、20:1 (8个柱体积）和10:1 (5个柱体积）的二氯甲烷-甲醇梯度 洗脱得到3个组分；（e)步骤（d)中组分2(21g)用十八烷基硅烷键合的反相硅胶0DS-C18 分离，用体积百分浓度为70 %的甲醇水溶液等度洗脱，收集12个柱体积洗脱液，洗脱液减 压浓缩得到纯的化合物（I) (31mg)。
[0026] 结构确证：HR-ES頂S显示[M+Na]+为m/z383. 1502,结合核磁特征可得分子式为 C20H2406,不饱和度为 9。核磁共振氢谱数据SH(ppm，DMS0-d6,500MHZ) :H-1(5.41，t，J= 3. 0)，H-2 (2. 40,m)，H-2 (2. 29,m)，H-3 (1. 74,m)，H-3 (1. 49,m)，H-4 (1. 68,t，J= 3. 0)， H-6(4.61，d，J= 9.6)，H-7(2.83，dd，J= 17.4,9.6)，H-7(2.64，d，J= 17.4)，H-9(2.65， m)，H-ll(2.34,m，2H)，H-12 (5.47,t，J= 6.0)，H-14 (6.28,br，s)，H-15 (7.34,br，s)， H-16(7. 35,br，s)，H-17(2. 18,s)，H-18(5. 75,m)，H-19(l. 11，s)，18-0H(4. 52,s);核磁 共振碳谱数据Sc (ppm,DMS0-d6,125Hz) : 121. 9 (CH，1-C)，22. 1 (CH2, 2-C)，16. 0 (CH2, 3-C)， 58. 7 (CH，4-C)，42. 4 (C，5-C)，77. 7 (CH，6-C)，42. 0 (CH2, 7-C)，203. 5 (C，8-C)，40. 6 (CH， 9-C)，138. 6(C，10-C)，33. 2(CH2,11-C)，71. 6(CH，12-C)，123. 2(C，13-C)，107. 4(CH，14-C)， 143. 4 (CH，15-C)，138. 8 (CH，16-C)，29. 9 (CH3,17-C)，102. 4 (CH，18-C)，22. 1 (CH