一种具有抗肿瘤性能的苦参碱衍生物的制作方法
【专利说明】-种具有抗肿瘤性能的苦参碱衍生物 【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种衍生物，具体讲涉及一种具有抗肿瘤性能的苦参碱衍生物及其治 疗上可接受的盐。 【【背景技术】】
[0002] 苦参碱广泛存在于豆科植物苦参、苦豆子及广豆根中，1958年首次被分离和确认， 是中药苦参的主要活性成分之一，研究表明，苦参碱具有解热、降温、镇痛、镇静、保护必肌 缺血、减轻必肌损伤、抗必律失常、防止肝纤维化及抗己型肝炎病毒等多种药理作用。目前， 苦参碱用于临床的主要制剂有苦参碱注射液、苦参碱栓、苦参碱滴眼液、苦参碱肠溶片、苦 参碱胶丸等。近年来的研究显示，苦参碱具有广谱抗肿瘤作用，且对正常细胞不产生破坏作 用，甚至能升高白细胞数，提高机体免疫功能。虽然苦参碱具有广谱的抗肿瘤作用，但是其 抗肿瘤活性不高，且自身没有可W修饰的基团，在临床上的应用受到限制。若选用具有协同 作用的抗癌基团或药物对苦参碱进行修饰，有望获得肿瘤活性强的衍生物。
[0003] 美法仑为左旋体苯丙氨酸氮芥，为多发性骨髓瘤的首选药，对多种良性、恶性肿瘤 均具有较好疗效，其化学名称为4-(双2-氯己基）氨基-k苯丙氨酸。苯达莫司汀兼具 有焼化剂和嘿岭类似物（抗代谢药）的双重作用，临床上可用于治疗霍奇金病、非霍奇金 淋己瘤、多发性骨髓瘤和乳腺癌等多种恶性肿瘤，其结构式为4-巧-[双-(2-氯己基）氨 基]-1-甲基-2-苯并咪哇基}-了酸。环磯醜胺是临床上常规使用的强效抗癌药物，在体 外无抗肿瘤活性，通过在肝脏代谢并在癌细胞内分解之后所产生的活性代谢产物为磯醜氮 芥二氯，磯醜氮芥二氯的结构式为二（2-氯己基）氨基磯醜二氯。氮芥类药物具有抗瘤谱 广，对肿瘤细胞杀伤力强等优点，作用祀点是DNA，但亦存在治疗效率低、选择性差、毒副作 用大等缺点，使其不能广泛地应用于临床。甘草次酸具有较好的肝祀向潜能，其具有良好的 保肝解毒及一定的抗癌作用，并能促进癌细胞调亡。肝细胞膜上存在大量甘草次酸的特异 性结合位点，因此甘草次酸具有较强的肝分布特征和肝细胞祀向性。W上几种药物本身都 具有的较强的抗肿瘤活性，而且含有駿基或磯醜基更方便联结进行修饰。 【
【发明内容】
】
[0004] 本发明的目的在于提供一种高活性的，低毒性，具有良好抗肿瘤性能的苦参碱衍 生物及其药学上可接受的盐类。
[0005] -种苦参碱衍生物及其治疗上可接受的盐，其结构是W下通式I:
[0006]
[0007]Rx为Rxi、把2、把3、把4、把5、Rxe或Rx?:
[0008]
[0009] 第二种苦参碱衍生物及其治疗上可接受的盐，其特征在于；其结构用通式II所 示：
[0010]
[0011] Rx为Rxi、把2、把3、把4、Rxs、Rxe或Rx?:
[0012]
[0013] 制备上述苦参碱衍生物及其治疗上可接受的盐所采用的原料包括槐果碱。
[0014] 第Η种苦参碱衍生物及其治疗上可接受的盐，其特征在于；其结构用通式III表 示：
[0015]
[0016] Rx为Rxi、把2、把3、把4、Rxs、Rxe或Rx?:
[0017]
[0018] 优选的，制备所述通式I，反应生成的中间体1为13-(2-居基）己氧基苦参碱，由 槐果碱与钢和己二醇反应生成，所述中间体1的结构式为：
[0019]
[0020] 再一优选的，通式I的制备方法为，中间体1与美法仑、苯达莫司汀、二（2-氯己 基）氨基磯醜二氯、3-撰基-18α-甘草次酸、3-撰基-18目-甘草次酸、苯甲酸氮芥或苯了 酸氮芥反应生成。
[0021] 该反应适宜的溶剂包括水、甲苯、化巧、氯仿、二氯甲焼。
[0022] 洗脱剂包括石油離、己酸己醋、二氯甲焼、甲醇中的一种或几种的混合液。
[0023] 优选的，制备所述通式II的苦参碱衍生物，反应生成的中间体为13-(2-氨基）己 氧基苦参碱，所述中间体的结构式为：
[0024]
[00巧]再一优选的，通式II的制备方法为，中间体2与美法仑、苯达莫司汀、二（2-氯己 基）氨基磯醜二氯、3-撰基-18α-甘草次酸、3-撰基-18目-甘草次酸、苯甲酸氮芥或苯了 酸氮芥反应生成。
[0026] 该反应适宜的溶剂包括水、四氨巧喃（THF)、甲苯、化巧、氯仿、二氯甲焼、Η氯甲 焼。
[0027] 洗脱剂为石油離、己酸己醋、二氯甲焼、甲醇中的一种或几种的混合液。
[0028] 优选的，制备所述通式III，反应生成的中间体为苦参酸己醋，所述中间体的结构式 为：
[0029]
〇
[0030] 再一优选的，所述的中间体苦参酸己醋是由苦参碱先与化0Η的醇溶液生成苦参 酸，再与己醇反应制得。
[0031] 另一优选方案中通式III的制备方法为，中间体3与美法仑、苯达莫司汀、二（2-氯 己基）氨基磯醜二氯、3-撰基-18α-甘草次酸、3-撰基-18目-甘草次酸、苯甲酸氮芥或苯 了酸氮芥反应生成。
[003引该反应适宜的溶剂包括水、四氨巧喃灯HF)、甲苯、化巧、氯仿、二氯甲焼、Η氯甲 焼。
[0033] 洗脱剂为石油離、己酸己醋、二氯甲焼、甲醇、己醇或几种的混合液。
[0034] 所述的苦参碱衍生物及其治疗上可接受的盐具有在制备抗肿瘤药物中的用途。
[0035] 优选的，所述的苦参碱衍生物及其治疗上可接受的盐具有在制备抗肿瘤药物中的 用途，其中所述肿瘤为肝癌、乳腺癌和骨肉瘤。
[0036] 苦参碱衍生物治疗上可接受的盐是指盐酸盐、硫酸盐、硫酸氨盐、氨漠酸盐、草酸 盐、巧樣酸盐或甲礙酸盐等。
[0037] W下为用本发明方法合成的化合物一览表：
[0038]
[0039]
[0040]
[0041]
[0042] 本发明提供了一种苦参碱衍生物及其药学上可接受的盐，较苦参碱相比，抗肿瘤 活性有了明显的提高，扩大了抗肿瘤药物的种类，给癌症患者多了一种治疗的选择。 【【具体实施方式】】
[0043] 主要仪器与试剂
[0044] RY-1型显微烙点仪（温度计未效正）；BRUKERAC-P400核磁仪灯MS为电NMR的 内标）；VGZAB-服型质谱仪；德国贺利氏公司Vanio-化型元素分析仪。
[0045] 槐果碱购于盐池县都顺生物化工有限公司，美法仑购于苏州市立德化学有限公 司，苯达莫司汀购于海格生物科技科技（上海）有限公司；二氯甲焼与Η氯甲焼使用前均用CaHz重蒸过，并加入4Α°分子筛保存；化巧使用前用ΚΟΗ重蒸过，并加入4Α°分子筛保存； 其他试剂均为市售分析纯，使用前未经处理。实施例中所述1%的化0Η是指IgNaOH溶于 lOOmL去离子水。
[0046] 实施例1
[0047] 制备通式I所示的苦参碱衍生物的方法：
[0048] 13-(2-居基）己氧基苦参碱（化合物1)的制备
[0049]
[0050] 向干燥的100血的Η口烧瓶中加入30血干燥己二醇，的气氛保护下投入0.lOg 钢丝，升温至5(TC，揽拌反应。待钢丝完全消失，停止加热，冷却至室温。取2.OOg槐果碱 溶于10血己二醇，缓慢滴入上述反应瓶中，逐渐升温至60。TLC跟踪反应进程，2化后， 向反应液中加入lOmL水终止反应，用15mL氯仿萃取Η次，合并萃取液，无水化2SO4干燥 过夜，过滤，减压浓缩得黄色油状物粗品。用己酸己醋和己醇体积比为80 ;1的混合液进 行洗脱，柱色谱分离得淡黄色固体1.72g，产率68.8%，烙点m.p.为57°C。古NMR(CDCl3， 400MHz)，δH;4. 32 (1H，dd，J= 12. 9,4. 4Hz，17-He)，3. 94 (1H，td，J= 10. 0, 5.細Z，11-H)， 3. 80 (IH，dd，J= 5. 5, 2.OHz，17-Ha)，3. 68-3. 65 (2H，m，19-田，3. 57-3. 48 (2H，m，18-H)， 3. 05 (IH，m，13-H)，2. 79 (2H，dd，J= 16. 4,13. 4Hz，2、10-He)，2. 59-2. 41 (3H，m，2、10-Ha, 14-He)，2. 26-2. 19 (IH，m，6-H)，2. 07 (IH，s，OH)，1. 98-1. 37 (14H，m，14-Ha，CH，邸2)。元 素分析，。品8成〇3,实测值（计算值），％ ;C66. 15 化6. 20) ;H9. 03 巧.巧）；015. 61 (15. 56); N9. 21(9. 08)0MS(ESI)m/z：309. 33(M+H)"〇
[0051] 1-1 13-{2-[4-(双2-氯己基）氨基-心苯丙氨酸醋基]己氧基}苦参碱化SJ-1) 的制备
[0052]
[005引向50血的单口圆底烧瓶中加入30血甲苯，取0. 50血浓H2SO4缓慢滴加到甲苯 中。充分混匀后，加入0.40g化合物1，揽拌溶解。揽拌下分多次加入0. lOg美法仑，继续 揽拌至澄清。于烧瓶顶部安置分水器及冷凝管，升温至125~13(TC回流反应5.化，分水器 除去反应产生的水。后处理时，减压蒸除反应液中的甲苯，得踪色油状物，加入lOmL蒸傭 水，用1%的化0H溶液调节至抑=7~8,用15血氯仿萃取Η次，合并萃取液，无水Na2S04 干燥过夜，过滤，减压浓缩得黄色油状物粗品。用石油離和己酸己醋体积比为1;1的混 合液进行洗脱，色谱柱分离得目标化合物为黄色油状物0. 12g，产率61%。古NMR(CDCl3， 400Hz)，5h;7. 10(2H，d，J= 7. 9Hz，ArH)，6. 63(2H，d，J= 7.細Z，ArH)，5. 64(2H，d，J= 34.甜z，NH2)，4. ：M(1H，dd，J= 12. 8,3.細z，21-H)，4. 29-4. 07(2H，m，19-H)，3. 99(1H，dd， J= 14. 8,9. 8Hz，17-He)，3. 84(1H，m，22-H)，3. 74-3. 61(10H，m，2XCH2Cl，2XNCH2，18-H), 3. 20-2. 91(2H，m，ll-H，17-Ha)，2. 79(3H，m，6、13、22-H)，2. 53(2H，dd，J = 54. 4，17. OHz, 2、10-He)，2. 30-2. 16(2H，m，2、10-Ha)，2. 10(IH，m，14-He)，1. 75-1. 21(13H，m，14-Ha，CH, 邸2)。元素分析，CsoHaaCIzNaO"实测值（计算值），％;C61. 03化0. 50)巧7. 47 (7.侣）； 010.77(10.75)；N9. 27(9. 41)；C111. 45 (11. 90)0MS(ESI)m/z：595. 3(M+H)\
[0054] 1-2 13-巧-(4-15-[双-(2-氯己基）氨基]-1-甲基-2-苯并咪哇基}-了酸醋 基）己氧基]苦参碱化SJ-2)的制备
[00巧]
[005引 向50血的单口圆底烧瓶中加入30血甲苯，取0. 50血浓H2SO4缓慢滴加到甲苯 中。充分混匀后，加入0. 40g化合物1，揽拌溶解。揽拌下分多次加入0.lOg苯达莫司汀， 继续揽拌至澄清。于烧瓶顶部安置分水器及冷凝管，升温至125~13(TC回流反应5.化， 分水器除去反应产生的水。后处理时，减压蒸除反应液中的甲苯，得踪色油状物，加入lOmL 蒸傭水，用1 %的化OH溶液调节至抑=7~8,用15mL氯仿萃取Η次，合并萃取液，无水 Na2S04干燥过夜，过滤，减压浓缩得黄色油状物粗品。用石油離和己酸己醋体积比为8;1 混合液进行洗脱，色谱柱分离得目标化合物为淡黄色油状物，产率53%。古NMR(CDCl3， 400Hz)，5h:7.23-7. 17 (lH，m，ArH)，7. 13-7. 04 (lH，m，ArH)，6.80 (lH，d，J= 10. 7Hz，ArH), 4. 38 (IH，dd，J = 12.8,4. IHz，17-He)，4. 02-3. 65 (13H，m，2 X CH2CI，N-CH3, 2 X NCH2,19-H)， 3. 10 (IH，t，J= 12. 7Hz，17-Ha)，2. 87 (4H，dt，J= 25. 5,9. 9Hz，18-H，23-H)，2. 61-2. 47 (4H， m，11-H，2、10-He，13-H)，2. 19(4H，dt，J= 24.6, 7. 7Hz，21-H，2、10-Ha)，2. 04(3H，m，14-He， 22-H)，1. 78-1. 39 (14H，m，14-化，CH，邸2)。元素分析，C33H47CI2N日O4,实测值（计算值），％: 061.46(61.10)巧7. 34(7. 30) ;09.68巧.87) ;N10. 87(10. 80) ;C110. 65(10. 93)。MS(ESI)m/ z:648. 5 (M+H)"ο
[0057] 1-3 13-{2-[P-[二（2-氯己基）氨基]-P-居基-磯醜醋基]-己氧基}苦参碱 (KSJ-3)的制备
[0058]
[0059] 1-3-1二（2-氯己基）胺盐酸盐的制备
[0060]
[0061] 取干燥的250mLΗ口圆底烧瓶，装置上机械揽拌和顶部带有干燥管及毒气处理装 置的冷凝管，加入22.OOg经过钢